發(fā)布時(shí)間：2020-07-17 13:41

【摘要】： 在兒科,以往的研究已證實(shí)人類呼吸道合胞病毒(hRSV)、流感病毒、副流感病毒及腺病毒是下呼吸道感染的主要病原,仍有約1/3的病原不明。2001年荷蘭學(xué)者Hoogen等報(bào)告他們發(fā)現(xiàn)了一類與人類,特別是嬰幼兒呼吸道感染有關(guān)的新的病毒—人類偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)。目前hMPV感染在世界各地相繼有報(bào)道,提示該病毒是世界范圍內(nèi)普遍存在的人類致病原。因此,有必要在各地區(qū)對其臨床流行特征作調(diào)查。呼吸道病毒感染的診斷有四種主要方法,包括病毒的分離培養(yǎng)、抗原檢測、RNA或DNA檢測、血清學(xué)檢測。在過去的研究中,病毒的分離培養(yǎng)、RT-PCR、血清學(xué)檢測已用于hMPV感染的診斷。病毒分離培養(yǎng)雖然特異性高,但是hMPV尚未發(fā)現(xiàn)最適生長的細(xì)胞。血清學(xué)檢測能區(qū)別hMPV原發(fā)感染與再次感染,但是不能早期診斷hMPV感染。因此,RT-PCR被認(rèn)為是目前最敏感及特異的診斷方法,但是需在特殊實(shí)驗(yàn)室才能完成,且需6小時(shí)以上才能獲得結(jié)果。免疫熒光法與酶聯(lián)免疫特異性測定(ELISA),這兩種快速檢測抗原的方法是可行的。已有報(bào)道小鼠抗hMPV多克隆抗體的ELISA方法檢測培養(yǎng)的hMPV感染細(xì)胞的hMPV抗原,然而,對臨床標(biāo)本的hMPV抗原檢測尚乏研究。呼吸道上皮細(xì)胞的免疫熒光法檢測已證實(shí)對其它的呼吸道病毒(如呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、副流感病毒)是一種非常有效的方法。關(guān)于間接免疫熒光抗體法(IFA)檢測鼻咽分泌物中hMPV抗原國內(nèi)未見報(bào)道。而且,IFA適用于hMPV感染早期診斷,簡便快速,易在臨床上廣泛應(yīng)用。因此,我們用IFA法診斷hMPV感染并調(diào)查西安地區(qū)hMPV的臨床流行特征。 方法 收集2006年11月至2007年2月我院兒科中心的112例急性呼吸道感染住院患兒的鼻咽分泌物標(biāo)本,患兒入院后48h內(nèi)用無菌拭子采集鼻咽分泌物,立即置于冰上,迅速轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。用直接免疫熒光抗體法(DFA)檢測常見的7種呼吸道病毒(包括呼吸道合胞病毒,甲、乙型流感病毒,I、II、III型副流感病毒和腺病毒),對其中65例常見7種呼吸道病毒特異性抗原陰性患兒鼻咽分泌物用IFA法檢測hMPV抗原。所有患兒的臨床資料包括性別、年齡、臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查在出院后作病案回顧性分析。 結(jié)果 1.在×400放大的熒光顯微鏡下1滴細(xì)胞涂片中至少有100多個(gè)上皮細(xì)胞,陽性結(jié)果為至少1個(gè)細(xì)胞有特異性染色(明亮的黃綠色熒光)。 2. hMPV檢測陽性率 65份標(biāo)本中用IFA方法檢測hMPV陽性數(shù)8例,陽性率為12.31%。其中2006年11月份陽性檢出率為14.29%(3/21),12月份為11.76%(2/17),2007年1月份為15.79%(3/19),2月份未檢出(0/8)。 3.年齡組感染率 8例感染患兒中男5例,女3例,年齡范圍6個(gè)月~5歲9個(gè)月。兒童中≤5歲年齡組40例,陽性6例,感染率為15%;6～14歲年齡組25例,陽性2例,感染率8%,兩年齡組hMPV感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2 = 0.7,P 0.05)。 4.臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查 8例陽性患者中75%的表現(xiàn)有發(fā)熱(≥38.0℃),87.5%有咳嗽,37.5%氣喘。其中≤5歲年齡組6例中有6例咳嗽、4例發(fā)熱、3例氣喘; 6～14歲年齡組2例中有2例咳嗽、2例高熱、1例咽痛、1例驚厥。2例肺炎患兒X線胸片顯示雙肺野斑點(diǎn)或斑片狀滲出陰影,肺部聽診可聞及濕Up音。4例患兒CK-MB異常。所有患兒均好轉(zhuǎn)或治愈出院。 5.臨床診斷 臨床診斷肺炎者為2例,喘息性支氣管炎為1例,支氣管炎為4例,上感為1例�！�5歲年齡組6例中有2例肺炎、3例支氣管炎、1例喘息性支氣管炎;6～14歲年齡組2例中有1例支氣管炎、1例上呼吸道感染。 結(jié)論 1.我們的研究表明用抗hMPV的小鼠單克隆抗體進(jìn)行IFA能檢測到鼻咽分泌物中的hMPV抗原。IFA適用于hMPV感染早期診斷,簡便快速,4h出結(jié)果,易在臨床上廣泛應(yīng)用。在本研究中,我們證實(shí)IFA對hMPV感染診斷是一種快速且有效的方法。 2.本研究結(jié)果顯示hMPV在常見7種呼吸道病毒檢測陰性的呼吸道標(biāo)本中陽性率為12.31%,提示本研究中hMPV與患者的急性呼吸道感染有關(guān),這說明西安地區(qū)兒童也存在hMPV感染,hMPV同樣是國內(nèi)呼吸道感染兒童重要的病原體。 3.感染率的差異可能與研究時(shí)期、研究人群及地域不同有關(guān)。而且,目前的研究可能低估了該病毒的感染率,因?yàn)檠芯渴窃诔Ｒ?種呼吸道病毒陰性的標(biāo)本中再檢測hMPV。 4.我們的研究表明hMPV可引起6月-6歲年齡段兒童的感染,其中5歲及以下患兒占75%。易感人群年齡分布的差異可能還與納入研究對象選擇不同有關(guān)。 5.本研究對hMPV的檢出高峰主要在11月及次年1月,其流行病學(xué)特征還需進(jìn)一步監(jiān)測。 6. hMPV感染的臨床表現(xiàn)有輕有重,可引起上或下呼吸道感染,最常見的癥狀為咳嗽、發(fā)熱、喘息。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R725.6
【圖文】：

hMPV感染的人鼻咽部上皮細(xì)胞IFA染色

hMPV感染的人鼻咽部上皮細(xì)胞IFA染色

hMPV感染的人鼻咽部上皮細(xì)胞IFA染色

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 朱汝南,錢淵,鄧潔,王芳,胡愛中,盧競,曹力,袁藝,陳慧中;北京地區(qū)六歲以下兒童急性呼吸道偏肺病毒感染[J];中華兒科雜志;2003年06期

2 陳勇;新發(fā)現(xiàn)的呼吸道病毒:人偏肺病毒[J];中華流行病學(xué)雜志;2005年10期

本文編號(hào)：2759513