【摘要】： 目的現(xiàn)今普遍認(rèn)為除興奮毒性機(jī)制氧自由基損傷外炎癥在發(fā)育中腦損傷病理生理過(guò)程中占有重要地位。糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)作為強(qiáng)有力的抗炎物質(zhì),能有效地抑制致炎癥信號(hào)和相關(guān)基因表達(dá),但在腦發(fā)育期不恰當(dāng)應(yīng)用GC可能嚴(yán)重影響腦發(fā)育。在腦內(nèi),GC是通過(guò)糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoidreceptor,GR)發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究新生期大鼠反復(fù)驚厥對(duì)皮質(zhì)區(qū)GR表達(dá)的影響,探討腦內(nèi)GR和發(fā)育期腦損傷變化之間關(guān)系。 方法48只生后7天(postnatal day 7,PN-7d)的SD大鼠隨機(jī)分成驚厥組和對(duì)照組,每組24只,驚厥組每日吸入三氟乙醚誘導(dǎo)驚厥發(fā)作1次,每次持續(xù)30 min,連續(xù)6d;對(duì)照組同樣操作但不吸入三氟乙醚。兩組大鼠于反復(fù)驚厥后(after recurrent seizures,ARS)1d、3d、7d隨機(jī)各選取8只大鼠斷頭去腦,分別采用Western blots及免疫組織化學(xué)方法觀察大鼠大腦皮層GR表達(dá)的變化。 結(jié)果(1)通過(guò)Western blots發(fā)現(xiàn)在大腦皮質(zhì)區(qū)GR生后即有表達(dá),隨著日齡的增加大腦皮層GR的表達(dá)呈現(xiàn)一定的規(guī)律性。在生后早期新生大鼠GR主要表達(dá)于胞漿,而后胞核中表達(dá)迅速增加。與正常對(duì)照組相比較,驚厥組大鼠ARS—1d(PN—13d)及ARS-7 d(PN—19d)時(shí),胞漿蛋白中GR表達(dá)無(wú)顯著性差異(P＞0.05);ARS—3d(PN—15d)驚厥組大鼠皮層胞漿蛋白中GR表達(dá)顯著降低(P＜0.05)。與正常對(duì)照組相比較,驚厥組大鼠ARS—1d(PN—13d)及ARS-3d(PN-15d)時(shí)皮層胞核蛋白中均未檢出GR的表達(dá),ARS-7 d(PN-19d)時(shí)驚厥大鼠皮層胞核蛋白中GR表達(dá)顯著降低(P＜0.05)。(2)通過(guò)免疫組織化學(xué)方法發(fā)現(xiàn)GR在皮質(zhì)表達(dá)豐富,隨著日齡的增加大腦皮層各葉GR的表達(dá)呈現(xiàn)一定時(shí)相性和區(qū)域性。在PN—13d時(shí),GR陽(yáng)性部位為胞漿,在PN—15d、PN—19d時(shí)胞核區(qū)也出現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)。在ARS-1d(PN—13d)時(shí),驚厥組大鼠頂葉區(qū)GR免疫化學(xué)累計(jì)光密度(accumulate optical density,AOD)明顯低于正常對(duì)照組(P＜0.05),而在額葉、顳葉區(qū)兩組無(wú)顯著性差異(P＞0.05):在ARS-3d(PN—15d)時(shí),驚厥組大鼠皮層頂葉、顳葉區(qū)GR免疫化學(xué)AOD明顯低于正常對(duì)照組(P＜0.05),在額葉區(qū)無(wú)顯著性差異(P＞0.05);在ARS-7d(PN—19d)時(shí),驚厥組大鼠皮層頂葉、顳葉和額葉區(qū)GR免疫化學(xué)AOD明顯低于正常對(duì)照組(P＜0.05)。 結(jié)論(1)皮質(zhì)區(qū)GR隨腦發(fā)育成熟表達(dá)呈現(xiàn)一定規(guī)律性及分布特點(diǎn),與腦發(fā)育過(guò)程密切相關(guān)。(2)新生大鼠反復(fù)驚厥造成大腦皮層GR表達(dá)的異常,可能參與反復(fù)驚厥所致發(fā)育期腦急性損傷。
【圖文】：

3d(PN一15d)時(shí)驚厥大鼠皮層核蛋白中均未檢出GR的表達(dá)，，ARS一7d(PN一19d)時(shí)驚厥大鼠皮層核蛋白中GR表達(dá)顯著降低 (P<0.05)(見表1、表2、圖3、圖4)。表1新生大鼠反復(fù)驚厥后大腦皮層胞核GR表達(dá)定量分析(n=8)組別A只S一 ldARS一 3dARS一7d(PN一13d)(PN一15d)(pN一19d)，了月了，‘，犯洲4.94

本文編號(hào)：2660397