【摘要】：帕金森病(Parkinson's disease, PD)是中老年人常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,臨床治療方法主要有藥物治療、外科治療和細胞移植等。神經(jīng)干細胞(Neural stem cells, NSCs)能夠分化成PD所缺少的多巴胺能神經(jīng)元,因此為細胞移植治療PD帶來了新的希望,但是目前仍然存在很多問題,如NSCs供應(yīng)不足、移植后存活率低、分化為多巴胺能神經(jīng)元的比例低等。 本文首先通過CCK-8試劑盒檢測了體外單層貼壁培養(yǎng)的NSCs的生存力和生長曲線,考察了中藥活性單體原兒茶酸(Protocatechuic acid, PCA)對NSCs增殖及自發(fā)性凋亡的影響；利用免疫細胞化學(xué)技術(shù)和流式細胞儀技術(shù)檢測了酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)和核受體相關(guān)因子1(nuclear receptor-related factor1, Nurr1)陽性細胞的數(shù)量,通過蛋白質(zhì)印跡法及RT-PCR的方法檢測了TH蛋白及TH基因的表達,從而分別從細胞水平、蛋白質(zhì)水平和基因水平上研究了PCA對NSCs分化為多巴胺能神經(jīng)元的影響,并進一步探討了PCA調(diào)節(jié)NSCs分化的作用機制。 結(jié)果顯示,PCA能夠依賴時間和劑量提高單層貼壁培養(yǎng)的NSCs生存力并促進NSCs的增殖；在PCA (0.06mM)作用下培養(yǎng)4d后,細胞的存活率提高至對照的142.5%±9.5%并有效地抑制了細胞的自發(fā)性凋亡。PCA單獨使用不能誘導(dǎo)神經(jīng)干/祖細胞的分化,但與1%胎牛血清的聯(lián)合應(yīng)用時,PCA有效地提高分化為多巴胺能神經(jīng)元的比例。TH蛋白及TH基因的表達量分別提高至對照的180.67%和128.2%,同時Nurr1陽性細胞的數(shù)量也提高至FBS組的125%,提示在胎牛血清協(xié)同作用下,PCA的促分化作用可能與Nurr1通路密切相關(guān)。另外PCA也明顯提高了分化顯型的生存力且抑制了細胞凋亡,同時激活了細胞內(nèi)源性的抗氧化酶系統(tǒng)。 綜上所述,PCA能夠有效地促進單層貼壁培養(yǎng)的NSCs增殖并抑制細胞凋亡；在1%胎牛血清協(xié)同作用下,PCA可有效促進NSCs分化為多巴胺能神經(jīng)元的比例并提高細胞分化顯型的生存力。
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R742.5

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 趙樹敏;常嵐;;高效液相色譜法測定蒙藥羊骨酒中原兒茶酸的含量[J];中國民族醫(yī)藥雜志;2010年05期

2 陶青青;范曉蘭;樂衛(wèi)東;;中腦腹側(cè)多巴胺能神經(jīng)元對氧化應(yīng)激反應(yīng)的性別差異[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年06期

3 羅銳;何智建;;不同產(chǎn)地狗脊中原兒茶酸和原兒茶醛的含量測定[J];臨床醫(yī)學(xué)工程;2011年07期

4 程民;;高效液相色譜法測定十五味龍膽花丸中原兒茶酸含量[J];中國藥業(yè);2011年16期

5 吳文華;張曉雷;韓鳳梅;;原兒茶酸與拉米夫定體外聯(lián)合抗HBV藥效學(xué)研究[J];湖北大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2011年02期

6 杜鑫瑞;辛濤;滕良珠;邴國英;龐琦;;1-三氯甲基-l,2,3,4-四氫化-β-咔啉(TaClo)介導(dǎo)的體外培養(yǎng)多巴胺能神經(jīng)元凋亡及其機制[J];山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年08期

7 謝艷;羅銳;何智建;;狗脊炮制工藝的研究[J];臨床醫(yī)學(xué)工程;2011年07期

8 董寧;;中藥顫復(fù)寧對帕金森病的治療作用研究[J];醫(yī)學(xué)信息(中旬刊);2011年08期

9 劉布鳴;董曉敏;黃艷;林霄;盧文杰;牙啟康;;互葉白千層的化學(xué)成分研究[J];中草藥;2011年07期

10 戚秀杰;王順;;頭部電針透穴對帕金森病模型大鼠黑質(zhì)神經(jīng)生長因子表達的影響[J];中國針灸;2011年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 趙永波;吳云成;;Nurr1 shRNA表達載體的構(gòu)建及其對多巴胺能細胞內(nèi)源基因的干擾作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 李寶園;豐玲;王雁春;郭敏芳;馬存根;;睪丸支持細胞誘導(dǎo)大鼠神經(jīng)干細胞向多巴胺能神經(jīng)元分化作用研究[A];2008年神經(jīng)內(nèi)分泌暨神經(jīng)免疫內(nèi)分泌學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2008年

3 王國權(quán);趙忠新;趙瑛;;褪黑素對多巴胺能神經(jīng)元的保護作用[A];第三屆全國睡眠學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

4 劉妍;馬麗香;高璐;張素春;;胚胎干細胞向中腦多巴胺神經(jīng)元定向分化的調(diào)控及分子機理[A];2007年中國解剖學(xué)會第十屆全國組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2007年

