應(yīng)用基因分型技術(shù)研究?jī)和拈T(mén)螺桿菌感染的家庭聚集現(xiàn)象
發(fā)布時(shí)間:2020-05-25 22:27
【摘要】: 目的:幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是人類(lèi)慢性胃病的重要致病源,血清流行病學(xué)調(diào)查提示人-人傳播是感染Hp的重要途徑,但有關(guān)獲得Hp感染的確切途徑了解尚少。本研究應(yīng)用分子生物學(xué)方法,聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性 (PCR-RFLP)對(duì)家庭內(nèi)多個(gè)成員感染的Hp進(jìn)行基因分型,以探討本地區(qū)兒童獲得Hp感染的可能途徑,從而為預(yù)防感染及制定防治策略提供有用依據(jù)。方法:198名伴有上消化道癥狀的兒童接受胃鏡檢查,Hp診斷依據(jù)血清抗Hp-IgG抗體,胃組織尿素酶試驗(yàn),組織Warthin-Starry嗜銀染色及PCR擴(kuò)增結(jié)果。采用PCR方法對(duì)來(lái)自60個(gè)家庭中的133名伴有上消化道癥狀的兒童及其一級(jí)親屬直接擴(kuò)增唾液和胃粘膜中的Hp尿素酶C(UreC)基因,并對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物分別采用限制性核酸內(nèi)切酶HhaⅠ與AluⅠ酶切消化,結(jié)合兩種酶切類(lèi)型得出Hp的酶切類(lèi)型(RFLP-C),通過(guò)比較RFLP-C的相似性以評(píng)價(jià)各個(gè)家庭成員獲得Hp的可能途徑。結(jié)果:(1)本地區(qū)伴有上消化道癥狀的兒童Hp感染率為55.1%,男、女Hp感染率無(wú)顯著性差異(56.3%與52.3%,P>0.05);漢族與壯族兒童感染率無(wú)顯著性差異(53.3%與57.5%,P>0.05);兒童Hp感染率隨年齡增長(zhǎng)而遞增。(2)兒童Hp感染的胃粘膜淋巴濾泡形成率顯著高于成人(53.9%與23.1%,P<0.05),但兒童Hp感染胃粘膜腸化、萎縮及不典型增生發(fā)生率低于成人,其中兒童Hp感染胃粘膜萎縮發(fā)生率顯著低于成人(11.5%與42.3%,P<0.05)。(3)采用PCR-RFLP方法,在78個(gè)Hp陽(yáng)性的家庭成員共得出22個(gè)獨(dú)立的酶切類(lèi)型。在28例感染Hp的 兒童中,7例u5.0入 7”8)從唾液中擴(kuò)增出 HP,在 30例 HP陽(yáng)性的 親屬中,10例D3.3兄 10億0)從唾液中擴(kuò)增出 HP,唾液與相應(yīng)胃粘膜 中的幽門(mén)螺桿菌RFLP{酶切類(lèi)型一致。對(duì)比73例胃體與胃竇HP的 RFLP-C類(lèi)型,其中6 7例(91.8%,6 7/73)兩者是一致的。(4)HP感 染存在家庭聚集現(xiàn)象:在60個(gè)家庭中,共有31個(gè)6.7九31仔0)先 證兒童與其家屬感染HP,有18例侶0.0丸18爬0)先證兒童與其家屬均 無(wú)感染 HP,僅有 7例(.7兄 7仔0)先證者感染了 HP,而其親屬無(wú)感染, 另有 4例“.7兄 4仔0)先證者未感染咖,,但其親屬已感染伽。u)HP 感染兒童與其一級(jí)親屬的唾液與胃粘膜中擴(kuò)增出的Hp Ure C基因 RFLP-C類(lèi)型完全一致;26例(83.9%,26/31)先證者感染的HP與其親 屬感染的HP類(lèi)型相同,剩余5例門(mén).1兄5侶)與親屬的HP類(lèi)型不同。 結(jié)論:()廣西地區(qū)有上消化道癥狀兒童幽門(mén)螺桿菌感染率為55.l兄 男、女Hp感染率無(wú)顯著性差異;漢族與壯族兒童Hp感染率無(wú)顯著性 差異。u)PCRRFLP分析Hp Ure C基因的酶切類(lèi)型可靠性及分辨率 較高,直接擴(kuò)增樣本 HP方法簡(jiǎn)便,可應(yīng)用于 HP的流行病學(xué)研究。u) HP感染兒童家庭內(nèi)一級(jí)親屬感染率顯著高于未感染家庭的親屬感染 率,感染成員唾液與胃粘膜中擴(kuò)增出的HP U” C基因 RFLP{酶切 類(lèi)型完全一致,同一家庭內(nèi)感染的 Hp Ure C基因 RFLP類(lèi)型高度相符, 提示家庭內(nèi)成員的日一日傳播可能是兒重期獲得HP的重要模式。
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2002
【分類(lèi)號(hào)】:R725.7
本文編號(hào):2680835
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2002
【分類(lèi)號(hào)】:R725.7
【引證文獻(xiàn)】
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1 顏如;反復(fù)腹痛患兒及家族成員外周血HLA-DR表達(dá)及淋巴細(xì)胞亞群的分析[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2012年
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