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川崎病Th17、Treg細(xì)胞異常機(jī)制的初探

發(fā)布時(shí)間:2019-10-16 10:37
【摘要】:目的:研究川崎病(Kawasaki disease,KD)患兒Th17、Treg細(xì)胞異常機(jī)制。方法:KD患兒急性期42例,正常同年齡對(duì)照組32例,KD患兒分別于IVIG治療前、后直接取血備檢。1.采用免疫共沉淀-熒光定量PCR及印跡法檢測外周血CD4細(xì)胞IL-17基因H3K4me3、H3K27me3修飾水平和IL-17基因組蛋白H3乙酰化、Foxp3蛋白泛素化水平;2.流式細(xì)胞術(shù)檢測CD4+IL-17+細(xì)胞/輔助性T細(xì)胞17(Th17)、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)比例及Foxp3、IL-10、IL-17、HIF-1α、p STAT3蛋白表達(dá)水平;3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測CD4+T細(xì)胞IL-17、IL-6Rα、gp130、IL-23R、IL-23Rβ1、ETV5、SOCS1、SOCS3、TLR4、My D88/TRIF、TNFR1、RIP1、RORγt、p300 m RNA及mi R155表達(dá);4.血漿中用ELISA檢測TNF-α、IL-1β、IL-23、IL-21、IL-6濃度。結(jié)果:1.KD患兒急性期Th17細(xì)胞比例、IL-17蛋白表達(dá)及H3K4me3水平顯著增高、H3K27me3水平明顯降低(P0.05),且H3K4me3/H3K27me3比值與IL-17m RNA水平呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.69,P0.05),其中KD合并冠狀動(dòng)脈損傷組(KD-CAL+)Th17細(xì)胞比例、IL-17表達(dá)及H3K4me3水平均高于無冠狀動(dòng)脈損傷組(KD-CAL-)、H3K27me3水平則低于后者(P0.05),Treg細(xì)胞比例及轉(zhuǎn)錄因子Foxp3、IL-10表達(dá)明顯降低,Th17/Treg細(xì)胞比值遠(yuǎn)高于對(duì)照組(P0.05),經(jīng)IVIG治療后均明顯恢復(fù)(P0.05);2.KD患兒急性期CD4+T細(xì)胞p STAT3、ETV5、mi R155表達(dá)均顯著上調(diào)(P0.05),p STAT3負(fù)性調(diào)節(jié)因子SOCS1、SOCS3表達(dá)明顯降低(P0.05),其中KD-CAL+組前三項(xiàng)表達(dá)均高于KD-CAL-組(P0.05),而后二項(xiàng)表達(dá)則明顯低于后者(P0.05),IVIG治療后都有不同程度恢復(fù)(P0.05);3.KD患兒急性期血漿IL-1β、IL-6、IL-21、IL-23、TNF-α濃度及CD4+T細(xì)胞p STAT3、TLR4/My D88/TRIF、IL-6Rα/gp130、IL-23R/IL-23Rβ1、TNFR1/RIP1表達(dá)均顯著上調(diào)(P0.05),其中KD-CAL+組前述多項(xiàng)均高于KD-CAL-組(P0.05),經(jīng)IVIG治療后均明顯降低(P0.05);4.KD患兒急性期CD4+T細(xì)胞IL-17基因組蛋白H3乙;郊癋oxp3蛋白泛素化水平顯著上升(P0.05),HIF-1α、RORγt及p300表達(dá)對(duì)于同年齡對(duì)照組也明顯增高(P0.05),IVIG治療后可見下降(P0.05)。其中,HIF-1α表達(dá)與IL-17基因組蛋白H3乙酰化水平、Foxp3蛋白泛素化水平呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.65,0.52;P0.05);結(jié)論:IL-17基因組蛋白甲基化修飾異常改變可能與急性期KD患兒免疫功能紊亂有關(guān),而HIF-1α信號(hào)異;罨赡苁菍(dǎo)致急性期KD患兒Th17/Treg細(xì)胞失衡的重要因素之一。
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R725.4

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本文編號(hào):2549943

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