發(fā)布時(shí)間：2018-05-22 08:18

  本文選題：骨肉瘤 + Wnt/β-catenin信號(hào)通路��； 參考：《腫瘤》2017年06期

【摘要】：目的:研究表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞143B的抑制作用,并初步探討其可能的分子機(jī)制。方法:分別用0~50μmol/L的EGCG處理骨肉瘤143B細(xì)胞,然后采用結(jié)晶紫染色法觀察細(xì)胞增殖能力的變化,Hoechst染色法分析細(xì)胞凋亡情況,細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell小室法分析細(xì)胞遷移能力,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)細(xì)胞凋亡及遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。同時(shí),采用熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)分析細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號(hào)通路的活化情況,再用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路中關(guān)鍵因子β-catenin及其下游靶分子c-Myc和cyclin D1的表達(dá)情況。結(jié)果:EGCG處理后,骨肉瘤143B細(xì)胞的增殖和遷移能力均受到明顯抑制(P值均0.05),而晚期凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增加(P0.05);細(xì)胞中凋亡蛋白caspase-3及其剪切體的表達(dá)水平均明顯上調(diào)(P值均0.05),而Bcl-2、金屬基質(zhì)蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、β-catenin、c-Myc和cyclin D1的蛋白表達(dá)水平均明顯下調(diào)(P值均0.05)。此外,EGCG處理組的熒光素酶活性較未處理組明顯下降(P0.05)。結(jié)論:EGCG能抑制骨肉瘤143B細(xì)胞的增殖和遷移,促進(jìn)細(xì)胞凋亡;這一作用可能與其阻斷Wnt/β-catenin信號(hào)通路有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the inhibitory effect of epigallocatechin-3-gallateEGCGG on human osteosarcoma cell line 143B and its possible molecular mechanism. Methods: osteosarcoma 143B cells were treated with 0 ~ 50 渭 mol/L EGCG, and cell proliferation was observed by crystal violet staining. Cell apoptosis was analyzed by Hoechst staining. Cell migration was analyzed by cell scratch healing assay and Transwell chamber assay. The expression of apoptosis and migration related proteins was detected by Western blot. Meanwhile, luciferase reporter gene system was used to analyze the activation of Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway, and the expression of 尾 -catenin and its downstream target molecules, c-Myc and cyclin D1, in Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway was detected by Western blot. Results after being treated with 10% EGCG, The proliferation and migration ability of osteosarcoma 143B cells were significantly inhibited (P = 0.05), while the number of late apoptotic cells increased significantly (P 0.05), and the expression of apoptotic protein caspase-3 and its shearing bodies increased significantly (P < 0.05), while Bcl-2 and metal group increased significantly the expression level of apoptotic protein caspase-3 and its shearing bodies in osteosarcoma 143B cells. The protein expression levels of 2(matrix metalloproteinase-2, 尾 -cateninine c-Myc and cyclin D1 were all significantly down-regulated (P < 0.05). In addition, the luciferase activity of EGCG group was significantly lower than that of untreated group. ConclusionEGCG can inhibit the proliferation and migration of osteosarcoma 143B cells and promote apoptosis, which may be related to the blocking of Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院骨科兒童發(fā)育疾病研究教育部重點(diǎn)研究室兒童發(fā)育重大疾病國(guó)家國(guó)際科技合作基地兒科學(xué)重慶重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家臨床重點(diǎn)�？平ㄔO(shè)項(xiàng)目(國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)涵[2013]544號(hào))~~
【分類號(hào)】：R738.1

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本文編號(hào)：1921272