【摘要】： 目的:探討黃芪注射液對小兒急性期川崎病(KD)外周血單個核細(xì)胞(PBMC)核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)活化的影響和對炎癥細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)的效用。 方法:采用Ficoll密度梯度離心法常規(guī)分離各受試對象的外周靜脈血,獲得PBMC,將其分編為五組:①空白組(自然培養(yǎng)),②PMA培養(yǎng)組(只加入終濃度為20nmol/L的NF-κB激動劑PMA),③PMA(終濃度20nmol/L)+黃芪注射液(終濃度25mg/ml)培養(yǎng)組,④PMA(終濃度20nmol/L)+黃芪注射液(終濃度50mg/ml)培養(yǎng)組,⑤PMA(終濃度20nmol/L)+黃芪注射液(終濃度100mg/ml)培養(yǎng)組,在37℃、5%CO2及相對濕度為95%的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察培養(yǎng)后各組PBMC內(nèi)NF-κB的活化水平;酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)雙抗體夾心法測定培養(yǎng)后上清液中TNF-α的表達(dá)含量。 結(jié)果:(1)在自然培養(yǎng)下,正常對照(Normal)組和KD組PBMC中均可出現(xiàn)一定量的NF-κB活化,其培養(yǎng)上清液中也有TNF-α的表達(dá),KD組顯著高于Normal組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P = 0.000);(2)加入PMA刺激培養(yǎng)后,兩組PBMC中NF-κB陽性細(xì)胞百分比均顯著升高,同時培養(yǎng)上清液中TNF-α的表達(dá)量也明顯升高,KD組仍明顯高于Normal組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P = 0.000);與自然培養(yǎng)組比較差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P = 0.000);(3)分別加入不同濃度的黃芪注射液(25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml)后,可以觀察到對PMA刺激的PBMC中NF-κB活化細(xì)胞百分比明顯降低,相應(yīng)的PBMC培養(yǎng)上清液中TNF-α的表達(dá)量也隨之降低,但KD組仍然高于Normal組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P = 0.000);與PMA組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P = 0.000);與自然培養(yǎng)組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(4)三組不同濃度的黃芪注射液隨著劑量的增大,數(shù)據(jù)似乎有減小的趨勢,但其差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(5)NF-κB活化的陽性細(xì)胞百分比與TNF-α的表達(dá)含量呈正的直線相關(guān)(r =0.601,P = 0.005)。 結(jié)論:黃芪注射液在KD急性期的主要抗炎作用機(jī)制是抑制了NF-κB的活化,同時也抑制了炎癥細(xì)胞因子TNF-α的表達(dá)。
【圖文】：

圖 1：陽性對照，霍奇金淋巴瘤（×400）圖 2：陰性對照，KD 患兒 PBMC 涂片，一抗為 PBS（×400）圖 3：KD 患兒 PBMC 涂片，自然培養(yǎng)組（×400）圖 4：KD 患兒 PBMC 涂片，PMA 組（×400）

圖 1：陽性對照，，霍奇金淋巴瘤（×400）圖 2：陰性對照，KD 患兒 PBMC 涂片，一抗為 PBS（×400）圖 3：KD 患兒 PBMC 涂片，自然培養(yǎng)組（×400）圖 4：KD 患兒 PBMC 涂片，PMA 組（×400）
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R272

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本文編號：2660915