發(fā)布時(shí)間：2020-06-10 01:01

【摘要】： 新生兒缺氧缺血性腦病(Hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是新生兒神經(jīng)系統(tǒng)殘疾的重要原因之一。及時(shí)診斷以及采用有效的治療手段對(duì)提高存活率減少后遺癥有重要意義。目前對(duì)其發(fā)病機(jī)制的分子生物學(xué)研究表明，缺氧缺血性腦損傷是多因素介導(dǎo)和參與的分子病理過程，諸多因素對(duì)病變的發(fā)生和發(fā)展起著阻抑或促進(jìn)作用。目前研究認(rèn)為，興奮性氨基酸(EAA)及其受體尤其是N-甲基-D-天門冬氨酸受體(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)與缺氧缺血性腦損傷(Hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)密切相關(guān)，而70kDa熱休克蛋白(HSP70)是缺氧缺血的敏感指標(biāo)。神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)是一種糖鞘脂，在神經(jīng)系統(tǒng)中含量豐富。而單唾液酸四已糖神經(jīng)節(jié)苷脂(Monosialotetrahexosylganglioside,GM1)是哺乳類神經(jīng)節(jié)苷脂的主要種類，它對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的分化、生長、軸漿轉(zhuǎn)運(yùn)和再生起著重要作用。但NMDAR、HSP70在新生兒缺氧缺血性腦病中的作用及GM1的腦保護(hù)作用的機(jī)制尚不清楚，本研究是通過觀察新生鼠HIBD后腦內(nèi)NMDAR、HSP70、病理學(xué)損傷的變化及應(yīng)用GM1治療后對(duì)其的影響，探討新生大鼠HIBD時(shí)NMDAR、HSP70與腦損傷的關(guān)系及GM1腦保護(hù)作用機(jī)制。 第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文 一 目的 研究排牛大階缺玩缺血川山趴傷后海馬CA 以N MADAR、 NMDARllllRNA、11SP70、病刊Z學(xué)損傷的變化和 GMI對(duì)其的影l(fā)向。 方法 結(jié)扎7 Ill齡新生鼠左頸總動(dòng)脈后，吸人80fill·L‘濃度氧2 h，出 立HI＊0模型。①制備新生鼠缺氧缺血性腦損傷（未治療組）模型。②制備 GM治）1組棋型，腦缺氧缺血（iii）后每日腹腔注射 GM注射液。應(yīng)川蘇 木素．伊紅（HE）染色，DoKa Envision二步法掄疫組化染色及原位雜交的力‘ 法檢測(cè)。新生鼠腦缺氧缺血后存活不同時(shí)IbJ腦河馬組織NMADARI NMDARllllANA、IISP70及病理學(xué)損傷的動(dòng)態(tài)變化及GMI對(duì)其的z剔向。 結(jié)果： l、術(shù)經(jīng) GM處理組 1．INMDARI衣達(dá)。俏凸：①NRI 陽性性細(xì)胞的形態(tài)及分布：NRI主業(yè) 分介于蘭！胞哄及胞 漿，與NRI多七結(jié)合1，經(jīng)＊＊B＼Z也攸糾I胞冊(cè)丑 漿 呈棕黃色：山于海馬各區(qū)不同細(xì)胞層細(xì)胞形態(tài)不同所呈現(xiàn)的NRI陽性細(xì)胞形 態(tài)亦不同。正常組及假手術(shù)組中陽性細(xì)胞較少以胞漿和膜著色為主。m縱 NRI川性細(xì)胞【U顯增多刃＊以＊Al 區(qū)【川顯刃＊出現(xiàn)一定皮向細(xì)胞核首色U② NRI蛋151檢漢結(jié)果二且 間差＊較：正常組與假手術(shù)全NRI正 似Z細(xì)胞的平均灰 度值在各時(shí)問，。于無顯著性差異，且表達(dá)較弱。HI組在缺血后Zh門90土12） 有所上：升。