【摘要】： 第一部分肺炎鏈球菌兒童急性呼吸道感染的流行病學(xué)特征及耐藥性 目的了解肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumonia,SP)在蘇州地區(qū)兒童呼吸道感染中的感染情況;探討SP感染的流行病學(xué)特征;了解本地區(qū)SP對(duì)抗菌藥物尤其是對(duì)β-內(nèi)酰胺類的敏感性。 方法選取2006年1月～2008年12月蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸科4865例急性呼吸道感染住院患兒,采用無(wú)菌負(fù)壓吸引法采集新鮮痰液,分離培養(yǎng)得到SP株的純培養(yǎng)物。用紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer法,K-B法)測(cè)定9種抗生素的藥物敏感性,對(duì)其中79株SP以E-test法測(cè)定4種β-內(nèi)酰胺類抗生素最小抑菌濃度(minimalinhibitory concentrations,MICs)。 結(jié)果4865例痰標(biāo)本中,檢測(cè)到509株SP,陽(yáng)性率為10.5%。三年間SP檢出率無(wú)明顯差異。SP以3～5歲兒童最為易感,無(wú)性別差異,春冬季感染率較高。SP導(dǎo)致的疾病主要為支氣管肺炎(86.2%),臨床表現(xiàn)主要為咳嗽(96.9%)、發(fā)熱(60.3%)、喘息(49.3%)、肺部羅音(81.6%)和胸片異常(90.4%)。SP感染患兒易合并鼻-鼻竇炎。單純SP感染149例,合并感染病原中以支原體和合胞病毒最為多見(jiàn),分別為28.5%和17.5%。檢出的SP株對(duì)紅霉素、克林霉素、四環(huán)素的耐藥率均在90%以上,對(duì)氯霉素、氧氟沙星、利福平的耐藥率較低,未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥株。79株SP中91.1%為中介株,對(duì)頭孢呋辛、頭孢曲松、頭孢噻肟的耐藥率分別為87.3%、32.9%、10.1%。93.7%的SP株存在多重耐藥現(xiàn)象,在耐藥(R)模式上,以紅霉素+復(fù)方新諾明+克林霉素+四環(huán)素+頭孢呋辛最常見(jiàn)(29.1%)。 結(jié)論(1)肺炎鏈球菌為蘇州地區(qū)兒童呼吸道感染中最易感的細(xì)菌病原。(2)全年均存在SP感染,流行高峰在春冬季。(3)SP感染的臨床特征無(wú)特異性,引起的感染主要表現(xiàn)為下呼吸道感染。(4)SP對(duì)紅霉素、克林霉素、四環(huán)素、頭孢呋辛的耐藥率極高,對(duì)青霉素、頭孢曲松以中介為主,對(duì)頭孢噻肟的耐藥率相對(duì)較低,隨著青霉素MIC值的增高,SP對(duì)其它抗生素的耐藥率亦呈上升趨勢(shì)。蘇州地區(qū)SP耐藥形勢(shì)嚴(yán)峻,臨床上對(duì)SP感染的治療有待調(diào)整。 第二部分肺炎鏈球菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥相關(guān)基因的研究 目的分析肺炎鏈球菌(SP)β-內(nèi)酰胺類耐藥相關(guān)基因PBP1a、2b、2x序列的氨基酸變異情況及其與β-內(nèi)酰胺類抗生素最小抑菌濃度(MIC)的關(guān)系。 方法選取2008年4月～2008年10月于蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院收集到的各種來(lái)源SP標(biāo)本59株,以E-test法測(cè)定4種β-內(nèi)酰胺類抗生素MIC,對(duì)各株SP的青霉素結(jié)合蛋白(penicillin binding proteins,PBPs)基因PBPla、2b和2x的青霉素結(jié)合區(qū)域(penicillin binding domain PBD)以巢式PCR擴(kuò)增及測(cè)序,將其與SP標(biāo)準(zhǔn)株R6序列進(jìn)行比對(duì),分析氨基酸變異情況。 結(jié)果59株SP中PSSP株8例(13.5%),PISP株46例(78.0%),PRSP株5例(8.5%)。兩株P(guān)RSP未檢出PBP1a。已證實(shí)與耐藥相關(guān)的活化位點(diǎn)突變?cè)诒狙芯恐芯邪l(fā)現(xiàn),如PBP1a中Thr371→Ala/Ser,PBP2b中Thr451→Ala、Glu481→Gly以及PBP2x中Thr338→Ala。同時(shí)本次研究亦發(fā)現(xiàn)一些少見(jiàn)的變異位點(diǎn),如PBP2x中Ser337→Thr、Gln552→Glu(使頭孢菌素MIC值增加約3倍),PBP2b中Gly472→Leu、Ser474→Asn、Gly488→Ala及PBP1a中Ser351→Ala、Ile358→Thr。一些位點(diǎn)的氨基酸置換與β-內(nèi)酰胺類MIC值密切相關(guān),PBP2x中Thr338→Ala、Met339→Phe、Met400→Thr和Arg384→Gly的聯(lián)合突變株(占45.6%,26/57)頭孢菌素類MIC值顯著增高,平均MIC≥5.0μg/ml;PBP2b中Ala624→Gly、570QLQPT→AIDTK的聯(lián)合附加突變(占49.2%,29/59)可使頭孢菌素類的平均MIC值升高3倍以上,青霉素MIC平均值達(dá)1.0μg/ml:PBP1a氨基酸變異表型較為單一,均為三個(gè)保守序列(附近)Thr371→Ala/Ser、Pro432→Thr和574TSQF577→NTGY的同時(shí)變異,在此基礎(chǔ)上Ser351→Ala、Ile358→Thr的變異可不同程度的增加β-內(nèi)酰胺類MIC值,達(dá)到中介至耐藥水平。部分具有相同氨基酸變異的SP株出現(xiàn)不同的β-內(nèi)酰胺類MIC值。 結(jié)論(1)PBP1a、2b、2x的氨基酸變異與SP對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥有關(guān)。(2)隨著保守序列(附近)氨基酸變異位點(diǎn)的增多,其β-內(nèi)酰胺類MIC值亦有所增高。(3)臨床SP株P(guān)BP的氨基酸變異與實(shí)驗(yàn)株有一定差異。(4)部分SP株β-內(nèi)酰胺類MIC值的差異無(wú)法完全依賴PBP1a、2b、2x的氨基酸變異來(lái)解釋,有待對(duì)其它PBP或非PBP相關(guān)基因的研究。
【圖文】：

出率分別為:11.8%(145/1234)、7.5%(95八273)、10.7%(136八274)、12.3%(133八084)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義份二18.2528，p<0.01)，可以認(rèn)為sP以春冬季檢出率較高。三年各季節(jié)SP株檢出情況見(jiàn)圖I。.2006.2007 D2008匕左八二O自 nCOU，

本文編號(hào)：2658388