【摘要】：目的:觀察轉(zhuǎn)錄因子叉頭框C2(FOXC2)在單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)大鼠模型中的表達(dá)情況,探討腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化(EMT)的機(jī)制。方法:雄性Wistar大鼠48只,體重約120-150g,隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham組,n=24,行左側(cè)輸尿管分離術(shù))、模型組(UUO,n=24,行左側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)),各組大鼠分別在術(shù)后3d、7d、14d、21d各取6只,留取左腎組織標(biāo)本。用HE和Masson染色觀察腎臟的病理變化,用免疫組化法及Western blot法檢測纖維化指標(biāo)E-cadherin蛋白和α-SMA蛋白的表達(dá)情況,采用Western blot、免疫組化法及Real-time PCR法檢測FOXC2的蛋白及mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1、與sham組相比,UUO組21d腎臟大體標(biāo)本所示腎臟體積明顯增大,外觀蒼白,表面有缺血壞死,有明顯的腎盂積水,腎皮質(zhì)變薄,皮髓界限不清。2、HE結(jié)果顯示,sham組各組大鼠腎臟腎小球及腎小管結(jié)構(gòu)形態(tài)無異常變化,也無炎性細(xì)胞浸潤,而UUO組大鼠隨著輸尿管梗阻時間延長,腎小管上皮細(xì)胞逐漸出現(xiàn)排列紊亂、腫脹、空泡變型、萎縮、管腔擴(kuò)張,間質(zhì)內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤。3、Masson染色下可見隨著輸尿管梗阻時間進(jìn)展,間質(zhì)增寬,膠原纖維明顯增多,纖維化程度逐漸加重。4、免疫組化和蛋白印跡顯示隨著梗阻時間延長,E-cadherin蛋白表達(dá)減少,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),α-SMA蛋白表達(dá)增加,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),表明腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生EMT,隨著梗阻時間延長,纖維化程度加重。5、Real-timePCR檢測FOXC2mRNA表達(dá),sham組差異無統(tǒng)計學(xué)意義,(P0.05),UUO組各組與sham組比較,明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在第7天出現(xiàn)最高峰,隨后下降至21天。6、免疫組化和蛋白印跡均顯示UUO組大鼠FOXC2蛋白表達(dá)均高于假手術(shù)組(P0.05),在第7天出現(xiàn)最高峰,隨后下降至21天,sham組各組無明顯變化。結(jié)論:1、隨著輸尿管梗阻時間延長,UUO組大鼠腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生EMT,并且纖維化程度逐漸加重。2在大鼠UUO模型中,FOXC2可能促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞EMT,參與腎臟纖維化的進(jìn)展。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R726.9
【圖文】：

UUO組大鼠腎臟大體結(jié)構(gòu)改變：腎臟體積增臟病理改變鼠腎小球及腎小管結(jié)構(gòu)正常；與sham間延長，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤范圍逐腫、增寬等大量腎間質(zhì)纖維化的現(xiàn)象管型（圖2）。

管上皮細(xì)胞腫脹，隨著時間延長，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤范圍逐漸增大，直至出現(xiàn)腎小管上皮細(xì)胞萎縮，腎間質(zhì)水腫、增寬等大量腎間質(zhì)纖維化的現(xiàn)象，腎小管管腔結(jié)構(gòu)消失，21d出現(xiàn)了小管的壞死和管型（圖2）。圖2：HE光鏡觀察Sham組及UUO各組大鼠腎臟病理變化 A：sham組；B：3d UUO組；C：7d UUO

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 田麗娜;鄧偉國;鄒積艷;馬莉;丁言良;宋文齡;付艷;;叉頭框C2在人胚淋巴管發(fā)生過程中的表達(dá)[J];解剖學(xué)報;2008年06期

本文編號：2735292