【摘要】：目的 本實驗建立新生鼠缺氧缺血腦損傷(HIBD)模型，觀察了HIBD后新生鼠腦組織caspase-3mRNA表達的動態(tài)變化，進一步探討缺氧缺血誘導神經(jīng)元凋亡的機制及意義；1，6-二磷酸果糖(FDP)是否通過影響凋亡調(diào)控基因表達實現(xiàn)抗凋亡作用，尚不明確，本研究觀察了FDP對HIBD后新生鼠腦組織caspase-3基因表達的影響，來探討FDP腦保護作用的分子機制，為其臨床治療HIBD提供更深層次的理論依據(jù)。 方法 1．制備HIBD模型：新生7日齡Wistar大鼠行頸正中切口，分離結(jié)扎左頸總動脈給予低氧(8％氧氣+92％氮氣)處理2小時，制成HIBD模型。觀察動物行為變化，后于相應時點取材光鏡下觀察腦組織病理改變。 2．Caspase-3 mRNA表達測定：將7日齡Wistar大鼠隨機分為假手術(shù)對照組、HIBD6h、24h、3d、5d組，每組5只動物，應用RT-PCR方法測定。 3．FDP神經(jīng)保護機制的研究：將7日齡Wistar大鼠隨機分為HIBD對照組、鹽水組、FDP治療組，于缺氧缺血后立即給藥，其中FDP組又分為大、中、小劑量組，每組5只動物，應用RT-PCR觀察24小時后caspase-3mRNA的表達變化。 結(jié)果 1．動物模型行為表現(xiàn)：實驗前各組新生鼠行為能力正常；HIBD組：進入低氧環(huán)境后5-10min出現(xiàn)躁動不安、翻滾，隨后逐漸出現(xiàn)肌肉顫動、頭顫、翻身不能，甚至抽搐與意識障礙(如嗜睡)，嚴重于低氧過程中死亡，行為障礙一般在HI后很快消失；假手術(shù)組：未見行為異常表現(xiàn)。 天津醫(yī)界延才學碩全研蕪生學少淪丈 2.HE染色及光鏡檢查結(jié)果: 假手術(shù)組:腦組織結(jié)構(gòu)及細胞層次清楚，神經(jīng)元形態(tài)正常，無腦水腫; HIBD6h:出現(xiàn)輕度腦水腫，神經(jīng)元胞體輕度皺縮，胞漿呈均勻粉紅色，胞 核固縮; HIBD24樹72h:腦水腫程度加重，神經(jīng)元排列紊亂，胞體極度皺縮，胞漿深 染，核濃縮，伴膠質(zhì)細胞增生; HIBD5d:腦水腫減輕，膠質(zhì)細胞增生明顯，可見嗜神經(jīng)現(xiàn)象。 3.CasPase一3 mRNA動態(tài)變化:假手術(shù)對照組即有相對高水平caspase一3 mRNA表達，HIBD6h其表達明顯增高(與對照組比較有顯著性差異， P0 .01)，24h達高峰，此后逐漸下降，HIBD5d其表達仍維持較高水平 (與對照組比較具有顯著性差異，P0.01)。 4.FDP的神經(jīng)保護機制研究:鹽水組和HIBD組caspase一3基因表達無顯著 性差異(P0.05)，F(xiàn)DP小劑量組與鹽水組和HIBD對照組相比easpase一3 基因表達亦無顯著性差異(P0.05)，F(xiàn)DP大、中劑量組其表達均有不同程 度的下調(diào)，同以上三組比較均有顯著性差異(P0.05)，F(xiàn)DP大、中劑量組 相比無顯著性差異(P.05)。 結(jié)論 1，通過對HIBD后動物行為能力觀察及其腦組織病理學檢查，證實新生鼠 HIBD模型制作成功。 2.缺氧缺血可誘導新生鼠腦組織caspase一3 mRNA表達，其過度表達在 HIBD后神經(jīng)元凋亡的調(diào)控中起一定的作用，針對caspase一3的治療對策為圍 產(chǎn)期缺氧缺血性腦損傷打開了新視窗。 3.FDP的神經(jīng)保護機制可能與下調(diào)腦組織caspase一3基因表達有關(guān)，從而起 到抗凋亡作用。為FDP對HIBD的臨床治療提供了更深層次的理論依據(jù)。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R722.121

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1 李梅笑;李卓;鄒立華;吳軍;;Caspase-3在骨髓間充質(zhì)干細胞回輸腦缺血再灌注模型大鼠腦組織中的表達[J];中國老年學雜志;2011年16期

2 呂冬霞;杜偉;范曉艷;張曉波;;灰樹花多糖聯(lián)合順鉑對H22荷瘤小鼠腫瘤細胞凋亡的影響[J];黑龍江醫(yī)藥科學;2011年03期

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本文編號：2740704