【摘要】： 目的 白血病是嚴(yán)重危害人類健康的造血系統(tǒng)腫瘤，也是兒童最常見的惡性腫瘤。探索白血病的發(fā)病機(jī)制從而最終根治這種疾病一直是醫(yī)學(xué)界的重大課題。細(xì)胞周期是細(xì)胞生命活動(dòng)的基本過程，細(xì)胞在周期時(shí)相的變遷中進(jìn)入增殖、分化、衰老和死亡等生理狀態(tài)。真核生物細(xì)胞周期失控是細(xì)胞過度增殖及癌變的重要原因 。近年來對(duì)細(xì)胞周期的研究取得了許多突破性進(jìn)展。發(fā)現(xiàn)并確立了細(xì)胞周期蛋白（Cyclin）、細(xì)胞周期蛋白依賴激酶（CDK）和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CKI）在真核生物細(xì)胞周期調(diào)控中的作用。由細(xì)胞周期蛋白（Cyclin）依次激活相應(yīng)的細(xì)胞周期蛋白依賴激酶（CDK）所推動(dòng)，Cyclin的周期性積累與分解對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)展起著正調(diào)控作用，而細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CKI）則在細(xì)胞周期適當(dāng)?shù)臅r(shí)間點(diǎn)上抑制CDK的活性，從而對(duì)細(xì)胞周期起著負(fù)調(diào)控作用。目前已知的CKI可劃分為兩大類：一類為INK4，特異性抑制CDK4-CyclinD1、CDK6-CyclinD1的磷酸化激酶活性；另一類為KIP，抑制現(xiàn)已知的大多數(shù)CDK-Cyclin的磷酸化激酶活性。P21~(WAF1)、P27~(KIP1)屬CKI家族中KIP WP=6 成員，在氨基末端有結(jié)構(gòu)及功能相似性，都有一個(gè)保守的80個(gè)氨基酸序列，能抑制CDK4-CyclinD1、CDK6-CyclinK1、CDK2-CyclinE、CDK2-CyclinA的蛋白激酶活性。正常情況下，P21WAF1、P27KIP1以量的方式調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和細(xì)胞分化，在絕大多數(shù)真核生物細(xì)胞中均有表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)P21WAF1、P27KIP1在某些實(shí)體瘤及成人白血病存在表達(dá)異常。本研究旨在探討細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子P21~(WAF1)、P27~(KIP1)在兒童急性白血病的表達(dá)情況及臨床意義。 方法 采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。免疫組化測(cè)定白血病單個(gè)核細(xì)胞P21~(WAF1)、P27~(KIP1)表達(dá)情況；部分病人經(jīng)治療達(dá)緩解后隨訪；分別觀察陽性率及表達(dá)強(qiáng)度。以同期特發(fā)性血小板減少性紫癜及正常增生性骨髓作為對(duì)照。采用卡方檢驗(yàn)及t檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果 初診AL患兒的G0/G1%明顯低于對(duì)照組(P0.05), S%和G2/M%則高于對(duì)照組(P0.05), 經(jīng)誘導(dǎo)化療達(dá)緩解后復(fù)查其骨髓細(xì)胞周期表現(xiàn)為：G0\G1期細(xì)胞增加，而S及G2/M期細(xì)胞減少，前后變化有顯著差異(P0.05)。測(cè)得32 例白血病骨髓涂片標(biāo)本中，P21WAF1總陽性率為12.5%（4/32），其中ALL 9.1%（2/22），ANLL 20%（2/10）；P27總陽性率為 40.6%（13/32），其中ALL 50%（11/22），ANLL 40 %（4/10）。與對(duì)照組比較，ALL及ANLL P21WAF1或P27KIP1表達(dá)陽性率均低于對(duì)照組(P0.05)。在陽性病例中，P21WAF1陽性細(xì)胞百分率在ALL與AML無差異，但積分顯示陽性程度ALL弱于AML； P27KIP1陽性細(xì)胞率及積分在ALL及AML均無顯著差異（P＞0.05）。隨訪觀察部分病例， WP=7 經(jīng)誘導(dǎo)化療達(dá)到完全緩解后隨訪，兩種蛋白有陽轉(zhuǎn)或表達(dá)增強(qiáng)現(xiàn)象。 本研究發(fā)現(xiàn)多數(shù)非白血病病人為P21~(WAF1)、P27~(KIP1)陽性表達(dá)，而白血病病人其陽性率明顯低于對(duì)照組，陽性病例陽性程度弱于對(duì)照組，因此，白血病病人存在P21~(WAF1)、P27~(KIP1)低表達(dá)。P21~(WAF1)、P27~(KIP1)正常作用靶位位于細(xì)胞核，于細(xì)胞漿合成的P21~(WAF1)、P27~(KIP1)蛋白需跨過核膜發(fā)揮其調(diào)控作用。本研究中部分P27KIP1陽性表達(dá)的細(xì)胞則見于細(xì)胞漿，因此，白血病細(xì)胞周期調(diào)控的異常除與其蛋白表達(dá)量有關(guān)外，可能與P27KIP1蛋白的跨核膜障礙也有一定的關(guān)系。 結(jié)論 實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)：白血病骨髓細(xì)胞存在細(xì)胞周期的紊亂。白血病P21~(WAF1)、P27~(KIP1)低表達(dá)及在急性淋巴細(xì)胞白血病與急性非淋巴細(xì)胞白血病中無顯著差異，提示P21~(WAF1)、P27~(KIP1)低表達(dá)均參與了急性白血病的發(fā)生發(fā)展；隨訪部分病人發(fā)現(xiàn)隨臨床緩解，P21~(WAF1)、P27~(KIP1)表達(dá)增強(qiáng)，提示P21~(WAF1)、P27~(KIP1)可以作為病情恢復(fù)的一個(gè)分子學(xué)指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R733.71

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 王翠蓮,肖鵬,賈宗智,李宗鉉;小腸腫瘤P21蛋白表達(dá)意義的研究[J];長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1998年02期

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本文編號(hào)：2776895