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原發(fā)性肝癌患者CTCs檢測(cè)的臨床應(yīng)用研究和新生兒感染GBS的生物學(xué)特性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-11 15:27
【摘要】:本論文包括兩部分研究?jī)?nèi)容。第一章原發(fā)性肝癌患者CTCs檢棚的臨床應(yīng)用研究目的:初步探討外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells,CTCs)分型檢測(cè)在原發(fā)性肝癌患者預(yù)后判斷及腫瘤復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法:本文以2014年1月至2018年7月期間,經(jīng)南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院確診的67例原發(fā)性肝癌患者為研究對(duì)象,對(duì)患者外周血中CTCs表達(dá)水平與患者臨床病理分期、腫瘤組織Ki-67抗原表達(dá)水平、血清AFP含量及血細(xì)胞參數(shù)的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,并對(duì)22例患者治療前及治療過程中外周血CTCs檢測(cè)結(jié)果與患者疾病進(jìn)展?fàn)顩r進(jìn)行時(shí)間序列分析。結(jié)果:本研究結(jié)果顯示原發(fā)性肝癌患者外周血CTCs總數(shù)及間質(zhì)型CTCs的比例與患者腫瘤組織Ki-67抗原表達(dá)水平呈正相關(guān),而患者外周血CTCs總數(shù)與患者BCLC病理分期、血清AFP含量、及血細(xì)胞參數(shù)(NLR、PLR、RDW)等無明顯相關(guān);動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示原發(fā)性肝癌患者接受肝癌根治切除術(shù)后1~2月,外周血CTCs總數(shù)及間質(zhì)型CTCs比例都下降;治療過程中外周血CTCs總數(shù)及間質(zhì)型CTCs比例增加,提示患者有腫瘤復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)論::原發(fā)性肝癌患者外周血CTCs表達(dá)水平可以反映患者腫瘤組織的增殖情況。患者治療過程的CTCs動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),有利于監(jiān)控治療效果,盡早發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā),以便及時(shí)調(diào)整治療措施,改善預(yù)后。第二章新生兒感染GBS的生物學(xué)特性研究目的:通過研究B群鏈球菌(Group B streptococcus,GBS)新生兒感染臨床分離株的病原學(xué)及分子生物學(xué)特征,為進(jìn)一步研究新生兒GBS感染的致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:本文以南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院2014年3月至2016年12月期間,分離自新生兒感染臨床標(biāo)本的6株GBS為研究對(duì)象。對(duì)各菌株的生長(zhǎng)特性、抗吞噬特征、粘附特征進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,并對(duì)這些菌株進(jìn)行全基因組測(cè)序和BLAST分析。結(jié)果:通過測(cè)定生長(zhǎng)曲線,發(fā)現(xiàn)各菌株生長(zhǎng)速度有差異。僅有F780號(hào)菌株CAMP試驗(yàn)結(jié)果陰性。通過粘附試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)各菌株的粘附率有差異,F780號(hào)較其它菌株更容易粘附于Hep-2細(xì)胞。通過吞噬試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)F780號(hào)菌株對(duì)RAW264.7細(xì)胞的吞噬抵抗力最弱。運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)人血與GBS的相互作用進(jìn)行定量分析,發(fā)現(xiàn)F780號(hào)菌株最容易被人血吞噬細(xì)胞吞噬。全基因組測(cè)序及BLAST分析結(jié)果顯示F780號(hào)菌株的CAMP因子決定基因cfb缺失。結(jié)論:根據(jù)本研究結(jié)果,推測(cè)CAMP因子決定基因cfb的缺失可能導(dǎo)致菌株的抗吞噬能力減弱,本文為GBS抗吞噬作用機(jī)制的研究提供了科學(xué)依據(jù),有助于新生兒GBS感染致病分子機(jī)制的研究。
【圖文】:

熒光顯微鏡,分型,載玻片


Figl-1邋DiffrentCTCs邋types邋detected邋by邋fluorescence邋microscope逡逑1.2.2免疫組化法檢測(cè)原發(fā)性肝癌患者腫瘤組織Ki-67抗原表達(dá)水平逡逑a)切片制作:將患者手術(shù)中切除的腫瘤組織標(biāo)本經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定,石蠟逡逑包埋切片,,厚度3um,并放置在帶正電荷的載玻片上;逡逑b)脫蠟:按順序?qū)⑤d玻片浸入3個(gè)二甲苯槽中,時(shí)間各5min,取出后將載玻片按順逡逑序浸入兩個(gè)100%酒精槽中各3min,取出后浸入95%酒精槽中3min,取出后浸入逡逑80%酒精槽中3min,最后將載玻片轉(zhuǎn)移至蒸餾水槽中,浸洗至少10次,脫蠟完成逡逑后將載玻片浸泡在APK洗滌液中防止變干;逡逑c)抗原修復(fù):在Decloaking邋Chamber中壓力17-25psi,溫度120125°C條件下進(jìn)行高溫逡逑抗原修復(fù),計(jì)時(shí)2min完成抗原增強(qiáng)程序,隨后將處理好的片子放入去離子水中清逡逑

患者,外周血,臨床分期,總數(shù)


邐頌士學(xué)位論文CTCs總數(shù)的平均值為(9.71±9.62)個(gè)/5ml。BCLC-B期的患者有21例,BCLC-C期的者有20例,BCLC-B/C期患者CTCS總數(shù)的平均值為(8.92±7.54)個(gè)/5ml,如圖1-4(A)和1-4(B)所示,BCLC-A期患者的E/M-CTCs所占比例大于與BCLC-B/C期患者的E/M-CTCs逡逑所占比例(P=0.006),BCLC-A期與BCLC-B/C期患者的CTCs總數(shù)及E-CTC和M-CTCs占比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。逡逑□邋BCLC-A逡逑40-
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R735.7

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