【摘要】： 病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是小兒心血管科常見的疾病。近年來,我國VMC的發(fā)病呈上升趨勢,并且已成為青少年不明原因猝死的主要原因之一。不僅如此,慢性VMC還可導(dǎo)致擴張性心肌病的發(fā)生,嚴(yán)重危害小兒生命健康,故加強研究力度很有必要。迄今,VMC的治療尚無有效的辦法,因此,闡明VMC的發(fā)病機制并根據(jù)其機制提出有效的治療方法具有重要的理論和實踐意義。本研究應(yīng)用CVB3感染BALB/c小鼠建立VMC小鼠模型,干預(yù)組在感染后第四天始應(yīng)用SB203580干預(yù)3天,各組在CVB3感染后第0、4、7、10天取心肌組織應(yīng)用RT-PCR法及應(yīng)用Western blot法對各組小鼠心肌細胞核NFκB的mRNA表達和心肌細胞核NFκB的含量進行了檢測,同時測定心肌病毒載量、心肌病理積分,血TNF-α水平,觀察SB203580對CVB3體內(nèi)感染后不同時間、不同CVB3載量對心肌病理積分,心肌組織NFκBmRNA表達和心肌細胞核NFκB的含量的影響及心肌病理積分和NFκB的相關(guān)性。以期望了解NFκB在病毒性心肌炎體內(nèi)模型的作用及SB203580對病毒性心肌炎體內(nèi)模型的干預(yù)作用。研究結(jié)果表明:干預(yù)組第7、10天血中TNF-α水平、心肌細胞中病毒滴度、心肌病理積分、心肌細胞核NFκB的mRNA表達及心肌細胞核中NFκB的含量均較病毒組降低,二者4、7、10天相應(yīng)指標(biāo)均高于對照組。由此可見,應(yīng)用SB203580干預(yù)可減輕病毒性心肌炎小鼠的心肌損害,主要通過對轉(zhuǎn)錄因子NFκB抑制作用,進而抑制TNF-α等細胞因子合成來完成。從新的角度解釋了病毒性心肌炎的發(fā)病機制。本研究還通過直線相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)病毒在心肌細胞內(nèi)的繁殖在早期VMC心肌組織的病理變化有重要作用。NFκB在調(diào)節(jié)炎性細胞浸潤心肌組織中發(fā)揮了重要作用,病毒性心肌炎心肌組織的病理變化與NFκB有關(guān),揭示NFκB在心肌炎的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。干預(yù)NFκB的激活,可能減少免疫效應(yīng)細胞對心肌的攻擊,從而減輕心肌的炎癥浸潤及壞死,維持其結(jié)構(gòu)及功能完整。本研究病毒性心肌炎的防治提供了有益的探索,也為其它炎癥相關(guān)疾病的治療研究提供一個新思路。
【圖文】：

將柯薩奇B3病毒液在滅菌小試管內(nèi)作連續(xù)的10倍稀釋，即用1ml吸管吸，加入已裝有 l.8ml 的 MEM 培養(yǎng)液（含 2%新生牛血清）的第一支小試充分振蕩；）另換 1 支新的 lml 吸管，吹打混合后，吸取 0.2ml 移入第二管 MEM 換吸管，如上充分振蕩和吹打混勻后，再吸取 0.2ml 移于第三管；）連續(xù)如此操作，將 CVB3病毒液稀釋成 10-1-10-6十個滴度。吸取每一 0.2ml，，加到已鋪 HeLa 細胞的 96 孔極中。每個稀釋度四個復(fù)孔；）每天觀察細胞的病變情況，病變細胞浮起、折光性增強。病變細胞>變孔。連續(xù)觀察 5 天，并作記錄。按 Reed- Muench 方法計算 CVB3的 T統(tǒng)計學(xué)處理量資料用 x ±S 表示，分別采用 F 檢驗、t 檢驗、直線相關(guān)分析進行數(shù)據(jù)理由 SPSS10.0 完成。實驗結(jié)果：CVB3的 TCID50 為：107/0.1ml。

病毒性心肌炎小鼠模型料與方法分組及動物模型制備：160只4周齡BALB/c雄性小鼠隨機分為正常對照毒組（n=60）、治療組（n=60）將病毒組及干預(yù)組每只小鼠均腹腔接/0.1ml[40,41,42]的CVB3病毒液0.lml，正常對照組小鼠均腹腔接種不含病毒lm1。治療組從病毒接種第4天開始，給予SB203580（配制成10μmol/L），1次/天，共3天。實驗觀察：接種后每天觀察動物的活性狀態(tài)、飲食情況及毛色變化，記，并于 0 天（接種當(dāng)日）、4 天、7 天、10 天斷髓處死小鼠前分別給存活圖 1.1.4.2 hela 細胞 50%病變Fig1.1.4.2 50% hela cell inflammatory lesion
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R725.4

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 宋曉東,王侖,劉玉清,辛穎,惠汝太;柯薩奇病毒致病毒性心肌炎的細胞凋亡研究[J];病毒學(xué)報;2005年02期

2 胡艷芳,龔方戚;病毒性心肌炎免疫發(fā)病機制及免疫治療的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊);2005年01期

3 程雁 ,楊正修 ,龔蘊貞,林維芬,曹立宇;病毒性心肌炎小鼠體內(nèi)γ-IFN與NO相關(guān)性研究[J];臨床兒科雜志;2002年04期

4 黃翠萍;楊和平;張珍祥;徐永健;;p38蛋白激酶對脂多糖誘導(dǎo)肺泡巨噬細胞NF-κB活化的調(diào)控[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年06期

5 劉興蓮,黃星原,張敏;實驗性病毒性心肌炎小鼠中核因子κB、單核細胞趨化蛋白-1的表達及意義[J];中國臨床康復(fù);2004年30期

6 沈燕,曹青,邵先安,王纓,儲以微,熊思東;MCP-1與CVB3相互作用參與病毒性心肌炎的發(fā)生[J];中國心血管雜志;2003年05期

7 黃穎;NF-κB與心血管疾病[J];心血管病學(xué)進展;2002年04期

8 胡曉華 ,劉亞黎 ,林雯 ,陳立敏 ,董繼華 ,劉朝;白細胞介素18對病毒性心肌炎小鼠治療作用的研究[J];中華兒科雜志;2002年06期

9 王選,韓曙光,陳文亮,武世榮,朱鐳,張麗,王宏偉;流式細胞術(shù)快速檢測急性胰腺炎核因子-κB激活的研究[J];中華肝膽外科雜志;2002年12期

10 吳婧,王焱林,王成夭,柯劍娟;氯胺酮對心肌缺血/再灌注大鼠心肌NF-κB和血清白細胞介素6的影響[J];中華麻醉學(xué)雜志;2004年07期

本文編號：2656686