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雙歧桿菌對新生大鼠壞死性小腸結腸炎模型腸損傷保護作用及腸組織PAF、TNF-α影響

發(fā)布時間:2020-07-19 23:39
【摘要】:目的 采用新生SD大鼠NEC模型,以添加雙歧桿菌為陽性對照,客觀評價添加雙歧桿菌對新生鼠壞死性小腸結腸炎(NEC)模型腸損傷的保護作用,同時,通過對腸黏膜組織勻漿中PAF、TNF-α含量檢測,探討補充雙歧桿菌的保護作用是否與降低腸組織PAF和TNF-α濃度有關,為應用雙歧桿菌防治新生兒壞死性小腸結腸炎提供科學依據(jù)。 方法 Sprague-Dewley新生鼠出生后48小時給予鼠配方奶人工喂養(yǎng),100%氮氣缺氧90秒,4℃冷刺激10分鐘,每天2次連續(xù)3天建立新生鼠NEC模型。32只新生鼠按析因設計隨機分成4組,每組動物各8只。A組為NEC模型組并添加雙歧桿菌(0.4×10~8CFU/天),B組為NEC模型組,但未添加雙歧桿菌;C組為對照組,且未添加雙歧桿菌;D組為對照組并添加同樣劑量雙歧桿菌。在最后一次缺氧、冷刺激后24小時空腹斷頭處死小鼠,解剖留取十二指腸下端至直腸上端腸道組織,其中,回盲部近端腸管進行病理學檢查及腸損傷評分,剩余所有腸管用于檢測腸組織PAF、TNF-α含量。根據(jù)固有層分離、中性粒細胞浸潤,絨毛脫落、壞死,血管擴張,間質水腫,將腸損傷分為0~4級;組織學評分≥2確定為NEC。腸組織中PAF、TNF-α含量采用ELISA雙抗體夾心法檢測,試劑盒購自上海朗卡公司;組織PAF、TNF-α含量以每毫克腸組織蛋白中PAF/TNF-α含量表示(pg/mg pro)。應用Kruskal-Wallis H檢驗、析因方差分析、Fisher確切概率法進行統(tǒng)計學分析,α=0.05為顯著性檢驗標準,采用SPSS11.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。 結果 [1]在剔除鼠乳喂養(yǎng)前提下,經(jīng)過連續(xù)多次的缺氧冷刺激后(B組)相繼出現(xiàn)腹瀉、腹脹、生長發(fā)育減慢、活動度減少等,腸管可見腸管出血、腸腔積氣及腸管壞死,顯微鏡下見腸粘膜壞死,粘膜下層出血以及肌肉層壞死等腸損傷表現(xiàn);但添加雙歧桿菌的模型組(A組)新生鼠腹瀉、腹脹、胃潴留程度明顯較B組的模型組輕,生長發(fā)育及活動度也得到改善,腸出血、腸腔積氣及腸管壞死少見,HE染色顯微鏡下腸損傷減輕。[2]A、B、C和D4組腸損傷組織病理評分((?)+S)分別為1.63±1.302、3.25±0.886、0.25±0.463和0.50±0.535;各組之間腸損傷組織病理評分差別有顯著意義,H=20.731,P<0.01;與B組相比,A組腸損傷組織評分明顯降低,但仍高于C、D兩個對照組,差異均有顯著意義;析因設計的方差分析顯示腸組織損傷分級評分受到造模和雙歧桿菌干預兩個因素的影響,造模與雙歧桿菌干預之間存在交互作用,在控制造模因素后,添
【學位授予單位】:福建醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R722.1

【共引文獻】

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本文編號:2763128

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