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新生大鼠缺氧缺血腦損傷ICEmRNA,COX-2蛋白的表達(dá)變化及COX-2抑制劑NS398的抗氧化作用

發(fā)布時間:2020-05-24 02:36
【摘要】: 目的:本實(shí)驗(yàn)以新生大鼠HIBD模型為研究對象,測定HIBD后3h-5d不同時間點(diǎn)病變側(cè)腦皮質(zhì)ICEmRNA和COX-2蛋白的表達(dá),并比較給予COX-2特異性抑制劑NS398后病變側(cè)腦組織MDA,SOD和NO的變化,以探討ICE和COX-2在新生兒HIBD形成中的作用及NS398的抗氧化作用,為新生兒HIBD的治療提供新的理論基礎(chǔ)和治療途徑。 方法:1 ICEmRNA測定組:將七日齡Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)對照組,HIBD12h, HIBD24h, HIBD3d和HIBD4d組,每組6只動物,用RT-PCR方法檢測。 2 COX-2蛋白測定組:將七日齡Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)對照組,HIBD3h, HIBD6h, HIBD12h, HIBD24h, HIBD48h和HIBD5d組,每組6只動物,用免疫組化方法測定,同時觀察光鏡下神經(jīng)元壞死情況。 3 NS398抗氧化指標(biāo)測定組:將七日齡Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)對照組,HIBD組,缺氧前1h給藥組,缺氧后1h給藥組。其中缺氧前,后給藥組又各分為大,中,小劑量組,每組8只動物,用于檢測MDA,SOD和NO的值。 結(jié)果:1 ICEmRNA測定組:對照組及HIBD各組均可見ICEmRNA擴(kuò)增產(chǎn)物,HIBD12h組ICEmRNA RT-PCR產(chǎn)物電泳條帶相對較弱,其光密度值與對照組相比無明顯差異(P>0.05),且明顯低于其余各組(P<0.05)。HIBD24h, HIBD3d和HIBD4d ICEmRNA RT-PCR產(chǎn)物光密度值逐漸增強(qiáng),其中HIBD4d最高,電泳條帶最強(qiáng)(P<0.05)。 2 COX-2蛋白測定組:對照組偶見COX-2蛋白的表達(dá),HIBD3h后蛋白表達(dá)逐漸增加,,HIBD24h達(dá)高峰,同其余各組相比均有顯著性差異(P<0.01)。HIBD48h, HIBD5d COX-2蛋白的表達(dá)減少,兩者無顯著性差異(P>0.05),但兩者的陽性細(xì)胞數(shù)除低于HIBD24h外,均高于其余各時點(diǎn), 碩士研究生學(xué)位論文 有顯著性差異(P0.01)O 3 NS398抗氧化指標(biāo)測定組:HIBD組認(rèn)DA,NO高于對照組,SOD 低于對照組(P0 .05)。缺氧前、后給藥各組同HIBD組相比MDA,NO有不 同程度的降低,SOD有不同程度的增高,但同對照組相比仍有顯著性差異 (P0 .05)。 結(jié)論:1新生大鼠HIBD后ICEmRNA,COX一2蛋白的表達(dá)均顯著增強(qiáng),且 COX一2蛋白的表達(dá)變化同光鏡下神經(jīng)元壞死情況具有一致性,說明ICE、 COX一2均在新生兒HIBD形成中發(fā)揮重要的作用。 2給予COX一2特異性抑制劑NS398后,腦組織內(nèi)MDA、NO減少, SOD增加,說明NS398具有一定的抗氧化作用,提示COX一2可能是通過催化 生成氧自由基參與了新生兒HIBD的形成,為新生兒HIBD的治療提供了新 的理論基礎(chǔ)和治療途徑。
【圖文】:

瓊脂糖凝膠


%瓊脂糖凝膠RNA電泳結(jié)果

新生大鼠缺氧缺血腦損傷ICEmRNA,COX-2蛋白的表達(dá)變化及COX-2抑制劑NS398的抗氧化作用


缺氧裝置
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2003
【分類號】:R722.121

【參考文獻(xiàn)】

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1 邢宏義;Caspase活化與神經(jīng)元凋亡[J];國外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊;2002年02期

2 陳惠金,周建德,周澤漢,周偉,吳圣楣;新生大鼠腦缺氧缺血損傷模型的制備[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);1999年03期

3 呂曉紅,王巖,張淑琴,崔俐;局灶性腦缺血再灌流過程中凋亡細(xì)胞相關(guān)基因的研究[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2001年02期

4 吳婉芳;;新生兒缺氧缺血性腦病動物實(shí)驗(yàn)研究[J];中國實(shí)用兒科雜志;1995年02期



本文編號:2678325

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