【摘要】： 腸神經(jīng)系統(tǒng)(enteric nervous system,ENS)是最大的外周神經(jīng)系統(tǒng),它的異�？梢鸷芏嘞忍煨约膊�,如先天性巨結(jié)腸及巨結(jié)腸類緣病,目前研究表明先天性肛門(mén)直腸畸形患兒的腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育也存在異常,并影響到術(shù)后排便功能的恢復(fù)。但具體有哪些因素可影響腸神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育,以及神經(jīng)嵴細(xì)胞如何轉(zhuǎn)化形成神經(jīng)節(jié)細(xì)胞尚不清楚。據(jù)報(bào)道,很多因子參與了腸神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程,如核轉(zhuǎn)錄因子HOX、NKX因子等。近來(lái)的研究表明,骨形成蛋白BMP-2和BMP-4在中胚層誘導(dǎo)、胚胎時(shí)期器官發(fā)育和中樞神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中起重要作用,但是否在腸神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá)及發(fā)揮作用則鮮有報(bào)道。本研究通過(guò)觀察骨形成蛋白BMP-2、BMP-4在SD大鼠胚胎腸管、肛門(mén)直腸畸形胎鼠直腸末端及先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung’s disease,HD)患兒神經(jīng)節(jié)正常腸段和神經(jīng)節(jié)缺如腸段中的定位及表達(dá)規(guī)律,探討它們?cè)谀c神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中可能的作用,為下一步研究提供方向。 方法本實(shí)驗(yàn)使用免疫組化SP法對(duì)不同年齡的SD大鼠結(jié)腸腸管、乙酰硫脲(ethylenethiourea,ETU)致畸的胎鼠直腸和先天性巨結(jié)腸患兒及對(duì)照者的手術(shù)標(biāo)本行HE常規(guī)染色和免疫組化染色,觀察BMP-2,4在腸神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)情況。應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)對(duì)所采集圖像進(jìn)行分析。 結(jié)果 1.BMP-2和BMP-4在不同年齡的SD大鼠結(jié)腸腸管中的表達(dá) BMP-2和BMP-4在腸壁全層均有表達(dá),在胚胎發(fā)育早期(E12.5)的腸管中,未見(jiàn)到神經(jīng)嵴細(xì)胞,發(fā)育中期(E16)黏膜下和肌間神經(jīng)叢的神經(jīng)嵴細(xì)胞出現(xiàn)BMP-2染色陽(yáng)性,肌間神經(jīng)叢神經(jīng)嵴細(xì)胞可見(jiàn)BMP-4陽(yáng)性表達(dá),黏膜下神經(jīng)叢的神經(jīng)嵴細(xì)胞未見(jiàn)到BMP-4染色陽(yáng)性;發(fā)育晚期(E20)黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢神經(jīng)節(jié)細(xì)胞BMP-2染色強(qiáng)陽(yáng)性,肌間神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞BMP-4染色呈強(qiáng)陽(yáng)性,而黏膜下神經(jīng)叢BMP-4染色相對(duì)較弱;出生后(7d)時(shí)BMP-2和BMP-4染色強(qiáng)陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞在黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢均有表達(dá);成年大鼠(4月)時(shí)BMP-2和BMP-4在肌間神經(jīng)叢中的神經(jīng)嵴細(xì)胞呈弱陽(yáng)性表達(dá),黏膜下神經(jīng)叢中神經(jīng)嵴細(xì)胞表達(dá)更弱。 2.BMP-2和BMP-4在無(wú)肛胎鼠模型直腸中的表達(dá) 光鏡下可見(jiàn)無(wú)肛胎鼠直腸末端未與外界相通,形成盲端,末端膨大,黏膜形成皺褶。BMP-2和BMP-4在腸壁全層均有表達(dá),包括大鼠黏膜、間充質(zhì)和肌間神經(jīng)叢,在直腸盲端處的神經(jīng)叢表達(dá)明顯減少。致畸組與正常對(duì)照組、有肛組相比有明顯差異(P0.05),正常對(duì)照組與有肛組無(wú)明顯差異(P0.05)。 3. BMP-2和BMP-4在先天性巨結(jié)腸中的表達(dá) BMP-2,4在各段腸管縱肌層、環(huán)肌層和黏膜肌層平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)無(wú)明顯差異(P0.05),在HD擴(kuò)張段神經(jīng)叢內(nèi)的表達(dá)與正常對(duì)照組無(wú)明顯差別(P0.05),在移行段、狹窄段神經(jīng)叢內(nèi)的分布與正常對(duì)照組、擴(kuò)張段相比呈不同程度的減少,差異有顯著性意義(P0.05)。BMP-2與BMP-4的表達(dá)呈正相關(guān)(P0.05)。 結(jié)論腸神經(jīng)系統(tǒng)中存在BMP-2,4的表達(dá),它們表達(dá)具有時(shí)相性。BMP-2,4在肛門(mén)直腸畸形、HD病變腸管段的表達(dá)異常,提示可能參與了腸神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育成熟, BMP-2/4信號(hào)通路異常時(shí)可能影響到神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的分化生長(zhǎng)與成熟。
【圖文】：

圖1 BMP-2在E12.5大鼠胎腸中的表達(dá) SP法×100 圖2 BMP-2在E16大鼠胎腸中的表達(dá) SP法×100Fig1 Expression of BMP-2 in the gut of E12.5 Fig2 Expression of BMP-2 in the gut of E16rat SP×100 rat SP×100圖3 BMP-2在E20大鼠胎腸中的表達(dá) SP法×100 圖4 BMP-2在P7d大鼠腸管中的表達(dá) SP法×100

圖1 BMP-2在E12.5大鼠胎腸中的表達(dá) SP法×100 圖2 BMP-2在E16大鼠胎腸中的表達(dá) SP法×100Fig1 Expression of BMP-2 in the gut of E12.5 Fig2 Expression of BMP-2 in the gut of E16rat SP×100 rat SP×100圖3 BMP-2在E20大鼠胎腸中的表達(dá) SP法×100 圖4 BMP-2在P7d大鼠腸管中的表達(dá) SP法×100
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R726.5

【引證文獻(xiàn)】

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1 楊雅涵;飼糧蛋白營(yíng)養(yǎng)對(duì)冬毛期水貂生產(chǎn)性能與毛囊調(diào)控基因表達(dá)的影響[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：2673380