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應(yīng)用細(xì)菌溶解物干預(yù)毛細(xì)支氣管炎對(duì)嬰幼兒哮喘的影響及免疫機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2019-10-16 18:02
【摘要】:研究目的: 1.探討嬰幼兒毛細(xì)支氣管炎向支氣管哮喘發(fā)病的高危因素; 2.探討應(yīng)用細(xì)菌溶解物(泛福舒OM-85BV)早期免疫干預(yù)防治毛細(xì)支氣管炎后對(duì)哮喘發(fā)病率的影響; 3.探討應(yīng)用OM-85BV后對(duì)炎性細(xì)胞因子:IL-4、IFN-γ、IL-10及IL-17,其相應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子:GATA-3、T-bet、FoxP3及ROR γ tmRNA表達(dá),及對(duì)Th1/Th2、Treg/Th17平衡的影響; 4.探討分析比較兩組患兒及治療前后α7nAChR,IL-17的表達(dá)變化情況,探討非神經(jīng)膽堿能系統(tǒng)在毛細(xì)支氣管炎疾病的表達(dá)及對(duì)OM-85BV治療的反應(yīng)。 研究方法: 密切結(jié)合臨床,選擇門診或者住院的毛細(xì)支氣管炎患兒,分為治療組及對(duì)照組,在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上,治療組患兒予以口服OM-85BV每天一次,連續(xù)10天,停20天,連續(xù)三個(gè)月。進(jìn)行長(zhǎng)期隨訪,分析比較兩組小兒口服OM-85BV后12月內(nèi)上呼吸道感染次數(shù),下呼吸道感染次數(shù),喘息發(fā)作次數(shù),每次發(fā)作天數(shù)及總天數(shù),應(yīng)用抗生素天數(shù)的變化,并比較兩組支氣管哮喘的發(fā)病率。分析上呼吸道感染次數(shù),下呼吸道感染次數(shù)與支氣管哮喘的發(fā)病率的相互關(guān)系。分別取治療組及對(duì)照組患兒各30例,并選取正常健康查體兒童20名作為健康對(duì)照組,Elisa方法比較毛細(xì)支氣管炎與健康兒童的細(xì)胞因子子IL-4、IFN-γ、 IL-10、IL-17的變化,比較觀察治療組及對(duì)照組治療前后細(xì)胞因子IL-4、IFN-γ、IL-10、IL-17的變化,RT-PCR方法比較兩組患兒核轉(zhuǎn)錄因子GATA-3、T-bet、FoxP3及RORγt mRNA的表達(dá)變化。流式分析方法比較治療組及對(duì)照組兩組患兒α7nAChR、Th17的表達(dá)變化,Western Blot方法比較治療組及對(duì)照組兩組患兒α7nAChR的表達(dá)變化。 結(jié)果: 1.反復(fù)呼吸道感染是毛細(xì)支氣管炎向支氣管哮喘發(fā)病的高危因素; 2.治療組上呼吸道感染次數(shù)為3.5±2.9次,對(duì)照組上呼吸道感染次數(shù)為5.8±3.6次,t值5.07,p0.05;治療組下呼吸道感染次數(shù)為1.9±2.3次,對(duì)照組下呼吸道感染次數(shù)為3.3±2.8次,t值3.93,p0.05;治療組喘息發(fā)作的次數(shù),每次喘息天數(shù)及總天數(shù)分別是2.1±1.2次、3.8±2.6天、10.3±3.4天,對(duì)照組喘息發(fā)作的次數(shù),每次喘息天數(shù)及總天數(shù)分別是4.3±2.1次、5.5±2.1天、16.1±4.1天;t值分別6.33、5.12、11.1,p值均0.05,治療組哮喘的確診人數(shù)為23人發(fā)病率為21.2%,對(duì)照組哮喘確診人數(shù)為33人,發(fā)病率為33.6%,有顯著性差異;多元線性回歸分析顯示,OM-85BV治療組和對(duì)照組的主要區(qū)別是呼吸道感染機(jī)率的降低; 3.Elisa分析比較毛細(xì)支氣管炎組及健康險(xiǎn)組小兒I L-4、I FN-γ、IL-10、IL-17的變化情況,比較治療前后治療組及對(duì)照組,治療組治療前后IL-4、IFN-γ、IL-10、IL-17表達(dá)的差異性。結(jié)果顯示,毛細(xì)支氣管炎較正常健康對(duì)照組小兒比較,IFN-γ表達(dá)降低、IL-17水平增高,差異有顯著性,OM-85BV治療后治療組較對(duì)照組及治療前比較,IFN-γ水平增高,IL-17水平降低,差異有顯著性,IL-4、IL-10變化無(wú)顯著性差異。RT-PCR方法,結(jié)果顯示比較普通毛細(xì)支氣管炎小兒及正常健康照組小兒表達(dá)T-bet降低、ROR γ t增高,差異有顯著性,GATA-3和FoxP3水平無(wú)顯著性差異。OM-85BV治療后治療組及對(duì)照組,治療前比較,T-bet表達(dá)增高,RORγt降低,有顯著性差異,GATA-3,和FoxP3mRNA表達(dá)無(wú)顯著性差異。 4.毛細(xì)支氣管炎患兒存在α7nAChR、IL-17表達(dá)增加,應(yīng)用OM-85BV治療組患兒較對(duì)照組α7nAChR、IL-17表達(dá)降低,炎癥反應(yīng)減弱。 結(jié)論及意義: 1.反復(fù)呼吸道感染是嬰幼兒毛細(xì)支氣管炎喘息發(fā)作的重要因素,是毛細(xì)支氣管炎患兒向哮喘轉(zhuǎn)化的高危因素; 2.應(yīng)用OM.85BV能夠減少呼吸道感染次數(shù),減少喘息發(fā)生的頻次及天數(shù),減少抗生素應(yīng)用天數(shù),減少毛細(xì)支氣管炎向哮喘的發(fā)病率; 3.毛細(xì)支氣管炎患兒存在Thl/Th2失衡,Treg/Th17平衡失調(diào),這種失衡主要表現(xiàn)為IFN-γ表達(dá)降低、IL-17表達(dá)增高,IL-4、IL-10表達(dá)變化不顯著,反應(yīng)毛細(xì)支氣管炎主要是炎癥性反應(yīng)有關(guān),而與典型哮喘患兒不同,IL-4的表達(dá)增高不顯著,IL-10的降低不顯著,部分應(yīng)用OM-85BV能夠調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡,同時(shí)調(diào)節(jié)Treg/Th17平衡; 4.應(yīng)用OM-85BV能夠降低α7nAChR,Th17的表達(dá),調(diào)節(jié)細(xì)胞炎癥因子的下調(diào)表達(dá)。通過(guò)α7nAChR影響Th1/Th2平衡,調(diào)節(jié)Treg/Th17平衡影響哮喘的發(fā)生。a7nAChR是神經(jīng)與免疫存在交聯(lián)的證據(jù)。
【圖文】:

毛細(xì)支氣管炎,外周血,患兒


Thl7+/a7 +圖2應(yīng)WJ OM-85 BV治療后毛細(xì)支氣管炎患兒外周血CD^TT淋巴細(xì)胞的a 7nAChR 丨-J Thl7 的表達(dá)變化(*p<0.05; **p<0.01)Fig.2 Expression of alpha 7nAChR and Th 1 7 CD4 T in peripheral bloodlymphocytes of bronchiolitis after oral bacterial lysate(*p<0.05 ; * *p<0.01 )65
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R725.6

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本文編號(hào):2550099

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