發(fā)布時間：2020-08-04 07:33

【摘要】：目的:新生兒缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是造成新生兒死亡和兒童永久性神經(jīng)功能障礙的常見原因。其發(fā)病機制尚不完全清楚,因此缺乏有效的防治手段。最近的許多研究提示了環(huán)氧合酶2(COX-2)在HIBD發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。但其作用時相及表達方式尚不清楚。 本實驗采用新生鼠HIBD模型,通過免疫組化方法測定其在HIBD發(fā)生發(fā)展過程中的表達,并應(yīng)用選擇性COX-2抑制劑NS398進行干預(yù),觀察COX-2免疫細胞化學(xué)陽性數(shù)、海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù)及神經(jīng)細胞凋亡數(shù)表達變化,了解HIBD發(fā)生發(fā)展過程中COX-2的在神經(jīng)細胞中的表達及時相上的變化,以進一步明確COX-2與HIBD之間的相互作用,并在不同時相及劑量給予選擇性COX-2抑制劑NS398進行干預(yù)后研究NS398在新生鼠HIBD中的保護作用,為臨床防治新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy HIE)尋求新的途徑。 方法:7日齡(postnatal day 7,P7)Wistar大鼠,采用Rice法建立新生鼠HIBD模型,隨機分成正常對照組、缺氧缺血組(HIBD組)、NS398干預(yù)組。于缺氧缺血(hypoxia-ischemia.HI)后2、6、24、72小時、7天取腦,其中干預(yù)組分別于處置前30分鐘分別給予5、20、40mg/kg NS398進行干預(yù),選擇出其中最為合適的劑量后,再增加HI后2、6小時干預(yù)組;HE染色觀察組織病理改變,計數(shù)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù);免疫組化、圖像分析軟件檢測雙側(cè)腦半球橫截面積之比以及免疫細胞化學(xué)陽性數(shù)表達變化;TUNEL法檢測腦組織細胞凋亡。 結(jié)果:(1).HI處置后2小時COX-2即見明顯免疫細胞化學(xué)陽性表達,在6小時—24小時后最高,并持續(xù)增高到7天后;對照組可見微量免疫細胞化學(xué)陽性表達。HIBD組明顯高于對照組(p0.01)。免疫細胞化學(xué)陽性表達細胞主要見于星形膠質(zhì)細胞及神經(jīng)元細胞,其中以星形膠質(zhì)細胞為最明顯;表達部位主見于皮質(zhì)、海馬位置;血管旁表達最為明顯。(2).三種劑量的NS398干預(yù)后,檢測免疫細胞化學(xué)陽性表達均較HIBD組明顯下降(p0.01);5mg/kg給藥組明顯高于20及40mg/kg給藥組(p0.05);20及40mg/kg給藥組除HIBD7d觀察組p0.01外未見顯著區(qū)別(p0.05);術(shù)后2、6h
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R722.1
【圖文】：

圖1新生大鼠腦缺氧缺血損傷時的左側(cè)腦組織COX一2表達變化對比3.NS398組的COX一2表達變化3.1NS398不同劑量組的COX一2表達變化3.1.1三種劑量的NS398干預(yù)后，檢測免疫細胞化學(xué)陽性表達均較HBID組明顯(P<0.01);表2術(shù)前3ominsmg吸9Ns398干預(yù)組與HIBn組左側(cè)腦組織eox一2表達變化對比C(ox一2免疫化學(xué)陽性細胞數(shù)目總計一百分比對照(無士)s%表示)例數(shù)術(shù)前3ominsmkg/gNs39s干預(yù)組HIBDZh60.97土0.06HIBD6h60.85土0.08HIBD24h60.63士0.08HIBD組1.85士0.142.28士0.102.]6士0.18

圖2術(shù)前3ominsmgklgNs398干預(yù)組與HIBn組左側(cè)腦組織COx一2表達變化對比表3術(shù)前3omin20m眺9Ns398干預(yù)組與HIBD組左側(cè)腦組織coX一2表達變化對比C(OX一2免疫化學(xué)陽性細胞數(shù)目總計百分比對照(云士)s%表示)例數(shù)術(shù)前3ominZomkg/gNs398干預(yù)組HIBD組HIBDZh60.84土0.081.85土0.14HIBO6h60，74士0.072.28士0.10HIBD24h60.50士0.112.16士0.187門j0...1HIBD72h60.34土0HIBD7d60，58士O1.78士0.131.53士0.14注:*與同一時間HBID組比較P<.001

圖3術(shù)前30minZomkg/gNs39s干預(yù)組與HIBo組左側(cè)腦組織eox一2表達變化對比表4術(shù)前30mni40mkg/gNs398干預(yù)組與HIBD組左側(cè)腦組織eox一2表達變化對比C(OX一2免疫化學(xué)陽性細胞數(shù)目總計百分比對照(分士)s%表示)例數(shù)術(shù)前30min4omkg/gNs398干預(yù)組HIBD組HIBDZh60.85士0.031.85生0.14HIBD6h60.72士0.042.28生0.HIBD24h60.48均.062.16土0l0l8HIBD72h60.30士0.0978士0.13HIBD7d60.】6土0.061.53土0.14注:*與同一時間HBID組比較P<0.01

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 孫忠實,朱珠;當(dāng)代藥物不良反應(yīng)的特點與對策(1)[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)刊;2003年01期

本文編號：2780242