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Cajal間質(zhì)細(xì)胞與先天性巨結(jié)腸的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2020-07-15 02:45
【摘要】: 背景:先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung's disease,HD)腸動(dòng)力障礙的本質(zhì)尚未完全闡明。很多研究表明HD的癥狀與狹窄段的長度無關(guān),而與狹窄段及移行段的總長相關(guān)。從而單純以腸壁神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的缺乏不能很好的解釋HD的發(fā)病機(jī)制。近年來大量研究表明,Cajal間質(zhì)細(xì)胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)是胃腸道的起搏細(xì)胞,它產(chǎn)生慢波,控制胃腸道平滑肌的收縮和蠕動(dòng);促進(jìn)電活動(dòng)擴(kuò)布至附近平滑肌細(xì)胞,推進(jìn)電活動(dòng)的傳播;介導(dǎo)胃腸道神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞。此外,ICCs還與某些胃腸激素的運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)功能有關(guān)。超微結(jié)構(gòu)研究證實(shí),ICCs與胃腸平滑肌細(xì)胞間存在縫隙連接,在胃腸運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)和胃腸動(dòng)力疾病中具有非常重要的作用。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)等方法對(duì)HD忠兒及正常兒童結(jié)、直腸壁內(nèi)ICCs進(jìn)行標(biāo)記,了解ICCs在HD狹窄段、移行段、擴(kuò)張段及正常結(jié)、直腸腸壁各層的數(shù)量分布情況,以探討ICCs與HD發(fā)病機(jī)制之間的關(guān)系。 對(duì)象:收集2006年7月至2008年1月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院普外科收治確診為先天性巨結(jié)腸并接受根治手術(shù)的33例患兒為觀察組。均為散發(fā)病例,年齡1月至4歲,男23例,女10例,其中長段型5例,常見型21例,短段型7例。觀察組術(shù)前均經(jīng)詢問病史、體檢、鋇灌腸、下消化道動(dòng)力檢測,直腸粘膜活檢明確診斷;并由術(shù)后病理診斷再次證實(shí)為HD。因外傷、結(jié)腸息肉行結(jié)直腸切除患兒共9例作為對(duì)照組。 方法:分別取觀察組HD患兒手術(shù)切除的腸管狹窄段、移行段大體外觀的中點(diǎn)和近端擴(kuò)張段系膜側(cè)全層腸壁組織蠟塊各1塊及對(duì)照組腸管標(biāo)本系膜側(cè)全層腸壁組織蠟塊應(yīng)用免疫組織化學(xué)EnVision二步法對(duì)ICCs進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)Oneway Anova檢驗(yàn)兩兩比較。 1.HE染色結(jié)果,正常結(jié)、直腸和HD擴(kuò)張段腸壁粘膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞清晰可見,神經(jīng)纖維未見增粗;移行段腸壁粘膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢內(nèi)可見成熟神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和/或幼稚神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,神經(jīng)纖維增粗;狹窄段腸壁粘膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢內(nèi)未見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,神經(jīng)纖維明顯增粗,排列紊亂。 2.在正常結(jié)、直腸標(biāo)本和HD擴(kuò)張段,ICCs大量分布在肌間神經(jīng)叢周圍和粘膜下層,彼此靠突起相互連接形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)。在環(huán)肌層ICCs亦中等量甚至大量分布,位于肌間隔內(nèi),與平滑肌細(xì)胞緊貼,并與其平行走行?v肌層內(nèi)也可見中少量ICCs。HD擴(kuò)張段腸壁各層內(nèi)ICCs的數(shù)目與正常對(duì)照組無顯著性差異(P>0.05)。 3.在HD移行段,腸壁各層ICCs均有減少,但減少的程度不一致,ICCs多分布于肌間神經(jīng)叢周圍,但細(xì)胞密度與正常結(jié)、直和HD擴(kuò)張段相比有所減低,局部ICCs彼此間距離較遠(yuǎn),連接不明顯或松散,正常所見的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)遭到部分破壞;粘膜下層、環(huán)肌層和縱肌層內(nèi)ICCs也明顯減少;HD移行段腸壁各層內(nèi)ICCs的數(shù)目與正常對(duì)照組相比,有顯著性差異(P<0.05)。 4.在HD狹窄段,腸壁各層ICCs明顯減少甚至消失。肌問神經(jīng)叢周圍、粘膜下層及環(huán)肌層內(nèi)ICCs計(jì)數(shù)分析發(fā)現(xiàn),這三層內(nèi)ICCs數(shù)目明顯減少甚至消失,正常ICCs網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)消失,HD狹窄段腸壁縱肌層ICCs幾乎完全消失,HD狹窄段腸壁各層內(nèi)ICCs的數(shù)目與正常對(duì)照組相比,有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論 1.ICCs減少甚至消失是HD的重要病理改變。 2.HD的癥狀與狹窄段及移行段的總長相關(guān),可能與HD狹窄段,移行段ICCs明顯減少甚至消失,并且ICCs間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)破壞有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號(hào)】:R726.5
【圖文】:

直腸,數(shù)量比,擴(kuò)張段,兩兩比較


周圍89.11士7.1887.58士5.4642.06士5,542045士3.6865,33士4.276379士6.3732.88士33012.30士3.757733士4,4774.79士4.1435.36士3.7215.39士3.18注:n為樣本數(shù)。正常結(jié)、直腸和HD擴(kuò)張段各層ICCs數(shù)量,同層次之間兩組比較無明顯差異P>0.05;而正常結(jié)、直腸和HD移行段、狹窄段各層ICCs數(shù)量,同層次之間兩兩比較均有顯著性差異P<0.05。

免疫組化,直腸粘膜,肥大細(xì)胞,直腸


正常結(jié)、直腸粘膜下層肥大細(xì)胞,免疫組化EnVision法x100

免疫組化,縱肌,粘膜下層


狹窄段環(huán)肌層、縱肌層ICCs的分布,免疫組化E汀叭sionxl00

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