【摘要】：目的:研究表明,差異表達(dá)的miRNAs可以參與白血病的發(fā)生�；谏镄畔W(xué)技術(shù)預(yù)測結(jié)果,我們檢測了幾種與兒童急性髓性白血病發(fā)生密切相關(guān)的miRNAs的表達(dá)情況,分析其在兒童AML診斷和預(yù)后中的意義,并探討其功能。方法:我們前期使用生物信息學(xué)分析技術(shù),篩選了與初診兒童急性髓性白血病最為密切相關(guān)的三種miRNAs;隨后,我們隨機(jī)抽取了83例初診AML患兒骨髓標(biāo)本,并以29例非惡性病兒童正常骨髓作為對照,利用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)方法檢測這三種miRNAs的表達(dá)情況(以2-△△Ct表示),并結(jié)合臨床資料分析其意義;最后,進(jìn)一步探討其在細(xì)胞功能方面的影響以及可能的作用機(jī)制。結(jié)果:1.前期生物信息學(xué)預(yù)測結(jié)果:三種mi RNAs(miR-196b,miR-155,miR-25)與兒童AML發(fā)生密切相關(guān);IGFBP7基因是miR-196b的一個預(yù)測靶基因。基于改良POMA軟件的生物信息學(xué)分析顯示,與初診兒童AML診斷最為密切相關(guān)的三種mi RNAs是miR-196b,miR-155和miR-25(Wilcoxon test,p0.05;NOD=30,28和32,TFP=0.289,0.242和0.191).2.臨床標(biāo)本驗(yàn)證結(jié)果:miR-155在初診AML患兒組顯著高于對照組(p0.0001);mi R-196b在單核細(xì)胞系A(chǔ)ML(M4/5組)顯著高于對照組(p=0.032)和非單核細(xì)胞系A(chǔ)ML(非M4/5組)(p0.0001)。3.三種miRNAs對預(yù)后的影響:高水平的miR-196b,miR-155均與不良預(yù)后(整體生存率OS)相關(guān)(Log Rank p0.0001,=0.011);mi R-25與AML患兒預(yù)后未發(fā)現(xiàn)明顯相關(guān)性(Log Rank p0.05)。綜合WHO 2008推薦方法和NCCN 2015AML指南進(jìn)行預(yù)后分組:miR-196b,miR-155在預(yù)后良好組表達(dá)最低(p0.001,p=0.0002);在誘導(dǎo)緩解一療程評估中:miR-196b在未緩解組表達(dá)高于緩解組(p=0.018),miR-155,miR-25未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);在不同突變類型間:miR-196b以FLT3-ITD組最高(p=0.037),miR-155,miR-25的表達(dá)水平以C-Kit組最高(p=0.004,0.047);在不同染色體核型間亦有明顯差異:miR-196b表達(dá)水平以t(8;21)組最低(p=0.0002),11q23(MLL)組最高(p=0.0002),miR-155表達(dá)水平以t(15;17)組最低(p=0.0004)。4.與其它臨床資料的相關(guān)性:在白細(xì)胞(WBC)分組和年齡分組比較中發(fā)現(xiàn),miR-196b表達(dá)水平均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,WBC≥100?109/L組和年齡≤12月齡組均明顯高表達(dá)(p=0.004,0.029),且miR-196b表達(dá)水平與初診血小板計(jì)數(shù)呈顯著正相關(guān)(Spearman’s r=0.31,p=0.004),而miR-155和miR-25表達(dá)水平在三者中均未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。5.miR-196b候選靶基因IGFBP7在初診兒童AML臨床樣本中的表達(dá)水平顯著高于對照組(p0.0001),Kaplan-Meier生存分析結(jié)果提示,初診時(shí)IGFBP7表達(dá)高的AML患兒預(yù)后較好,整體生存率高于低表達(dá)者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.045)。6.miR-196b對白血病細(xì)胞株MV4-11細(xì)胞具有促進(jìn)增殖、抑制VP16誘導(dǎo)的凋亡的作用,此外,還對維甲酸誘導(dǎo)的NB4細(xì)胞分化具有抑制功能。7.通過脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞上調(diào)/下調(diào)miR-196b表達(dá)后,我們發(fā)現(xiàn),IGFBP7基因與miR-196b之間存在負(fù)調(diào)控關(guān)系。結(jié)論:1.初診兒童AML中mi R-155,miR-196b較對照組差異高表達(dá),且與預(yù)后相關(guān),有望成為輔助兒童AML的診斷和預(yù)后判斷的新型標(biāo)記物2.外源性高表達(dá)miR-196b具有促進(jìn)白血病細(xì)胞增殖、抑制凋亡和分化的功能,有望成為兒童AML治療的新靶點(diǎn)。3.IGFBP7是miR-196b的一個靶基因,二者間的調(diào)控關(guān)系促進(jìn)了AML發(fā)生和發(fā)展。有待于進(jìn)一步深入的細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R733.71

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2 小茹;治療急性髓性白血病的新藥[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);2002年19期

3 ;“解碼”癌癥基因[J];臨床薈萃;2010年12期

4 王學(xué)文;;長期生存的急性髓性白血病:一個國際性的協(xié)作研究[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);1982年06期

5 Barmen E ,方炳木 ,劉英;新藥在急性髓性白血病中的應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊);1993年01期

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7 王衛(wèi)東,柴文華;急性髓性白血病亞型轉(zhuǎn)變1例[J];白血病;1999年02期

8 余河慶,劉艷杰,肖大為,劉葳,張昕;10a中5次復(fù)發(fā)仍存活急性髓性白血病1例[J];白血病;1999年05期

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本文編號：2339031