【摘要】：目的：探討丹參注射液對新生鼠腎積水病腎的損害有否保護作用,以便為臨床更好地治療先天性腎積水患兒,提供可靠的實驗與理論依據(jù)。 方法：1、動物模型的建立選用生后48h內(nèi)的wistar鼠120只,隨機分為5組,每組24只。隨機選擇1組行假手術,術后第3周開始以2.0m1·kg-1·d-1生理鹽水腹腔注射,建立對照組；余4組隨機分為模型組、低劑量丹參組(干預1組)、中劑量丹參組(干預2組)和高劑量丹參組(干預3組)。實驗組均采用腰大肌壓迫左側上段輸尿管,制作左側輸尿管不全梗阻實驗模型,模型組、干預1組、干預2組、干預3組術后第3周開始分別以2.0m1·kg-1·d-1的生理鹽水、混合液1(丹參注射液與生理鹽水之比為1：3)、混合液2(丹參注射液與生理鹽水之比為1：1)、丹參注射液進行腹腔注射；各組動物再隨機分為三個亞組,分別在飼養(yǎng)5周、7周和10周時每組動物隨機選取1個亞組處死,切取腎組織和收集尿液標本待檢。 2、各種指標的檢測(1)、采集各組不同時期(不全梗阻模型建立干預5周、7周和10周)的病腎組織標本,進行HE染色光鏡檢查,以及應用透射電鏡技術觀察其超微結構的變化；(2)、采集不同時期的病腎組織,通過免疫組織化學PV法檢測轉化生長因子-β1(TGF-β1)的表達,應用Image-ProPlus圖像分析軟件測量平均光密度值；通過RT-PCR技術檢測病腎組織內(nèi)TGF-β1mRNA水平的變化；(3)、收集各組不同時期的病腎腎盂尿,應用ELISA法檢測尿TGF-β1的水平。 結果：1、動物模型建立期間,動物的存活情況：新生鼠共120只,建立腎積水梗阻模型及喂養(yǎng)期間死亡7只(麻醉致死1只、術中死亡4只、喂養(yǎng)期間死亡2只),存活113只(94.17%)。 2、病腎組織形態(tài)學的變化： (1)、肉眼觀及光鏡下病腎組織結構的變化：對照組不同喂養(yǎng)時期,肉眼觀雙腎大小、形態(tài)一致,雙腎腎小球、腎小管發(fā)育正常,腎小球飽滿,腎小囊未見擴張；模型組隨喂養(yǎng)時期的延長,病腎較健腎逐漸增大,腎盂擴張、積水,病腎腎小球結構形態(tài)異常,腎小球鮑曼氏囊擴張,腎小管擴張。同一干預組隨喂養(yǎng)時間的延長,肉眼觀病腎仍大于健腎,鏡下腎小球、腎小管的損害隨時間延長呈加重趨勢,但病理分級明顯低于模型組(P0.05)；但在同一喂養(yǎng)時間點,干預組隨丹參劑量的增大,病腎組織結構的損害逐漸減輕。 (2)、透射電鏡下觀察病腎組織的超微結構：對照組腎小球上皮細胞形態(tài)、結構正常,腎小管上皮細胞內(nèi)線粒體嵴清晰可見；模型組見腎小球上皮細胞形態(tài)、結構異常,足突倒伏并呈節(jié)段性融合,近曲小管線粒體腫脹、空泡化,腎小管管腔內(nèi)可見大量的細胞碎片；干預組病腎超微結構均有不同程度的改變,隨喂養(yǎng)時間的延長損害逐漸加重,但均較模型組輕,同一喂養(yǎng)時間點隨丹參劑量的增大腎小球上皮細胞形態(tài)結構損害減輕。 3、各組病腎組織內(nèi)TGF-β1(?)勺表達 對照組腎組織內(nèi)TGF-β1(?)(?)表達,模型組病腎組織內(nèi)TGF-β1在腎小管高表達,TGF-β1mRNA表達也升高。干預各組病腎組織內(nèi)TGF-β1均有不同程度的表達,且同一干預組隨喂養(yǎng)時間的延長TGF-β1(?)勺表達量雖逐漸升高,但仍明顯低于模型組；病腎組織內(nèi)TGF-β1在同一干預組不同喂養(yǎng)時間點(喂養(yǎng)5周、7周、10周)間比較,低劑量丹參組內(nèi)差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),中劑量組和高劑量組在5周、7周間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；同一喂養(yǎng)時間點隨丹參劑量的增大,TGF-β1的表達量呈逐漸降低趨勢,但高于對照組。對照組、模型組與各干預組間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一喂養(yǎng)時間點不同劑量月參組(低、中、高劑量)間比較,在梗阻建立5周時,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),余各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 4、各組病腎腎盂尿內(nèi)TGF-β1水平的變化 對照組尿液中TGF-β1含量低,模型組病腎尿液中TGF-β1含量高,干預各組病腎腎盂內(nèi)尿液(腎盂尿)TGF-β1-含量位于對照組與模型組之間。對照組、模型組病腎尿液中TGF-β1水平與各干預組間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一干預組尿TGF-β1不同喂養(yǎng)時間點(5周、7周、10周)間比較,低劑量、中劑量丹參組內(nèi)差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),高劑量組在5周、7周間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),余各時間點間比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一飼養(yǎng)時間點,干預各組尿液中TGF-β1水平,在梗阻建立5周時組間比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),梗阻建立7周、10周時尿TGF-β1水平組間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論：1、丹參注射液可阻止或減低新生鼠腎積水病腎的損害,具有保護效應。 2、通過檢測新生鼠腎積水病腎組織及病腎尿液中TGF-β1的水平表明：丹參注射液對新生鼠腎積水病腎損害的保護呈時間-量效依賴關系。推測臨床上應用丹參注射液可能對小兒腎積水的病腎損害也有保護作用。
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【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R726.9;R285.5

【參考文獻】

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1 林國安;積水性腎萎縮[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;1996年03期

2 何秋明;肖尚杰;夏慧敏;;大鼠陰道涂片的觀察[J];廣州醫(yī)學院學報;2007年04期

3 梁國標 ,沈寅初 ,閻勇 ,羅旭 ,高振宇;丹參對兔缺血再灌注腎組織一氧化氮及其合成酶的影響[J];貴州醫(yī)藥;2002年02期

4 黑明燕,殷萍,曠壽金;丹參酮Ⅱa對缺氧缺血新生大鼠腦細胞內(nèi)游離鈣的影響[J];醫(yī)學臨床研究;2004年08期

5 耿健;;丹參粉針對2型糖尿病早期腎損害預防保護作用的臨床研究[J];中醫(yī)學報;2011年12期

6 袁淑蘭,王艷萍,陳曉禾,宋毅,楊燕;丹參酮ⅡA誘導人鼻咽癌細胞凋亡及其作用機制的體外實驗研究[J];華西醫(yī)科大學學報;2002年01期

7 朱微;張苗;顧勇;;氯沙坦對糖尿病腎病患者尿中轉化生長因子β_1的影響[J];臨床內(nèi)科雜志;2008年03期

8 楊朝暉,甘華;轉化生長因子-β與器官纖維化[J];中國全科醫(yī)學;2004年14期

9 趙愛青;馬存根;趙森;;丹參注射液對單側輸尿管梗阻大鼠腎臟的保護[J];山西醫(yī)藥雜志;2007年09期

10 周娟;王守濤;何曉靜;肇麗梅;;丹參酮ⅡA靜脈乳劑對大鼠血液流變學及血栓形成的影響[J];沈陽藥科大學學報;2008年02期

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本文編號：2412728