【摘要】： 目的缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是圍生期新生兒腦損傷最常見(jiàn)的原因,可引起腦癱、癲癇、智力低下以及學(xué)習(xí)障礙等一系列中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常,并可能發(fā)生嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥,對(duì)其家庭及社會(huì)造成巨大且長(zhǎng)期的影響。選擇性的細(xì)胞壞死和凋亡是HIBD時(shí)神經(jīng)細(xì)胞死亡的兩種主要形式。壞死已被證實(shí)是HIBD后第一天內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的主要死亡形式,但在此期可見(jiàn)有大量細(xì)胞表現(xiàn)出凋亡早期的形態(tài)特征,提示凋亡機(jī)制已經(jīng)啟動(dòng)。在HIBD后數(shù)天至數(shù)周神經(jīng)細(xì)胞死亡形式以凋亡為主,凋亡持續(xù)發(fā)生在如大腦皮層等易受損傷的部位,產(chǎn)生遲發(fā)性細(xì)胞死亡加重腦損傷。因此,神經(jīng)細(xì)胞凋亡是新生大鼠HIBD選擇性神經(jīng)細(xì)胞丟失的一種主要形式。已有大量的研究報(bào)道表明HIBD后神經(jīng)細(xì)胞凋亡與時(shí)程密切相關(guān),所以抑制凋亡治療的療效肯定也與治療的時(shí)間窗有著緊密的關(guān)系。國(guó)內(nèi)外大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)在HIBD后早期進(jìn)行HBO治療可有效抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡。很多研究從不同的角度闡述了HIBD后HBO治療的最佳時(shí)間窗,目前大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為在損傷后2～24 h內(nèi)開始HBO治療是有效的,而延長(zhǎng)HBO治療的時(shí)間窗則效果不佳,甚至國(guó)外有研究發(fā)現(xiàn)在成年大鼠局灶性缺血后12 h開始HBO治療會(huì)加重腦損傷。由于很多因素限制,臨床上經(jīng)常無(wú)法早期開始HBO治療,因此研究延遲治療時(shí)間窗是否仍可有效抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生可為臨床上延遲時(shí)間窗開始HBO治療提供理論依據(jù),是很有實(shí)際意義的。本研究的主要目的是探討HIBD后HBO治療抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的最佳時(shí)間窗,以及延遲時(shí)間窗HBO治療對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。 方法本研究采用7日齡Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為7組(n=8),即正常對(duì)照組(CON),缺氧缺血腦損傷組(HIBD),及高壓氧治療組(HBO),其中HBO組又根據(jù)HIBD后開始HBO治療的不同時(shí)間分為2小時(shí)高壓氧組(2H-HBO)、24小時(shí)高壓氧組(24H-HBO)、48小時(shí)高壓氧組(48H-HBO)、72小時(shí)高壓氧組(72H-HBO)和96小時(shí)高壓氧組(96H-HBO)等五個(gè)亞組,分別于HIBD后2 h、24 h、48 h、72 h和96 h開始給予HBO治療。HBO治療的條件均為2 ATA,穩(wěn)壓1 h,持續(xù)7天。待96H-HBO組HBO療程結(jié)束(鼠齡18 d)時(shí)同期處死所有老鼠取腦組織后,常規(guī)脫水及石蠟包埋。采用TUNEL染色法檢測(cè)各組大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況。 結(jié)果研究發(fā)現(xiàn)HIBD后2 h及24 h開始HBO治療,均可有效抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡發(fā)生。48 h、72 h和96 h開始HBO治療,大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)隨著時(shí)間窗的延長(zhǎng)逐漸增多,且3組之間差異有顯著意義(P＜0.01)。結(jié)果提示,隨著HBO治療時(shí)間窗的延長(zhǎng),對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的抑制作用逐漸減弱。但延長(zhǎng)時(shí)間窗的HBO治療組與HIBD組相比凋亡細(xì)胞的數(shù)仍有明顯減少,差異有顯著意義(P＜0.01)。這一結(jié)果提示即使錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)間窗,時(shí)間窗延長(zhǎng)的HBO治療仍有部分抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用。 結(jié)論1)HBO治療抑制新生大鼠HIBD神經(jīng)細(xì)胞凋亡的最佳時(shí)間窗在24 h內(nèi)。2)HBO治療抑制新生大鼠HIBD神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用隨著時(shí)間窗的延長(zhǎng)而逐漸減弱。3)新生大鼠在HIBD后24h后開始HBO治療,雖然抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用明顯減弱,但也不會(huì)加重神經(jīng)細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R722.121

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本文編號(hào)：2646887