【摘要】：第一部分難治性肺炎支原體肺炎患兒BALF中L-4、INF-γ及LTs水平的變化 目的：檢測難治性肺炎支原體肺炎(RMPP)患兒支氣管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、INF-γ以及LTs水平,探討RMPP患兒局部細(xì)胞因子水平的變化及其與特應(yīng)性體質(zhì)的關(guān)系。 方法： 1.對象及分組：選擇2008年9月-2010年3月在湖南省人民醫(yī)院兒科醫(yī)學(xué)中心住院,起病4周內(nèi)雙份血清MP抗體的滴度有4倍以上升高,并留有BALF的RMPP患兒(42例)為研究對象。根據(jù)是否有濕疹、過敏性鼻炎、蕁麻疹及相關(guān)過敏性疾病家族史等將RMPP患兒分為特應(yīng)性組(11例)和非特應(yīng)性組(31例)。以同期因支氣管異物在本院住院,異物取出4周后纖維支氣管鏡復(fù)查的患兒為對照(12例,雙份血清確診無MP感染,支氣管異物取出后近1個月均無呼吸道癥狀,肺部體檢正常,胸片正常)。 2.對RMPP患兒及對照患兒采用FQ-PCR檢測BALF中MP 16S rRNA基因； 3. BALF行細(xì)胞學(xué)成分分析； 4.采用ELISA方法檢測RMPP患兒及對照患兒BALF中IL-4、INF-γ及CysLT、LTB4水平； 5.同時測定BALF標(biāo)本的蛋白含量含量。 結(jié)果： 1.使用FQ-PCR檢測BALF中MP 16S rRNA基因42例RMPP患兒均陽性；且BALF標(biāo)本采集時間均早于血清MP抗體滴度4倍升高時的時間,即第二份血清采集時間。 2.RMPP患兒與對照兒童BALF細(xì)胞學(xué)成份分析結(jié)果顯示：與對照兒童相比,RMPP患兒BALF中細(xì)胞總數(shù)上升(P0.05),其中以中性粒細(xì)胞上升為主(P0.01)。 3.與對照組兒童比較,RMPP患兒BALF中INF-γ、IL-4均有顯著升高(P0.05),INF-γ/IL-4比值變化無差異(P0.05)。與對照組兒童比較,特應(yīng)性組BALF中INF-γ、IL-4均有顯著升高(P0.05),非特應(yīng)性組INF-γ有顯著升高(P0.05),IL-4無差異(P0.05)。特應(yīng)性組與非特應(yīng)性組比較INF-γ、IL-4均無差異(P0.05)。特應(yīng)性組、非特應(yīng)性組及對照組兩兩比較,INF-γ/IL-4比值均無差異(P0.05)。 4.RMPP組患兒BALF中LTB4及CysLTs較對照組兒童均有升高,其中LTB4顯著升高(P0.05)。特應(yīng)性組及非特應(yīng)性組BALF中CysLTs較對照組無顯著差異(P0.05)。特應(yīng)性組較非特應(yīng)性組BALF中CysLTs有顯著升高(P0.05)。特應(yīng)性組及非特應(yīng)性組BALF中LTB4較對照組均有升高,以特應(yīng)性組升高為甚,各組間兩兩相比,差異均有顯著性(P0.05)。。 5.RMPP組患兒BALF中中性粒細(xì)胞百分比與LTB4濃度呈正相關(guān)(γ=0.742, P0.01). 結(jié)論： 1. FQ-PCR檢測BALF中MP 16 SrRNA基因可能是早期MPP病原診斷的可靠方法。 2. RMPP患兒BALF細(xì)胞數(shù)顯著增加,尤以中性粒細(xì)胞為甚,LTB4與其發(fā)生可能相關(guān);在具有特應(yīng)性體質(zhì)患兒LTB4的水平高于非特應(yīng)性體質(zhì)者。 3. RMPP患兒BALF1中INF-γ、IL-4水平明顯升高,但I(xiàn)NF-γ/IL-4比值無變化,提示RMPP患兒病變局部炎癥反應(yīng)明顯,但尚不能證實RMPP患兒存在Th2占主導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。 4. RMPP患兒BALF中CysLTs升高不明顯；但具有特應(yīng)性體質(zhì)患兒CysLTs含量升高明顯,提示CysLTs的水平可能與機體的過敏狀態(tài)相關(guān)。 第二部分難治性肺炎支原體肺炎患兒臨床治愈后遠(yuǎn)期肺功能隨訪 目的：對RMPP患兒出院9-12月后進行臨床隨訪及肺功能檢測,來探討RMPP的預(yù)后及其對肺功能的遠(yuǎn)期影響。 方法： 1.對象及分組：選擇2008年9月-2010年3月在湖南省人民醫(yī)院兒科醫(yī)學(xué)中心住院,起病4周內(nèi)雙份血清MP抗體的滴度升高有4倍以上,并留有BALF的RMPP患兒(42例)為研究對象；于出院后9-12月進行臨床癥狀隨訪(35例)及肺功能檢測(29例)；根據(jù)是否有濕疹、過敏性鼻炎、蕁麻疹及相關(guān)過敏性疾病家族史等,將隨訪的RMPP患兒分為：特應(yīng)性組(10例接受臨床隨訪及肺功能檢測)及非特應(yīng)性組(接受臨床隨訪25例,接受肺功能檢測19例)；以既往無支原體、衣原體感染病史,無喘息病史,接受肺功能檢測時肺部聽診無羅音,近2周內(nèi)無疾病史的健康兒童為肺功能檢測對照組(12例) 2.臨床隨訪：均于出院后9-12月間進行電話隨訪。 3.肺功能檢查：于出院后9-12月進行檢測。0-4歲行潮氣呼吸檢查,4-6歲行IOS檢查,6-14歲行常規(guī)通氣檢查。 結(jié)果： 1.接受電話隨訪共35例患兒,均于出院后1-2月左右復(fù)查胸部X-ray或胸部CT提示原病灶吸收。8例患兒(21.74%)出院后至隨訪時有咳嗽病史,其中3例(8.70%)慢性咳嗽;5例患兒(13.04%)有喘息發(fā)作,均已診斷為哮喘。1例患兒(4.35%)于出院后1月余診斷患有過敏性紫癜,并住院治療,已治愈。 2.電話隨訪患兒,特應(yīng)性組較非特應(yīng)性組喘息(哮喘)的發(fā)生率有升高(P0.05),其余情況無差別；各年齡段間各種疾病發(fā)生率無差別(P0.05)。 3.接受肺功能檢測共29例患兒,接受潮氣呼吸檢測者9例,異常2例,接受IOS檢測者11例,異常1例,均為小氣道阻力輕度增高；接受常規(guī)通氣檢測者9例,異常0例；對照組12例,均無異常發(fā)現(xiàn)；RMPP患兒與對照組患兒肺功能異常發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4. RMPP患兒肺功能檢測,特應(yīng)性組較非特應(yīng)性組肺功能異常發(fā)生率有升高,兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);各年齡段肺功能異常發(fā)生率無差別(P0.05)。 結(jié)論： 1. RMPP病情重,易遺留肺部后遺癥,但早期明確診斷,并通過積極的治療仍能取得較好的療效； 2.尚不能認(rèn)為RMPP感染后對患兒的肺功能將造成長期的影響。 【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R725.6

