發(fā)布時(shí)間：2020-06-22 06:27

【摘要】： 目的 探討敏感性和特異性好，快速、準(zhǔn)確、客觀的沙眼衣原體(chlamydia trachomatis,CT)感染的診斷方法；比較組織培養(yǎng)(tissue culture,TC)和缺口-連接酶鏈反應(yīng)(gap-ligase chain reaction,Gap-LCR)診斷CT的敏感性和特異性。 方法 采集我院新生兒科及門診留察室輸液的肺炎患兒鼻咽拭子標(biāo)本接種入生長良好的McCoy細(xì)胞單層中，碘染色檢查結(jié)果。在質(zhì)�；蛱结樀膬啥朔謩e進(jìn)行了地高辛和生物素標(biāo)記，取鼻咽拭子(nasopharyngeal swab,NS)標(biāo)本利用以上引物進(jìn)行連接酶鏈反應(yīng)，產(chǎn)物進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測和聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)分析；按擴(kuò)大金標(biāo)準(zhǔn)，對TC陰性和Gap-LCR陽性結(jié)果分析選用主要外膜蛋白基因omp1引物進(jìn)行多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)反應(yīng)分析；對TC和Gap-LCR都陰性標(biāo)本，選用主要外膜蛋白基因omp1引物及質(zhì)粒引物同時(shí)進(jìn)行PCR分析，計(jì)算TC和Gap-LCR法敏感性、特異性、陽性預(yù)測值(positive predicative value,PPV)、陰性預(yù)測值(negative predicative value,NPV)，比 博士學(xué)位論文 中文摘要 較兩種方法在檢測Cr感染中的差異。 結(jié)果接種cT后，Mccoy細(xì)胞內(nèi)有棕黑色包涵體形成，Gap一LCR 法檢測Cl，標(biāo)準(zhǔn)株結(jié)果為陽性，而對臨床分離株金黃色葡萄球菌、大腸 桿菌、肺炎鏈球菌及未感染的McCoy細(xì)胞提取DNA模板進(jìn)行檢測，均 沒有陽性接果，提示LCR具有極強(qiáng)的特異性; TC檢測標(biāo)本393例，陽性結(jié)果為37例，陽性率為9.4%;TC的敏 感性為乃.5%(37/49)，特異性為100%(344/344)，PPV為100%(37/37)， NPv為%.6%(3中釘356)。質(zhì)粒G叩一LCR一PAGE與Gap一LCR一ELISA檢測 陽性率分別為n.7%仔6/393)和12.2%砰8/393)。質(zhì)粒Gap一LCR衛(wèi)AGE的 敏感性為91.8%(45/49)，特異性為99.7%(343/344)，PPV為97.8% (45/46)，腳v為95.5%(343/3 47)。質(zhì)粒Gap~LCR~ELISA的敏感性 為95.9%(47/49)，特異性為99.7%(343/3 44)，PPV為97.9%(47/48)， NPv為99.4%(343/345)。用配對夢檢驗(yàn)檢測結(jié)果顯示: GaP一LCR一PAGE、GaP一LCR一ELISA與TC比較均為P0.05，差異有顯 著性，Gap一LCR優(yōu)于Te。 結(jié)論LCR法是一種快速而準(zhǔn)確的檢測CT方法，LCR法敏感性 高于TC，LCR法特異性高。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R725.6
【圖文】：

質(zhì)粒Gap一LCR的兩種檢測方法均陽性，后經(jīng)omPI引物PCR證實(shí)為真陽性有10例(圖1一5)，陰性有1例;本實(shí)驗(yàn)中有1例鼻咽拭子培養(yǎng)陰性，Gap一LCR一PAGE陰性，而GaP一LCR一ELISA陽性，后經(jīng)。呷1引物pCR證實(shí)為金標(biāo)準(zhǔn)陽性(表4.1);TC與質(zhì)粒Gap一LcR兩種檢測方法均陰性的344例標(biāo)本，同時(shí)用質(zhì)粒引物(圖l一6)和omPI引物作PCR檢測，1例同時(shí)陽性，符合擴(kuò)大金標(biāo)準(zhǔn)，其余為陰性(表4.2)。即按擴(kuò)大金標(biāo)準(zhǔn)

48345393米P二0.003<0.05圖1一7:GaP.LCR一PAGE，Gap.LCR一EusA和培養(yǎng)法檢測陽性率比較6.Cl，檢測各種結(jié)果的比較(表6一1):分別用配對xZ檢驗(yàn)方法檢測Gap.LCR一PAGE和Tc法及GaP~LCR一usA與TC法的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示:GaP一LCR衛(wèi)AGE、G叩一LCR一EuSA與TC法比較均為P<0.05，差異有顯著性，GaP·LcR優(yōu)于TC法。特異性等其它指標(biāo)幾種檢測方法相比差異不大，所以與Tc法相比在基本不降低特異性的情況下，GaP一LCR法可以大大提高檢測的敏感性。

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