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豐富環(huán)境刺激及水療對新生鼠缺氧缺血性腦損傷的干預效應

發(fā)布時間:2020-07-05 11:48
【摘要】: 目的缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是圍產期窒息的一個重要并發(fā)癥,也是新生兒期的常見病,嚴重威脅新生兒的生命和健康,并可導致兒童永久傷殘,至今缺乏理想有效的治療手段。對眾多動物模型的研究已證實:環(huán)境刺激及身體自愿物理運動可以誘導大腦結構及功能的改變。本試驗將豐富環(huán)境刺激及水療運用于7日齡(postnatal day 7,P7)HIBD新生大鼠,予以不同方法對新生大鼠HIBD進行干預,檢測大鼠的體重,學習記憶能力,患側海馬的病理形態(tài)學改變和透射電鏡下超微結構變化,以及大鼠海馬N-甲基-D-天門冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受體蛋白的表達,探討豐富環(huán)境刺激和水療對發(fā)育期腦損傷的作用效果及其可能的機制,旨在為臨床治療新生兒缺氧缺血性腦病,促進患兒腦功能的恢復提供理論依據(jù)和指導。 方法采用Rice法建立P7大鼠HIBD模型,分為干預組與非干預組,另設假手術對照組。干預組又分為豐富環(huán)境組、水療組、豐富環(huán)境+水療組,在缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)第2天分別予相應干預治療,持續(xù)28 d。于生后不同時點(15d,22d,29d,36d)檢測大鼠體重,以免疫組織化學法檢測海馬CA1區(qū)NMDA受體NR1亞單位的表達,HE染色觀察生后36d時相點大鼠患側海馬病理形態(tài)學改變,干預結束后(生后37d)利用Morris水迷宮測定各組大鼠學習記憶能力,并于生后40d利用透射電鏡觀察海馬超微結構。 結果: 1.體重上,HI后8d(生后15d),假手術組顯著高于干預組與非干預組(p<0.01),干預組與非干預組無顯著差異(p>0.05);HI后15d,22d及29d(生后22d,29d及36d),干預組和假手術組顯著高于非干預組(p<0.01),干預組與假手術組無顯著差異(p>0.05)。 2.新生大鼠HI后8d,各組HIBD大鼠均出現(xiàn)不同程度的左側腦組織萎縮,伴有發(fā)白梗死區(qū)、軟化灶等組織病理改變,其中非干預組最明顯。HI后29d(生后36d),HE染色見假手術組雙側海馬結構清晰,布局有序,神經元形態(tài)正常,排列整齊。干預組左側海馬輕度異常,神經元排列稍紊亂,可見少量細胞丟失。非干預組左側海馬明顯異常,細胞層數(shù)減少,大量細胞丟失,神經元排列稀疏、散亂,細胞間隙增大,核仁不清,可見核固縮、核碎裂。 3.透射電鏡下,HI后33d(生后40d),假手術組大鼠海馬神經元形態(tài)正常,染色質密度中等,突觸發(fā)育成熟,突觸小泡豐富,突觸后膜致密物(postsynaptic density,PSD)多,結構致密。干預組左側大鼠海馬神經元無明顯病理改變,突觸小泡和PSD略有減少,其中又以豐富環(huán)境組及豐富環(huán)境+水療組稍好。非干預組大鼠見左側海馬神經元固縮改變,核膜皺折,染色質致密,突觸小泡和PSD明顯減少。 4.HI后29d(生后36d),干預組、假手術組海馬CA1區(qū)NR1表達明顯強于非干預組,其中豐富環(huán)境組、豐富環(huán)境+水療組與假手術組無顯著差異(p>0.05),水療組仍明顯弱于假手術組。 5.Morris水迷宮實驗中,干預組、假手術組大鼠測試成績明顯優(yōu)于非干預組(p<0.01),其中豐富環(huán)境組、豐富環(huán)境+水療組與假手術組無顯著差異(p>0.05),而單純水療組明顯低于假手術組(p<0.01)。 結論: 1.7日齡大鼠采用Rice法制成HIBD模型,非干預組大鼠體重在HI后增長緩慢;無論是HE染色還是電鏡觀察結果,非干預組大鼠患側腦組織均可見明顯的病理形態(tài)學改變;其遠期學習記憶能力降低,均證實本實驗HIBD動物模型建立成功可行。 2.與非干預組HIBD大鼠相比,干預組HIBD大鼠體重經過一短暫緩慢增長期后進入快速增長期,體重增長明顯,并且海馬病理損害減輕,其遠期學習記憶能力增強,提示豐富環(huán)境刺激及水療有利于體格發(fā)育及腦損傷修復。 3.新生大鼠HIBD后期存在海馬NMDA受體的表達下調,降低了HIBD新生大鼠海馬內的突觸傳遞效能,而豐富環(huán)境刺激和水療能有效改善HIBD新生大鼠發(fā)育過程中海馬內的突觸傳遞,增強突觸可塑性。NMDA受體在海馬表達的變化可能是豐富環(huán)境刺激和水療促進HIBD新生鼠腦功能恢復的機制之一。 4.豐富環(huán)境、豐富環(huán)境聯(lián)合水療干預HIBD大鼠,其海馬CA1區(qū)NR1蛋白表達量以及大鼠遠期空間學習記憶能力幾乎恢復到正常水平,而單純水療干預HIBD大鼠,其海馬CA1區(qū)NR1蛋白表達量及遠期空間學習記憶能力明顯低于假手術組,提示單純水療不如豐富環(huán)境刺激、豐富環(huán)境刺激聯(lián)合水療的干預效果。
【學位授予單位】:第三軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R722.1

【參考文獻】

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1 姚國恩,王景周,陳曼娥;血管性癡呆大鼠認知障礙的NMDAR機制研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2002年12期



本文編號:2742566

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