【圖文】：

3.BALFFQ一PCR檢測Mp165rRNA基因結(jié)果(見圖l一l，l一2，l一3)在閡值之_卜出現(xiàn)擴增曲線，Ct值<30(>1護/ml)，實驗結(jié)果為陽性，由于每個患兒回收的灌洗液為0.5m呱g，，因而由儀器自動算出DNA含量(基因拷貝數(shù)/0.5m呱g);ct值歲。(>103/ml)，實驗結(jié)果為陰性。用求算術(shù)平均值方法計算MP一DNA平均拷貝數(shù)，陰性結(jié)果不參加計算。用檢測試劑盒自帶檢測陰性質(zhì)控，結(jié)果陰性。FQ一PCR檢測MP165rRNA基因重復(fù)性好，批內(nèi)CV值為0.95%，批間CV值為3.04%，MP陽性質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品FQ一PCR后，標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率為一2.844，線性相關(guān)系統(tǒng)產(chǎn)0.968，且具有較好的重復(fù)性。Y二一2.844X十38.873ORMPP組患兒BALF標(biāo)本42例共檢測出陽性結(jié)果42例，陽性標(biāo)本的拷貝數(shù)波動在9.99x103一4.03、109copies/m1，取對數(shù)后，計算其平均值及標(biāo)準(zhǔn)差為6.21士1.72。對照組BALF標(biāo)本12例，拷貝數(shù)均為0。

圖1一3質(zhì)控品(含陰性陽性質(zhì)控)以及部分樣品的擴增曲線且BALF標(biāo)本采集時間均早于第二份血清采集時間，即血清MP抗體滴度4倍升高時的時間。如圖1一4:0544 000555 322311

本文編號：2712282