在24卜（150土16）至妮h（1的土1＊ 7紅下降，72 h（門1士 18）達(dá)最千，5 d（152土 22）JIJ仍維持較｛水平，7 d olJ有所廠升，仍低于二 常水平。有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0刀＄ l．2 NI＜11ill＜NA ）川人1人達(dá)。l，且泌c二 ＜一l＿） NIZllllRNAI S11們、Illj］W山／卜怎及多介二 成熟的＊Rim＊＊A主要存在于細(xì)胞漿中，細(xì)胞核內(nèi)有少雖的NRI。＊RN A的 體。＿＊NA與應(yīng)用地高辛標(biāo)記的寡核甘酸探針結(jié)合后，＊＊B呈色，胞漿核脫 呈休此色，人常川及＊干術(shù)字m廠N＊含至較少門1．行＊糾惻川。l多葉 葉1 故原位雜交后呈色深淺不一，HI后NRlmRNA陽性細(xì)胞明顯增多，匝以垃 形膠質(zhì)細(xì)胞為主，多數(shù)核著色甚至密集分布。②＊RlmKNA檢測(cè)的時(shí)間差比 較：正常組與假手術(shù)組 NRlmANA平均灰度無明顯差異。HI組與正常組在 NRI；nRNA 24達(dá)之問 ＊差異呈顯著卜］i義，＊Jt丫 HI后 24h（147土18）至 3 第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文 一 72h（121土 20）之問，其表達(dá)之間的差異呈非常顯著性怠義（P＝0．005）捉 示：正常悄況下表達(dá)較少，HI后引起表達(dá)明jA增加，＿l，I回72h達(dá)詭低，持紙7d 表達(dá)仍較低（156土 18） L3 NSP7O i白人達(dá)‘hs況：nSP70主翌分布于核脫及胞漿，‘＊NSP70多 仇糾介后，經(jīng)＊＊By色，攸核腆、胞漿呈體攸也 止常組及似【術(shù)組小NI 性細(xì)胞較少，染色較弱，呈1級(jí)染色。 1．4鼠海馬＊Al 區(qū)組織學(xué)改變：假手術(shù)組及正常對(duì)照組在各時(shí)間，。樂經(jīng) HE染色未見明顯缺血．損傷。M組在缺血后Zh無明顯損傷改變，24h偶見神 經(jīng)細(xì)胞腫脹，細(xì)胞淡染，細(xì)胞數(shù)量稍有減少，48h除。。IW見上述表現(xiàn)外，。。］“見 細(xì)胞部分壞死，，錐體細(xì)胞嗜伊紅變性，細(xì)胞松敝間隙擴(kuò)大，72h上還現(xiàn)象進(jìn) 一步加重，sd時(shí)可見海馬＊Al 區(qū)神經(jīng)元大多數(shù)壞死，嗜伊紅深染，周邊部 膠質(zhì)細(xì)胞增生。川時(shí)尤明顯改善，S八！。一個(gè)樣本出現(xiàn)核山縮、深染，似乎憂 示7））4亡）“4。。 二、GM處劃組： 2．1＊RI陽性細(xì)胞表達(dá)，①＊RI陽性細(xì)胞的形態(tài)及分布與正常組及假乎 術(shù)縱類似，較正常及似手術(shù)組數(shù)云計(jì)曾多，但與h1組比較叨孤減少。②川］－問 差的比較：在缺氧缺血后各時(shí)段內(nèi) NR蛋白表達(dá)較 i組顯著降低，但強(qiáng)于 －IHfZ”力1人ZM假下水gll，／，Z Ill）n Zh們有下降，24h至 48h＿11升，72h達(dá)札峪； sd呂 仍較向 霧7d時(shí)下降，除Zh點(diǎn)外各日三 點(diǎn)均｛于＊1組羅 有統(tǒng)
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R722.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 陳翔;NMDA受體的分子生物學(xué)進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè);1996年05期

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本文編號(hào)：2705537