發(fā)布時(shí)間：2020-08-04 07:33

【摘要】：目的:新生兒缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是造成新生兒死亡和兒童永久性神經(jīng)功能障礙的常見(jiàn)原因。其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,因此缺乏有效的防治手段。最近的許多研究提示了環(huán)氧合酶2(COX-2)在HIBD發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用。但其作用時(shí)相及表達(dá)方式尚不清楚。 本實(shí)驗(yàn)采用新生鼠HIBD模型,通過(guò)免疫組化方法測(cè)定其在HIBD發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的表達(dá),并應(yīng)用選擇性COX-2抑制劑NS398進(jìn)行干預(yù),觀察COX-2免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性數(shù)、海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù)及神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)表達(dá)變化,了解HIBD發(fā)生發(fā)展過(guò)程中COX-2的在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)及時(shí)相上的變化,以進(jìn)一步明確COX-2與HIBD之間的相互作用,并在不同時(shí)相及劑量給予選擇性COX-2抑制劑NS398進(jìn)行干預(yù)后研究NS398在新生鼠HIBD中的保護(hù)作用,為臨床防治新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy HIE)尋求新的途徑。 方法:7日齡(postnatal day 7,P7)Wistar大鼠,采用Rice法建立新生鼠HIBD模型,隨機(jī)分成正常對(duì)照組、缺氧缺血組(HIBD組)、NS398干預(yù)組。于缺氧缺血(hypoxia-ischemia.HI)后2、6、24、72小時(shí)、7天取腦,其中干預(yù)組分別于處置前30分鐘分別給予5、20、40mg/kg NS398進(jìn)行干預(yù),選擇出其中最為合適的劑量后,再增加HI后2、6小時(shí)干預(yù)組;HE染色觀察組織病理改變,計(jì)數(shù)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù);免疫組化、圖像分析軟件檢測(cè)雙側(cè)腦半球橫截面積之比以及免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性數(shù)表達(dá)變化;TUNEL法檢測(cè)腦組織細(xì)胞凋亡。 結(jié)果:(1).HI處置后2小時(shí)COX-2即見(jiàn)明顯免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性表達(dá),在6小時(shí)—24小時(shí)后最高,并持續(xù)增高到7天后;對(duì)照組可見(jiàn)微量免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性表達(dá)。HIBD組明顯高于對(duì)照組(p0.01)。免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞主要見(jiàn)于星形膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元細(xì)胞,其中以星形膠質(zhì)細(xì)胞為最明顯;表達(dá)部位主見(jiàn)于皮質(zhì)、海馬位置;血管旁表達(dá)最為明顯。(2).三種劑量的NS398干預(yù)后,檢測(cè)免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性表達(dá)均較HIBD組明顯下降(p0.01);5mg/kg給藥組明顯高于20及40mg/kg給藥組(p0.05);20及40mg/kg給藥組除HIBD7d觀察組p0.01外未見(jiàn)顯著區(qū)別(p0.05);術(shù)后2、6h
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R722.1
【圖文】：

圖1新生大鼠腦缺氧缺血損傷時(shí)的左側(cè)腦組織COX一2表達(dá)變化對(duì)比3.NS398組的COX一2表達(dá)變化3.1NS398不同劑量組的COX一2表達(dá)變化3.1.1三種劑量的NS398干預(yù)后，檢測(cè)免疫細(xì)胞化學(xué)陽(yáng)性表達(dá)均較HBID組明顯(P<0.01);表2術(shù)前3ominsmg吸9Ns398干預(yù)組與HIBn組左側(cè)腦組織eox一2表達(dá)變化對(duì)比C(ox一2免疫化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目總計(jì)一百分比對(duì)照(無(wú)士)s%表示)例數(shù)術(shù)前3ominsmkg/gNs39s干預(yù)組HIBDZh60.97土0.06HIBD6h60.85土0.08HIBD24h60.63士0.08HIBD組1.85士0.142.28士0.102.]6士0.18

圖2術(shù)前3ominsmgklgNs398干預(yù)組與HIBn組左側(cè)腦組織COx一2表達(dá)變化對(duì)比表3術(shù)前3omin20m眺9Ns398干預(yù)組與HIBD組左側(cè)腦組織coX一2表達(dá)變化對(duì)比C(OX一2免疫化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目總計(jì)百分比對(duì)照(云士)s%表示)例數(shù)術(shù)前3ominZomkg/gNs398干預(yù)組HIBD組HIBDZh60.84土0.081.85土0.14HIBO6h60，74士0.072.28士0.10HIBD24h60.50士0.112.16士0.187門(mén)j0...1HIBD72h60.34土0HIBD7d60，58士O1.78士0.131.53士0.14注:*與同一時(shí)間HBID組比較P<.001

圖3術(shù)前30minZomkg/gNs39s干預(yù)組與HIBo組左側(cè)腦組織eox一2表達(dá)變化對(duì)比表4術(shù)前30mni40mkg/gNs398干預(yù)組與HIBD組左側(cè)腦組織eox一2表達(dá)變化對(duì)比C(OX一2免疫化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目總計(jì)百分比對(duì)照(分士)s%表示)例數(shù)術(shù)前30min4omkg/gNs398干預(yù)組HIBD組HIBDZh60.85士0.031.85生0.14HIBD6h60.72士0.042.28生0.HIBD24h60.48均.062.16土0l0l8HIBD72h60.30士0.0978士0.13HIBD7d60.】6土0.061.53土0.14注:*與同一時(shí)間HBID組比較P<0.01

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 孫忠實(shí),朱珠;當(dāng)代藥物不良反應(yīng)的特點(diǎn)與對(duì)策(1)[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊;2003年01期

本文編號(hào)：2780242