【摘要】：目的 :篩選鑒定與肺炎支原體肺炎相關(guān)的特異性miRNAs。方法 :收集肺炎支原體肺炎患兒的血液,通過(guò)miRNA芯片技術(shù)分析肺炎支原體肺炎患兒和正常人血液淋巴細(xì)胞中miRNAs的表達(dá)譜變化,通過(guò)RT-PCR方法驗(yàn)證芯片檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,確認(rèn)與肺炎支原體肺炎相關(guān)的特異性miRNAs。利用靶基因軟件預(yù)測(cè)各自可能的靶基因,利用RT-PCT驗(yàn)證mRNA表達(dá)差異。結(jié)果:肺炎支原體肺炎患兒血液淋巴細(xì)胞中篩選出表達(dá)上調(diào)的miRNA 105個(gè),表達(dá)下調(diào)的133個(gè)。其中上調(diào)(大于5倍)的30個(gè),上調(diào)(大于10倍)的10個(gè),下調(diào)(小于0.5倍)的133個(gè)(P0.05)。選取表達(dá)差異顯著的miR-20a-3p、miR-100-5p、miR-93-5p以及l(fā)et-7b-5進(jìn)行后續(xù)RT-PCR的驗(yàn)證,結(jié)果與芯片一致;Bcl-2、IGF-1R、PTEN、TGFβR1 mRNA表達(dá)有不同程度的降低。結(jié)論:miRNAs在肺炎支原體肺炎患兒血液淋巴細(xì)胞中存在差異表達(dá),而這些差異表達(dá)的miRNAs及其潛在靶基因可能參與肺炎支原體導(dǎo)致的感染與免疫反應(yīng)。
[Abstract]:Objective: to screen and identify the specific miRNAs. method related to Mycoplasma pneumoniae pneumonia: to collect the blood of children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia and to analyze the changes in the expression of miRNAs in the blood lymphocytes of children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia and normal people by miRNA chip technology, and verify the accuracy of the results by the RT-PCR method and confirm the results. The specific miRNAs. related to Mycoplasma pneumoniae pneumonia was used to predict the possible target genes by target gene software, and the difference of mRNA expression was verified by RT-PCT. Results: the blood lymphocytes of children with Mycoplasma pneumoniae were screened out of up regulated miRNA 105, 133 down-regulation. The up regulation (more than 5 times) was up to up (greater than 10 times). 10, down down (less than 0.5 times) of 133 (P0.05). MiR-20a-3p, miR-100-5p, miR-93-5p, and let-7b-5 were selected for subsequent RT-PCR verification, and the results were consistent with the chip. Bcl-2, IGF-1R, PTEN, TGF beta R1 mRNA expression was reduced in varying degrees. Conclusion: there is a blood lymphocyte in children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Differential expression of these differentially expressed miRNAs and its potential target genes may be involved in the infection and immune response caused by Mycoplasma pneumoniae.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸科;馬鞍山市十七冶醫(yī)院兒科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(青年科學(xué)基金項(xiàng)目)(81200012)
【分類(lèi)號(hào)】：R725.6

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本文編號(hào)：2128719