【摘要】： 過(guò)敏性紫癜(HSP)是以壞死性小血炎為主要病理改變的全身性疾病。紫癜性腎炎(HSPN)是繼發(fā)于HSP的腎臟損害,為兒童常見(jiàn)的繼發(fā)性腎小球疾病之一。近年來(lái)有研究表明,HSPN所致的血管炎中有很多細(xì)胞因子的參與,其中白細(xì)胞介素-8(IL-8)的作用較為明顯,它是一種中性粒細(xì)胞趨化因子,參與免疫復(fù)合物介導(dǎo)的血管炎的病理過(guò)程,與HSPN的臨床表現(xiàn)密切相關(guān);IL-8基因依據(jù)其3'端2767位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性,而在人群中表現(xiàn)為AA型、GG型和GA型, IL-8的基因多態(tài)性現(xiàn)象與HSPN患者的易感性密切相關(guān)。為進(jìn)一步闡明HSPN與IL-8的關(guān)系,本課題研究HSPN患兒外周血中IL-8的表達(dá),并進(jìn)行相關(guān)的基因多態(tài)性檢測(cè),分析其表達(dá)、基因多態(tài)性與HSPN的關(guān)系,從而評(píng)估IL-8在HSPN發(fā)病過(guò)程中的影響和作用。 對(duì)象與方法 1.選擇HSPN急性期患兒42例,隨訪的HSPN恢復(fù)期患兒28例,對(duì)照組20例,來(lái)自健康體檢兒童。 2.對(duì)急性期組42例、恢復(fù)期組28例及對(duì)照組患兒20例采用Real-Time PCR的方法測(cè)定IL-8的CT值,并計(jì)算出Delter delter CT值,以數(shù)學(xué)公式定量計(jì)算RNA表達(dá)水平。 3.對(duì)患病組患兒68例(包括急性期組和恢復(fù)期組患兒)及對(duì)照組患兒20例采用Pyrosequencing(焦磷酸測(cè)序)法對(duì)IL-8基因多態(tài)性分析。 結(jié)果 1.外周血中IL-8中RNA表達(dá)的平均定量結(jié)果為:42例急性期病例組患兒為2-(3.5079±1.14947), 28例恢復(fù)期組為2-(5.9782±0.81948),20例對(duì)照組為2-(7.3095±0.67266)。急性期患兒外周血中IL-8的RNA表達(dá)水平明顯高于恢復(fù)期組及健康對(duì)照組,而恢復(fù)期組與急性期病例組比較,外周血IL-8的RNA表達(dá)的平均定量水平雖有明顯的降低,但仍然高于對(duì)照組。經(jīng)過(guò)方差分析,兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的顯著性差異(P0.05)。 2.68例患病組(急性期組和恢復(fù)期組)中,純合子41例(60.3%),其中AA型9例(13.2%),GG型32例(47.1%),雜合子(GA型)27例(39.7%),20例健康對(duì)照組中純合子5例(25.0%),其中AA型2例(10.0%),GG型3例(15.0%),雜合子(GA型)15例(75.0%)�；疾〗M中純合子分布的頻率明顯高于對(duì)照組,經(jīng)檢驗(yàn),P值0.05。提示IL-8純合子基因型的患兒對(duì)于紫癜性腎炎更易感。對(duì)比患病組及對(duì)照組中的IL-8基因純合子(AA/GG)出現(xiàn)頻率,經(jīng)檢驗(yàn),并經(jīng)Fisher's精確檢驗(yàn)校正,P值0.05。即純合子中GG出現(xiàn)的頻率又高出AA出現(xiàn)的頻率,并表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)上的明顯差異。提示在我國(guó)紫癜性腎炎患兒中,純合子相對(duì)易感,其中尤以GG型者為甚。并且樣本分布符合Hardy-Weiberg平衡。 結(jié)論 IL-8參與了紫癜性腎炎的發(fā)病及病理過(guò)程,并可能與其臨床表現(xiàn)相關(guān);IL-8基因型純合子(AA/GG),尤其是GG型,出現(xiàn)頻率的增高將使過(guò)敏性紫癜更易進(jìn)展為紫癜性腎炎。IL-8的基因多態(tài)性在紫癜性腎炎發(fā)病過(guò)程中起顯著作用,提示紫癜性腎炎的發(fā)病很可能與其基因背景有關(guān)。
【圖文】：

RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA后Real-TimePCR電泳驗(yàn)證圖

IL-8RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA后PCR擴(kuò)增圖（多孔）
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R726.9

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