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新生大鼠缺血缺氧性腦損傷HSP70的合成及與細(xì)胞凋亡的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2020-04-18 02:11
【摘要】: 目的:利用新生大鼠缺血缺氧性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage HIBD)動(dòng)物模型,觀(guān)察缺血缺氧性腦損傷后不同時(shí)間腦細(xì)胞形態(tài)變化、HSP70的合成及細(xì)胞死亡形式,探討HIBD后HSP70的合成與細(xì)胞凋亡的關(guān)系,為缺血缺氧性腦病提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 方法:7日齡SD大鼠48只,雌雄不限,體重12-18g,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、假手術(shù)組和實(shí)驗(yàn)組(缺血缺氧后2h、6h、18h、24h、48h、72h組)共8組,每組各6只,實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物采用阻斷右側(cè)頸總動(dòng)脈后置于含8%O2的低氧環(huán)境中2小時(shí),建立缺血缺氧性腦損傷動(dòng)物模型并對(duì)其行為進(jìn)行觀(guān)察。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)取各組新生大鼠腦組織,用組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法( terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)在光鏡下觀(guān)察腦組織的病理改變,通過(guò)免疫組化法測(cè)定HSP70陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及用TUNEL法測(cè)定凋亡細(xì)胞指數(shù)。 結(jié)果:缺血缺氧后新生大鼠出現(xiàn)不同程度的行為異常。HE染色缺血缺氧后2-6h右側(cè)腦神經(jīng)細(xì)胞水腫及少量局灶性壞死,缺血缺氧后72h右側(cè)腦組織中可見(jiàn)界限清楚的壞死灶。正常腦組織內(nèi)未觀(guān)察到明顯HSP70陽(yáng)性細(xì)胞及凋亡細(xì)胞。缺血缺氧后HSP70陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增加,缺血缺氧后2h即可在皮質(zhì)部位觀(guān)察到陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),缺血缺氧后6h-24h明顯,缺血缺氧后48h-72h達(dá)到高峰,隨缺血缺氧時(shí)間的延長(zhǎng),呈逐漸增高趨勢(shì)。缺血缺氧后2h皮質(zhì)部位出現(xiàn)凋亡細(xì)胞,缺血缺氧后6h明顯,凋亡細(xì)胞出現(xiàn)高峰時(shí)間為18h,缺血缺氧后24h逐漸減少,細(xì)胞形態(tài)逐漸以壞死為主,缺血缺氧后48h-72h凋亡細(xì)胞明顯減少,壞死嚴(yán)重。 結(jié)論:HIBD后18h內(nèi),隨著HSP70的少量合成,神經(jīng)細(xì)胞死亡以凋亡為主,此階段神經(jīng)細(xì)胞呈可逆性損傷,提示此階段HSP70的合成對(duì)缺血缺氧神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)作用;HIBD18h后,隨著HSP70大量合成,神經(jīng)細(xì)胞以壞死為主,此階段神經(jīng)細(xì)胞呈不可逆性損傷,提示HSP70的大量合成對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生有害作用。
【圖文】:

對(duì)照組


對(duì)照組(HE×400)

對(duì)照組


對(duì)照組(×400)
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類(lèi)號(hào)】:R722.1

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