【摘要】：目的：新生兒缺氧缺血性腦�。╤ypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）是指圍生期窒息引起的部分或完全缺氧、腦血流減少或暫停而導致胎兒或新生兒腦損傷，目前尚無有效的治療方法。本研究建立新生SD大鼠缺氧缺血性腦�。╤ypoxic-ischemic brain damage，HIBD)模型，給與重組人促紅細胞生成素(recombinant human erythropoietin，rh-EPO)干預，觀察不同時間點各組SD大鼠腦組織病理變化，檢測不同時間點各組外周血中白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量，探討促紅細胞生成素對新生SD大鼠HIBD炎癥反應的影響。 方法：新生7日齡SD大鼠，性別不限，體質量12～16g，共90只，隨機分成3組， HIBD模型組、rh-EPO治療組和假手術組。改良Rice法制備HIBD模型，HIBD組(n=30)在模型制備后即刻腹腔注射生理鹽水0.5ml/只；rh-EPO治療組(n=30)在模型制備后即刻腹腔注射rh-EPO4000U/kg/只，rh-EPO稀釋到0.5ml；假手術組(n=30)僅游離左側頸總動脈而不結扎，不低氧；依據(jù)行為學觀察指標對各組進行行為學觀察；假手術組、HIBD模型組與rh-EPO治療組分別于6h、12h，24h，48h，72h每個時間點取6只大鼠，斷頭取血，取左側腦組織，蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining，HE)染色，顯微鏡下觀察腦組織病理變化。ELISA法檢測血中IL-1β含量，最后采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理。 結果：⑴新生SD大鼠在HIBD后出現(xiàn)不同程度的行為異常。⑵HE染色①假手術組各時間點腦大小和形態(tài)基本正常，組織結構清晰，神經(jīng)元排列整齊緊密。②HIBD組：缺血缺氧后6h：大腦皮質神經(jīng)元層次清晰，細胞間隙增大，神經(jīng)元細胞固縮變形。缺血缺氧后12h：大腦皮質神經(jīng)元層次較清晰，細胞間隙明顯增大，神經(jīng)元細胞空泡變性，核深染。缺血缺氧后24h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙進一步增大，可見神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞減少，皮層內(nèi)毛細血管擴張，管腔內(nèi)有較多紅細胞聚集。缺血缺氧后48h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，深染，正常神經(jīng)元細胞顯著減少，毛細血管顯著擴張，血管周圍腔隙擴大，有紅細胞泄露到腔隙中。缺血缺氧后72h：大腦皮質神經(jīng)元層次不清，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，深染，正常神經(jīng)元細胞進一步減少，毛細血管顯著擴張，血管周圍腔隙進一步擴大，可見大片壞死灶。③rh-EPO治療組：rh-EPO治療后6h：大腦皮質神經(jīng)元層次清晰，細胞間隙增大，神經(jīng)元細胞變形，損傷程度較相應HIBD組輕。rh-EPO治療后12h：大腦皮質神經(jīng)元層次比較清晰，細胞間隙明顯增大，神經(jīng)元細胞變性，損傷程度較相應HIBD組輕。rh-EPO治療后24h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙進一步增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞減少，損傷程度較相應HIBD組輕。rh-EPO治療后48h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞顯著減少，損傷程度較相應HIBD組輕。rh-EPO治療后72h：大腦皮質神經(jīng)元層次不清，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，深染，正常神經(jīng)元細胞進一步減少，可見壞死灶，損傷程度較相應HIBD組輕。⑶IL-1β檢測結果：HIBD模型組、rh-EPO治療組與假手術組比較，在各時間點SD大鼠外周血中IL-1β數(shù)值明顯升高(P 0.01，統(tǒng)計學有顯著性差異)，且表現(xiàn)出各自的變化規(guī)律，假手術組、rh-EPO治療組與HIBD組血清中IL-1βOD值在6h分別為：0.40±0.059；0.45±0.072；0.50±0.044；12h分別為：0.38±0.037；0.58±0.031；0.70±0.032；24h分別為：0.40±0.031；0.49±0.042；0.52±0.029；48h分別為：0.40±0.030；0.48±0.034；0.51±0.034；72h分別為：0.39±0.030；0.46±0.028；0.48±0.024；HIBD大鼠IL-1β在6h和12h外周血中IL-1β含量均有顯著增高，且呈上升趨勢，24h達到高峰，但72h仍然較高；rh-EPO治療組和HIBD模型組比較，血清IL-1β含量的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)，各時間點血清IL-1β含量相應下降。 結論：⑴rh-EPO對HIBD新生大鼠進行干預能明顯減輕腦組織的病理改變，提示rh-EPO對新生大鼠HIBD具有神經(jīng)保護作用。⑵rh-EPO治療后明顯減輕新生大鼠HIBD后外周血中炎性因子IL-1β的釋放，這可能是rh-EPO發(fā)揮神經(jīng)保護作用的機制之一。
【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R722.1
【圖文】：

損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 7 rh-EPO 組 6h 病理切片）。rh-EPO 治療后 12h：大腦皮質神經(jīng)元層次比較清晰，細胞間隙明顯增大，神經(jīng)元細胞變性，損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 8 rh-EPO 組 12h 病理切片）。rh-EPO 治療后 24h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙進一步增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞減少，損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 9 rh-EPO 組 24h 病理切片）。rh-EPO 治療后 48h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞顯著減少，損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 10 rh-EPO 組 48h 病理切片）。rh-EPO 治療后 72h: 大腦皮質神經(jīng)元層次不清，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形,固縮,深染,正常神經(jīng)元細胞進一步減少，可見大片壞死灶，損傷程度較相應HIBD 組輕（見圖 11 rh-EPO 組 72h 病理切片）。

損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 7 rh-EPO 組 6h 病理切片）。rh-EPO 治療后 12h：大腦皮質神經(jīng)元層次比較清晰，細胞間隙明顯增大，神經(jīng)元細胞變性，損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 8 rh-EPO 組 12h 病理切片）。rh-EPO 治療后 24h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙進一步增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞減少，損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 9 rh-EPO 組 24h 病理切片）。rh-EPO 治療后 48h：大腦皮質神經(jīng)元排列紊亂，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形，固縮，核深染，正常神經(jīng)元細胞顯著減少，損傷程度較相應 HIBD 組輕（見圖 10 rh-EPO 組 48h 病理切片）。rh-EPO 治療后 72h: 大腦皮質神經(jīng)元層次不清，細胞間隙顯著增大，神經(jīng)元細胞變形,固縮,深染,正常神經(jīng)元細胞進一步減少，可見大片壞死灶，損傷程度較相應HIBD 組輕（見圖 11 rh-EPO 組 72h 病理切片）。

圖 3 HIBD 組 12h 病理切片（HE 400 倍） 圖 4 HIBD 組 24h 病理切片（HE 400 倍）圖 5 HIBD 組 48h 病理切片（HE 400 倍） 圖 6 HIBD 組 72h 病理切片（HE 400 倍）

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 康文清;朱長連;熊虹;程秀永;王小陽;;重組人促紅細胞生成素治療新生兒缺氧缺血性腦病的療效[J];實用兒科臨床雜志;2006年02期

2 謝紅浪;重組人促紅細胞生成素:老藥新用途[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2003年01期

本文編號：2770612