發(fā)布時(shí)間：2020-07-14 06:29

【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?對(duì)2010-2011南京地區(qū)急性呼吸道感染患兒的鼻咽抽吸物及咽拭子進(jìn)行13種常見呼吸道感染相關(guān)病毒的檢測(cè),了解該地區(qū)兒童急性呼吸道感染相關(guān)病毒的分子流行病學(xué)特點(diǎn)；對(duì)湖南22例以高熱、喘憋為主要癥狀,抗生素治療無(wú)效的重癥肺炎患兒進(jìn)行病毒病原學(xué)檢測(cè),探討其潛在的病因。 研究對(duì)象及方法： 1.收集2010年8月至2011年7月在南京兒童醫(yī)院因急性呼吸道感染就診的住院患兒鼻咽抽吸物(NPA)381份及門診患兒咽拭子(NPS)263份,共644份。門診患兒于就診當(dāng)天,住院患兒在住院當(dāng)日或次日采集標(biāo)本。 2.采集的NPA及NPS保存在病毒運(yùn)輸液中(含200U/ml青霉素,200U/ml鏈霉素,200U/ml兩性霉素B及0.125%BSA),低溫運(yùn)送至中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所并凍存于-80℃低溫冰箱。 3.采用巢氏聚合酶鏈反應(yīng)(nested-PCR)對(duì)腺病毒(ADV)、博卡病毒(HBoV)及副流感病毒1、2和4(PIV1、2、4)進(jìn)行篩查,采用普通逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)對(duì)其余呼吸道病毒進(jìn)行檢測(cè),其中包括呼吸道合胞病毒(RSV),鼻病毒(HRV),流感病毒A、B(IFVA-B),副流感病毒3(PIV3),人偏肺病毒(HMPV),冠狀病毒HKU1及NL63(HCoV-HKU1、HCoV-NL63)。 4.對(duì)22份湖南特殊標(biāo)本分別進(jìn)行ADV, HBoV, RSV, HMPV, HRV, PIV1,PIV3,IFVA, IFVB,NL63和HKU1的分子檢測(cè),對(duì)其中2例ADV7陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行全基因組序列測(cè)定。 結(jié)果： 1.通過(guò)巢氏PCR對(duì)644份標(biāo)本分別進(jìn)行PIV1、PIV2、PIV4的篩查,分別檢出PIV142份(42/644,6.52%),PIV29份(9/644,1.40%),PIV438份(38/644,5.90%)；PIV1和PIV2檢出率明顯高于同實(shí)驗(yàn)室南京地區(qū)一年及蘭州地區(qū)四年檢出率(均為0)。 2.采用巢氏PCR對(duì)ADV進(jìn)行篩查及hexon分型,644例標(biāo)本中共檢出ADV陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物171份,檢出率為26.55%。分型結(jié)果顯示：3型120例(70.18%,120/171),7型16例(9.36%,16/171),1型12例(7.02%,12/171),2型10例(5.85%,10/171),5型6例(3.51%,6/171),6型3例(1.75%,3/171),57型3例(1.75%,3/171),41型1例(0.58%,1/171)。ADV呈全年散發(fā),其發(fā)病高峰主要在4-7月。以7歲以內(nèi)兒童多見(96.49%)。171例ADV感染患兒中有99例(57.89%)存在混合感染,其中以RSV、HRV多見。 3.本研究中病毒總檢出率為75.62%(487/644)。RSV檢出率最高,為27.17%(175/644),其次分別為ADV26.55%(171/644),HRV15.68%(101/644),PIV313.51%(87/644),HBoV6.68%(43/644),PIV16.52%(42/644),PIV45.90%(38/644),HMPV4.97%(32/644),IFVB2.95%(19/644),NL631.86%(12/644),PIV2及HKU1均為1.40%(9/644),IFVA1.24%(8/644)。487例呼吸道病毒陽(yáng)性患兒中,男童352例,女童135例,男女病毒檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.595,P=0.058)。487例陽(yáng)性患兒中,年齡最小為0.004月,最大為151月,中位年齡為9月,平均年齡為18.3月。3歲以下患兒病毒檢出率(78.24%)高于3歲以上患兒(64.17%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.496,P=0.001)。 4.湖南22份特殊呼吸道標(biāo)本中,19份檢出ADV,其中3型1份,1型1份,余17份均為7型。其他病毒檢出結(jié)果：RSV7份,PIV33份,HRV2份,HBoV4份,HKU11份,PIV12份,HMPV、IFVA、IFVB及NL63均未檢出。對(duì)編號(hào)為h5和h6的2份只有ADV7型感染的標(biāo)本進(jìn)行全基因組序列測(cè)定,結(jié)果與Genbank中已知ADV7型全基因組序列比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化分析,與7型同源性為99%,親緣性最近。 結(jié)論： 1.2010-2011年南京地區(qū)急性呼吸道感染患兒標(biāo)本病毒檢出率為75.62%,提示病毒病原是該地區(qū)呼吸道感染的主要致病病原,其中RSV, ADV和HRV是該年度兒童呼吸道感染中居前三位被檢出的病毒病原。 2.ADV的檢出在本年度居第二位,其感染全年均有發(fā)生,本年度的優(yōu)勢(shì)流行株為3型,且檢測(cè)到3株最近新發(fā)現(xiàn)的型別57型,提示我們要繼續(xù)加強(qiáng)對(duì)該病毒的流行監(jiān)測(cè)。 3.與以往同實(shí)驗(yàn)室南京和蘭州的研究結(jié)果相比,本研究首次運(yùn)用巢氏PCR檢出了PIV1,PIV2和PIV4,檢出率分別為6.52%,1.40%和5.90%,表明PIV亦是兒童呼吸道感染中的重要病毒病原。 4.腺病毒7型是導(dǎo)致湖南以高熱、喘憋為主,經(jīng)抗生素治療無(wú)效的重癥肺炎患兒的致病病原,全基因組序列的測(cè)定和分析表明其與JN860677、AY601634兩株7型毒株的親緣性最近。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R725.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2754626