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IFN-γ在斷乳期小鼠RSV再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性中作用及其機制研究

發(fā)布時間:2017-12-24 09:15

  本文關(guān)鍵詞:IFN-γ在斷乳期小鼠RSV再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性中作用及其機制研究 出處:《重慶醫(yī)科大學》2015年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:第一部分 斷乳期小鼠RSV再次感染模型建立及意義目的:研究呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)感染斷乳期小鼠后再感染氣道炎癥類型及免疫應答特點。方法: 雌性C57BL/6小鼠隨機分為PBS對照組(3周PBS/8周PBS)、成年期首次感染組(3周PBS/8周RSV)、再感染組(3周RSV/8周RSV)。首次或再次感染后檢測小鼠體重,感染后第3、7天,處死小鼠,行支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細胞計數(shù)及分類計數(shù);病理切片HE染色后行肺組織炎癥病理評分;ELISA法檢測BALF中細胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-17A)的變化。結(jié)果:體重變化:RSV感染后小鼠體重明顯降低,再感染組體重下降較成年期首次感染組明顯;細胞計數(shù)及分類計數(shù):RSV感染后,成年期首次感染組BALF中的細胞總數(shù)、淋巴細胞較PBS對照組顯著增加;再感染組BALF中的細胞總數(shù)、嗜酸性細胞、中性粒細胞、淋巴細胞均顯著高于PBS對照組,且細胞總數(shù)、嗜酸性細胞、中性粒細胞、淋巴細胞顯著高于成年期首次感染組;肺部病理:RSV感染后,成年期首次感染組及再感染組的肺組織炎癥病理評分明顯高于PBS對照組,而再感染組明顯高于成年期首次感染組;細胞因子:RSV感染后第3天,再感染組BALF中的IFN-y及IL-17A明顯高于PBS對照組及初次感染組。感染后第7天,成年期首次感染BALF中的IFN-y較PBS對照組明顯增加,而IL-4、IL-5、IL-17A較PBS對照組無明顯變化;再感染組BALF中的IL-4、IL-5、IL-17A較PBS對照組顯著增加,而IFN-y無明顯變化。結(jié)論:RSV再感染后病情較初次感染進一步加重,嗜酸性粒細胞、中性粒細胞顯著升高,免疫應答為IL-4、IL-5等Th2類細胞因子與IL-17A升高,這與支氣管哮喘的炎癥特點相似,提示RSV反復感染可能導致支氣管哮喘的發(fā)生。第二部分IFN-γ在斷乳期小鼠RSV初次再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性中的作用及其機制研究目的:比較野生型及IFN-γ敲除C57BL/6鼠初次再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性差異,并研究IFN-γ在RSV初次再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性中的作用及其機制。方法:雌性野生型及IFN-γ敲除小鼠隨機分為PBS對照組(3周PBS/8周PBS)、再次感染組(3周RSV/8周RSV)。再次感染RSV后檢測小鼠體重,再次感染后第3、7天,體積描計法檢測各組小鼠氣道高反應性,行支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細胞計數(shù)及分類計數(shù);病理切片HE染色后行肺組織炎癥病理評分;ELISA法檢測BALF中細胞因子(IL-4、IL-5、IL-13、IL-17A)的變化。結(jié)果:體重變化:RSV感染后小鼠體重都明顯降低,野生型及敲除鼠RSV再感染組未見明顯差異。肺功能:僅敲除鼠RSV再感染組檢測到AHR,且明顯高于其他組。細胞計數(shù)及分類計數(shù):在感染后第3、7天,野生型及敲除鼠再次感染組BALF中細胞總數(shù)、嗜酸細胞、中性粒細胞、淋巴細胞都明顯高于相應的對照組,且敲除鼠再感染組高于野生型再感染組。肺部病理:野生型及敲除鼠再次感染組在RSV感染后第3、7天都存在明顯的炎癥細胞浸潤,且感染后第7天,敲除鼠再次感染組的病理評分明顯高于野生型。細胞因子:感染后第7天,野生型再感染組BALF中IL-4、IL-5、L-17A較野生型對照組明顯增加;敲除鼠再感染組L-4、IL-5、IL-13、IL-17A較敲除鼠對照組明顯增加,且敲除鼠再次感染組BALF中IL-5明顯高于野生型。結(jié)論:IFN-γ在再感染后起保護作用,阻斷IFN-γ的作用導致AHR及氣道炎癥加重,其保護機制可能通過抑制IL-5、IL-13增加,從而降低Th2類細胞因子介導的AHR和氣道炎癥。
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R725.6

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本文編號:1327766

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