【摘要】： 目的 高濃度氧(簡稱高氧)指氧含量高于常壓下空氣的氣體,在新生兒救治中具有重要作用,但因高氧長時(shí)間進(jìn)入肺部后,產(chǎn)生大量活性氧,急性期引起急性肺損傷(ALI),繼而引發(fā)慢性肺損傷而導(dǎo)致另一并發(fā)癥支氣管肺發(fā)育不良(BPD),嚴(yán)重影響患兒生活質(zhì)量。肺臟是氧化應(yīng)激性損傷的重要靶器官,目前新生兒高氧肺損傷的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚,有研究表明,中性粒細(xì)胞(PMN)的迅速激活、各種細(xì)胞因子(CK)的大量釋放和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β_1)的過度表達(dá)等在高氧肺損傷的發(fā)生發(fā)展及其轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮重要的作用。本實(shí)驗(yàn)采用新生大鼠建立高氧肺損傷動(dòng)物模型,檢測p38絲裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)的表達(dá),并給予p38MAPK特異性抑制劑SB203580對新生大鼠高氧肺損傷進(jìn)行干預(yù)治療,檢測SB203580干預(yù)前后新生大鼠高氧肺損傷模型中白細(xì)胞介素-8(IL-8)和TGF-β_1含量的變化,以及肺組織病理學(xué)和肺濕/干重比的改變,來探討p38MAPK在新生大鼠高氧肺損傷中的表達(dá)和意義,及其特異性抑制劑SB203580對新生大鼠高氧肺損傷產(chǎn)生保護(hù)作用的機(jī)制。 方法 160只新生大鼠隨機(jī)分為Ⅰ空氣對照組、Ⅱ高氧組、Ⅲ高氧+SB203580組、Ⅳ高氧+生理鹽水組。將Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組新生大鼠暴露于95% O2,共3 d,同時(shí)Ⅰ組置于正�？諝庵形桂B(yǎng)。Ⅲ組從高氧暴露第1 d開始,給予SB203580 5 mg/kg腹腔注射,1/d,共3 d;Ⅳ組給予生理鹽水5 mg/kg腹腔注射,1/d,共3 d。在12 h、24 h、72 h和1 w四個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死新生大鼠,進(jìn)行肺組織病理學(xué)檢查和肺濕/干重比值(W/D)測定,以Western-blot法檢測p38MAPK表達(dá),以酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測肺組織IL-8和TGF-β_1的含量。 結(jié)果 ①各實(shí)驗(yàn)組12 h、24 h肺組織病理學(xué)檢查均無明顯差異。高氧組及高氧+生理鹽水組高氧暴露72 h時(shí),肺組織光鏡下觀察表現(xiàn)為明顯的急性炎癥和出血,1 w時(shí)肺間隔明顯增寬,組織結(jié)構(gòu)紊亂。高氧+SB203580組72 h光鏡下觀察以急性炎癥反應(yīng)為主,1 w時(shí)光鏡下觀察肺泡內(nèi)炎細(xì)胞基本吸收,肺泡發(fā)育及結(jié)構(gòu)基本正常。②高氧組與空氣對照組相比,肺W/D在12 h和24 h無明顯差異,在72 h和1 w高氧組明顯高于空氣對照組;高氧+生理鹽水組與高氧+SB203580組相比,肺W/D在12 h和24 h無明顯差異,在72 h和1 w高氧+生理鹽水組明顯高于高氧+SB203580組。③新生大鼠暴露于高氧12 h時(shí), p38MAPK開始表達(dá),72 h達(dá)高峰,后逐漸降低。在高氧暴露72 h時(shí),空氣對照組未見p38MAPK表達(dá),高氧組可見p38MAPK表達(dá);高氧+生理鹽水組p38MAPK表達(dá)明顯強(qiáng)于高氧+SB203580組。④在高氧組和高氧+生理鹽水組中,肺組織IL-8和TGF-β_1濃度隨時(shí)間延長呈持續(xù)上升趨勢,在各時(shí)相點(diǎn)均明顯高于空氣對照組和高氧+ SB203580組(P 0.01)。 結(jié)論 ①新生大鼠連續(xù)吸入高氧可導(dǎo)致ALI。②p38MAPK參與了新生大鼠高氧肺損傷的過程。③SB203580能夠通過阻斷p38MAPK表達(dá),進(jìn)而抑制IL-8和TGF-β_1表達(dá)來減輕新生大鼠高氧肺損傷。
【圖文】：

2 h 24 h 72 h 1 wtimehyperxia saline gr圖 1 新生大鼠暴露于高氧后不同時(shí)間肺濕/干重(W/D)比值測定 Lung W/D of new-born rats exposed to hyperoxia at different timern-blot 檢測 p38MAPK 表達(dá)露于高氧 12 h 時(shí)，p38MAPK 開始表達(dá)；隨著時(shí)間的延，72 h 達(dá)高峰，后逐漸降低 (圖 2)。在高氧暴露 72 h 表達(dá)，高氧組可見 p38MAPK 表達(dá)；高氧+生理鹽水組SB203580 組 (圖 3)。12 h 24 h 72 h 1 w

3 不同處理組新生大鼠 72 h 時(shí) p38MAPK 的 Western-blot 檢測情空氣對照組；B:高氧組；C:高氧+SB203580 組；D:高氧+生理鹽水Fig 3 Expression of p38MAPK at time point of 72 h in different grouof new-born rats by Western-blot: air control group; B: hyperxia group; C: hyperxia + SB203580 groD: hyperxia + physiologic saline group)A 法檢測 IL-8 濃度和高氧+生理鹽水組中，，肺組織 IL-8 濃度均隨時(shí)間延長呈，高氧組和高氧+生理鹽水組 IL-8 濃度均高于空氣(P < 0.01)(見表 3，圖 4)。表 3 不同處理組新生大鼠肺 IL-8 含量測定(n=10, pg/ml, x ± s
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R722.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2622837