【摘要】： 目的 白血病是嚴重危害人類健康的造血系統(tǒng)腫瘤，也是兒童最常見的惡性腫瘤。探索白血病的發(fā)病機制從而最終根治這種疾病一直是醫(yī)學(xué)界的重大課題。細胞周期是細胞生命活動的基本過程，細胞在周期時相的變遷中進入增殖、分化、衰老和死亡等生理狀態(tài)。真核生物細胞周期失控是細胞過度增殖及癌變的重要原因 。近年來對細胞周期的研究取得了許多突破性進展。發(fā)現(xiàn)并確立了細胞周期蛋白（Cyclin）、細胞周期蛋白依賴激酶（CDK）和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CKI）在真核生物細胞周期調(diào)控中的作用。由細胞周期蛋白（Cyclin）依次激活相應(yīng)的細胞周期蛋白依賴激酶（CDK）所推動，Cyclin的周期性積累與分解對細胞周期進展起著正調(diào)控作用，而細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CKI）則在細胞周期適當(dāng)?shù)臅r間點上抑制CDK的活性，從而對細胞周期起著負調(diào)控作用。目前已知的CKI可劃分為兩大類：一類為INK4，特異性抑制CDK4-CyclinD1、CDK6-CyclinD1的磷酸化激酶活性；另一類為KIP，抑制現(xiàn)已知的大多數(shù)CDK-Cyclin的磷酸化激酶活性。P21~(WAF1)、P27~(KIP1)屬CKI家族中KIP WP=6 成員，在氨基末端有結(jié)構(gòu)及功能相似性，都有一個保守的80個氨基酸序列，能抑制CDK4-CyclinD1、CDK6-CyclinK1、CDK2-CyclinE、CDK2-CyclinA的蛋白激酶活性。正常情況下，P21WAF1、P27KIP1以量的方式調(diào)節(jié)細胞周期和細胞分化，在絕大多數(shù)真核生物細胞中均有表達。研究發(fā)現(xiàn)P21WAF1、P27KIP1在某些實體瘤及成人白血病存在表達異常。本研究旨在探討細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子P21~(WAF1)、P27~(KIP1)在兒童急性白血病的表達情況及臨床意義。 方法 采用流式細胞儀檢測細胞周期。免疫組化測定白血病單個核細胞P21~(WAF1)、P27~(KIP1)表達情況；部分病人經(jīng)治療達緩解后隨訪；分別觀察陽性率及表達強度。以同期特發(fā)性血小板減少性紫癜及正常增生性骨髓作為對照。采用卡方檢驗及t檢驗對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果 初診AL患兒的G0/G1%明顯低于對照組(P0.05), S%和G2/M%則高于對照組(P0.05), 經(jīng)誘導(dǎo)化療達緩解后復(fù)查其骨髓細胞周期表現(xiàn)為：G0\G1期細胞增加，而S及G2/M期細胞減少，前后變化有顯著差異(P0.05)。測得32 例白血病骨髓涂片標本中，P21WAF1總陽性率為12.5%（4/32），其中ALL 9.1%（2/22），ANLL 20%（2/10）；P27總陽性率為 40.6%（13/32），其中ALL 50%（11/22），ANLL 40 %（4/10）。與對照組比較，ALL及ANLL P21WAF1或P27KIP1表達陽性率均低于對照組(P0.05)。在陽性病例中，P21WAF1陽性細胞百分率在ALL與AML無差異，但積分顯示陽性程度ALL弱于AML； P27KIP1陽性細胞率及積分在ALL及AML均無顯著差異（P＞0.05）。隨訪觀察部分病例， WP=7 經(jīng)誘導(dǎo)化療達到完全緩解后隨訪，兩種蛋白有陽轉(zhuǎn)或表達增強現(xiàn)象。 本研究發(fā)現(xiàn)多數(shù)非白血病病人為P21~(WAF1)、P27~(KIP1)陽性表達，而白血病病人其陽性率明顯低于對照組，陽性病例陽性程度弱于對照組，因此，白血病病人存在P21~(WAF1)、P27~(KIP1)低表達。P21~(WAF1)、P27~(KIP1)正常作用靶位位于細胞核，于細胞漿合成的P21~(WAF1)、P27~(KIP1)蛋白需跨過核膜發(fā)揮其調(diào)控作用。本研究中部分P27KIP1陽性表達的細胞則見于細胞漿，因此，白血病細胞周期調(diào)控的異常除與其蛋白表達量有關(guān)外，可能與P27KIP1蛋白的跨核膜障礙也有一定的關(guān)系。 結(jié)論 實驗結(jié)果證實：白血病骨髓細胞存在細胞周期的紊亂。白血病P21~(WAF1)、P27~(KIP1)低表達及在急性淋巴細胞白血病與急性非淋巴細胞白血病中無顯著差異，提示P21~(WAF1)、P27~(KIP1)低表達均參與了急性白血病的發(fā)生發(fā)展；隨訪部分病人發(fā)現(xiàn)隨臨床緩解，P21~(WAF1)、P27~(KIP1)表達增強，提示P21~(WAF1)、P27~(KIP1)可以作為病情恢復(fù)的一個分子學(xué)指標。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號】：R733.71

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：2776895