發(fā)布時間：2020-04-09 20:42

【摘要】： 新生兒缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)是嚴重危害新生兒健康的疾病，可導致新生兒死亡及存活者遺留嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，目前尚缺乏特效治療措施。亞低溫(28℃-35℃輕中度低溫)具有抑制細胞代謝和酶的活性，延緩細胞死亡的作用。近年逐漸被兒科醫(yī)生所重視。本研究用新生大鼠HIBD模型，以腦組織含水量、HE染色、微管關(guān)連蛋白-2(micro-tubule associated protein-2，MAP-2)免疫組化染色作為短期觀測指標，以大鼠的學習、記憶功能作為長期觀測指標，系統(tǒng)研究亞低溫對HIBD的短期和長期保護作用，探討亞低溫治療的最佳時機，深度，持續(xù)時間。 對象：Wistar7日齡新生大鼠，隨機分到各項實驗的各組：(1)探討不同溫度對HIBD的短期影響，包括29℃干預組、31℃干預組、34℃干預組、常溫(37℃)恢復組、正常對照組(假結(jié)扎組)。(2)探討不同低溫持續(xù)時間對HIBD的短期影響，包括24小時、48小時、72小時低溫干預組及常溫(37℃)恢復組、正常對照組 鄭州大學2002年研究生畢業(yè)論文 新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的亞低溫治療 （假結(jié)扎組人 D）探討不同低溫起始時間對iBD的短期影響， 包括HI后0分鐘、30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘、6小時 低溫干預組及常溫u7 C廣恢復組、正常對照組（假結(jié)扎組人 以 上各低溫干預組每組22只動物。正常對照組每組20只動物。低 溫干預組各取2只做探針動物，用以監(jiān)測腦溫。門）探討低溫干 預對HIBD的長期影響，包括＊后立即29℃低溫干預72 ’J＼時組、 常溫門7℃）恢復組、正常對照組（假結(jié)扎組人每組10只動物， 方法：＊）新生大鼠MBD模型制作：新生大鼠乙醚吸入麻醉， 切開頸部皮膚，分離左側(cè)頸總動脈并結(jié)扎，l小時后給予吸入8％ 氧氣加 92％氮氣混合氣體 55分鐘。正常對照組（假結(jié)扎組）僅 切開頸部皮膚，分離左側(cè)頸總動脈，不結(jié)扎亦不缺氧。u）亞低 溫方法：將動物放入半導體可調(diào)恒溫水浴箱內(nèi)，維持至干預結(jié)束。 3）腦組織含水量測定：各組動物均于缺氧缺血后78小時處死， 快速取腦，除去嗅腦、小腦和腦干，分離左右側(cè)大腦半球，用電 子天平精確稱量，然后烘干再稱重，用公式【（濕重－干重）／濕 重〕XI 00％計算腦組織含水量。N）病理學檢測：各組動物于缺 氧缺血后78小時處死，快速取腦，5％甲醛溶液中固定后，，于前 聯(lián)合及正中隆起平面作冠狀切開，取中間部分常規(guī)脫水，石蠟包 埋。切片取AI．6mm平面，連續(xù)冠狀切片6張，分作HE染色 2 鄭州大學2002年研究生畢業(yè)論文 新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的亞低溫治療 和 MAP上免疫組織化學染色。染色結(jié)果經(jīng)圖象分析系統(tǒng)處理， 計算出腦梗塞的面積，然后根據(jù)公式：（損傷側(cè)MAPZ染色陰性 區(qū)域面積／對側(cè)面積）XI 00％計算腦損傷程度u）學習、記憶能 力指標測定：各組動物于生后42天用Y型三等份輻式迷宮器檢 測其學習能力，第H天用同樣方法檢測其記憶能力�！埃┙y(tǒng)計學 分析：應用 SPSS 10．0統(tǒng)計分析軟件，結(jié)扎側(cè)與結(jié)扎對側(cè)比較 采用配對t檢驗，多組均數(shù)比較用單因素方差分析…ne－way ANOVA＞組間兩兩比較用q檢驗，對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。數(shù) 據(jù)均以巨士SD表示，以P刃．05為差異有顯著性。 結(jié)果：門）HE染色：常溫恢復組鏡下可見到各種病理學改變， 包括神經(jīng)細胞的變性壞死等。而低溫干預各組上述改變較輕。＊） 常溫恢復組結(jié)扎側(cè)腦組織含水量明顯增加，與結(jié)扎對側(cè)及正常對照 組相比差異有顯著性0狽．05人而低溫干預各組腦組織含水量明 顯減少，與常溫恢復組相比差異有顯著性p刃．05人（）常溫恢 復組結(jié)扎側(cè)可見腦梗塞存在，而低溫干預各組腦梗塞面積明顯減少 oo．05人K）不同溫度低溫干預對 HIBD大鼠的影響：29 oC低 溫干預組與3lOC、34oC低溫干預組相比，腦組織含水量減少，差 異有顯著性o狽．05人 31、34oC低溫干預組相比，腦組織含水 量差異無顯著性。不同溫度低溫干預各組腦梗塞面積相比，差異 3 鄭州大學2002年研究生畢業(yè)論文 新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的亞低溫治療 均有顯著性o川．05），且隨著溫度的降低，梗塞面積逐漸減少。 u）不同持續(xù)時間低溫干預對WBD大鼠的影響：72小時低溫 干預組與24小時與4S小時低溫干預組相比，腦組織含水量減少， 差異有顯著性o的．05）；24小時、48小時低溫干預組相比，腦 組織含水量差異無顯著性。低溫干預各組腦梗塞面積相比差異均 有顯著性oO．05人 且隨著低溫于預持續(xù)時間的延長，梗塞面積 逐漸減少。u）不同起始時間低溫干預對HIBD大鼠的影響：0分 韋、30分鐘起始干預組與其余各低溫干預組（60分鐘、90分鐘、 120分鐘、6小時起始低溫干預組）相比，腦組織含水量減少，差 異有顯著性0刃．05人 但這兩組間差異無顯著性，其余各
【圖文】：

圖1不同溫度干預對HIBD大鼠的影響:(1)29℃低溫干預組、(2)31℃低溫干預組、(3)34℃低溫干預組(4)常溫恢復組(5)正常對照組不同持續(xù)時間低溫干預對HIBD大鼠的影響;(6)24小時低溫干預組、(7)48小時低溫干預組、(8)72小時低溫干預組(9)常溫恢復組(10)正常對照組不同起始時間低溫干預對HIBD大鼠的影響:(11)H工BD后立即低溫干預組、(12)HIBD后30分鐘低溫干預組、(13)HIBD后60分鐘低溫干預組(14)HIBD后90分鐘低溫干預組(15)HIBD后120分鐘低溫干預組(16)HIBD后6小時低溫干預組、(17)常溫恢復組(18)正常對照組MAP一2免疫組化染色，掃描儀直接掃描切片所得圖像

正常對照組，冠狀切片AI.6mm平面，皮質(zhì)，MAP一2免疫組化染色4OOX
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2002
【分類號】：R722.121

【參考文獻】

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1 吳婉芳;徐放生;張莉莉;蔡玲玲;林久治;;建立新生兒缺氧缺血性腦病動物模型[J];新生兒科雜志;1992年06期

本文編號：2621239