5 徐評議;楊海華;劉焯霖;;骨髓間充質(zhì)干細胞移植入帕金森大鼠模型的紋狀體后分化為多巴胺分泌細胞[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

6 張振濤;曹學(xué)兵;孫圣剛;王嵐;喬嫻;劉紅進;;蛋白酶體抑制劑誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)元重啟細胞周期的作用及機制[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

7 徐評議;楊海華;劉焯霖;;靈孢多糖對脂多糖誘導(dǎo)的原代多巴胺能神經(jīng)元變性的保護作用[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

8 鮑秀琦;孫華;張丹;;FLZ通過激活A(yù)kt/mTOR信號通路和提高RTP801表達保護多巴胺能神經(jīng)元[A];全國第十二屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

9 趙慧英;溫葉飛;曹洪國;華松;尹寶英;張涌;;胎鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)干細胞的分離培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化[A];全國首屆動物生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

10 Gordon C Jayson;Saifee Mullamitha;Chan Ton;Juan Valle;Lynn Hope;Alan Jackson;Geoff Parker;Caleb Roberts;Peter Julyan;Mihaela. C. Munteanu;Hugh.M. Davis;Jeffrey Nemeth;Uma Prabhakar;Robert.A. Beckman;;Phase Ⅰ Study Of CNTO 95,A Fully Human Monoclonal Antibody (Mab) To αv Integrins,In Patients With Solid Tumors[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議教育集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 張 力;帕金森病神經(jīng)干細胞移植治療進展[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

2 徐述湘;集思廣益 謹慎前行[N];中國醫(yī)藥報;2004年

3 蔣清濤 裴寧;果蔬中的抗癌成員[N];健康報;2003年

4 張昀;教您認識帕金森病[N];健康報;2003年

5 劉紅 李連達;干細胞移植——帕金森病遭遇終結(jié)者？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

6 錢毅;中醫(yī)治療“帕金森”創(chuàng)新法[N];健康報;2000年

7 霍祥宇;魯南制藥探索肉桂揮發(fā)油提取工藝[N];中國醫(yī)藥報;2005年

8 記者 李麗云;世界首臺帕金森治療儀在哈研制成功[N];科技日報;2011年

9 蔣清濤;果蔬家族中的抗癌成員[N];大眾衛(wèi)生報;2004年

10 錢毅;培補肝腎可提高腦內(nèi)多巴胺含量[N];中國中醫(yī)藥報;2000年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 戚秀杰;頭部電針透穴療法對帕金森病大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元保護作用研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2008年

2 王晶;人類胚胎干細胞誘導(dǎo)分化為多巴胺能神經(jīng)元的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2008年

3 劉靖;Sertoli細胞促進大鼠胚胎中腦神經(jīng)前體細胞分化的作用及其對Sertoli細胞DHH基因的相關(guān)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

4 王偉文;多巴胺-DARPP32信號在前腦神經(jīng)元興奮性毒性及癲癇發(fā)作中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 潘遠志;平肝熄風(fēng)活血益腎法治療帕金森病的作用及相關(guān)機制研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2007年

6 姚偉;大鼠紋狀體多巴胺分泌的電化學(xué)記錄技術(shù)及其在體（in vivo）研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2007年

7 辛濤;一.大鼠皮層神經(jīng)元機械性損傷模型中p75NTR、Bax、Bcl-2和Caspase-3表達及細胞凋亡的研究 二.1-三氯甲基-1，2，，3，4-四氫化-β-咔啉（TaClo）對多巴胺能神經(jīng)元的毒性作用及機制研究[D];山東大學(xué);2008年

8 申旭霽;原兒茶酸冰片酯的設(shè)計、合成及代謝研究[D];西北大學(xué);2012年

9 何秀全;羅格列酮通過抑制小膠質(zhì)細胞活化而保護多巴胺能神經(jīng)元的研究[D];山東大學(xué);2012年

10 鐘善傳;α-SYN和EN1在小鼠的發(fā)育學(xué)表達及其在PD模型中作用的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李海華;原兒茶酸對體外神經(jīng)干細胞增殖和分化的影響[D];大連理工大學(xué);2012年

2 刁歡;多不飽和脂肪酸對LPS誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元損傷的作用及機理研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 陳安琪;α-synuclein與Ⅱ型囊泡單胺轉(zhuǎn)移體作用關(guān)系的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

4 張維雄;移植AII誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞分化的多巴胺能神經(jīng)元對PD大鼠治療效果的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

5 羅彥妮;外源性血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞向多巴胺能神經(jīng)元分化的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

6 劉彩霞;蛋白酶體抑制劑lactacystin誘導(dǎo)帕金森病動物模型的實驗性研究[D];吉林大學(xué);2007年

7 李猛;實驗性腦積水腦室周圍組織病理學(xué)改變及多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量變化的研究[D];山東大學(xué);2005年

8 杜迎春;非甾體抗炎藥與神經(jīng)營養(yǎng)因子聯(lián)合防護多巴胺能神經(jīng)元損傷實驗研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

9 欒卓;鐵離子螯合劑去鐵胺對大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元保護作用機制的研究[D];青島大學(xué);2005年

10 李春麗;尼古丁對帕金森病大鼠多巴胺能神經(jīng)元變性的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

本文編號：2542920