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上海市某醫(yī)院兒童結(jié)核病流行現(xiàn)況及結(jié)核分枝桿菌復合群分子生物學特征研究

發(fā)布時間:2017-12-24 13:35

  本文關鍵詞:上海市某醫(yī)院兒童結(jié)核病流行現(xiàn)況及結(jié)核分枝桿菌復合群分子生物學特征研究 出處:《復旦大學》2014年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:結(jié)核病嚴重威脅著人類的健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization, WHO)最新公布統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,2012年全球新發(fā)兒童結(jié)核病約53萬,大約7.4萬死于結(jié)核病。兒童結(jié)核感染的臨床癥狀不典型、診斷較困難,給兒童結(jié)核病的控制帶來了嚴峻的挑戰(zhàn)。上海市某醫(yī)院為上海市兒童結(jié)核病的定點醫(yī)療機構(gòu),同時也收治外省市兒童結(jié)核病患者。本研究對2011年1月1日至2012年12月31日間上海市該醫(yī)院兒童結(jié)核病患者進行分類、培養(yǎng)、藥物敏感性檢測、結(jié)核分枝桿菌分型和多位點串聯(lián)重復可變序列分析,了解兒童結(jié)核病各類型的構(gòu)成情況,臨床表現(xiàn)與診斷時長的關系,以及兒童結(jié)核病患者結(jié)核分枝桿菌耐藥情況、菌型分布及其分子流行病學特征。(1)兒童結(jié)核病的流行現(xiàn)況收集2011-2012年期間所有確診或疑似結(jié)核病患兒的病史資料,包括姓名、性別、年齡、出生地、居住地等基本資料,以及主要臨床表現(xiàn)、診斷依據(jù)、卡介苗接種史、結(jié)核病患者接觸史、發(fā)病時間、確診時間、診療過程、涂片培養(yǎng)結(jié)果等病情資料。對資料進行分析,644例患兒中176人次為重復入院,11例復治,35例因其它疾病排除,最終,共有422例患兒納入本研究中。研究結(jié)果顯示,①兒童結(jié)核病患者中男性(67.3%)多于女性(32.7%);發(fā)病年齡主要集中于0-1歲,為230例(54.5%),其次為1-3歲,為72例(17.1%);本市兒童結(jié)核病患者占總病例數(shù)的23.9%(101/422);淋巴結(jié)核和肺結(jié)核占有較大比例,分別為176例(41.7%)和130例(30.8%);②不同結(jié)核病年齡分布不同,176例淋巴結(jié)核中162例(92.0%)集中在0~1歲年齡段,播散性結(jié)核集中在0-1歲和1-3歲年齡段,分別為28例(43.7%)和22例(34.4%),其它結(jié)核主要集中在7-14歲和3-7歲年齡段,分別為24例(46.2%)和16例(30.8%),不同疾病類型在不同年齡組的分別差別具有統(tǒng)計學意義(x 2=221.413,p0.001);③肺結(jié)核病患者最短診斷明確時間為3天,最長90天;淋巴結(jié)核最短6天,最長2年;播散性結(jié)核患者最短診斷時間為3天,最長為1年;其他結(jié)核最短7天,最長9月。明確診斷時間主要集中在16~30天內(nèi),肺結(jié)核、淋巴結(jié)核、播散性結(jié)核和其它結(jié)核分別為33.8%、32.4%、29.7%、40.4%。淋巴結(jié)核首發(fā)癥狀表現(xiàn)為淋巴結(jié)腫大;其它各型結(jié)核則主要表現(xiàn)為發(fā)熱或/和咳嗽,以及伴隨有乏力,嗜睡,食欲減退等癥狀。④首次診療機構(gòu)除淋巴結(jié)核外其它各級醫(yī)療機構(gòu)均有分布,主要集中于二級醫(yī)療機構(gòu),肺結(jié)核、播散性結(jié)核和其它結(jié)核分別為69例(53.0%)、31例(48.4%)和34例(65.4%);淋巴結(jié)核主要集中于三級醫(yī)療機構(gòu)(77.8%);肺結(jié)核組93.8%、淋巴結(jié)核98.3%、播散性結(jié)核95.3%、其它結(jié)核90.4%由三級醫(yī)療機構(gòu)明確診斷。⑤兒童結(jié)核病涂片總陽性率為24.4%,培養(yǎng)陽性率為34.6%,耐藥率為20.6%,耐多藥結(jié)核病為5.7%。綜上所述,兒童結(jié)核病男性患者多于女性;隨年齡的增加淋巴結(jié)核和播散性結(jié)核在患者中的構(gòu)成下降;各型結(jié)核病均有不同程度的診斷延誤,最長的延誤時間長達2年(淋巴結(jié)核)。需要提高一二級醫(yī)療機構(gòu)對兒童結(jié)核病的診療水平;耐藥結(jié)核病在兒童結(jié)核病中占有一定比例,需要加強耐藥兒童結(jié)核的管理。(2)結(jié)核分枝桿菌復合群菌型分析及分子生物學特征本研究旨在了解兒童結(jié)核病患者的臨床分離株菌型構(gòu)成情況,以及菌株間的生物多態(tài)性。研究采用化學法、聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)法和免疫膠體金法進行分枝桿菌菌型鑒定,分析三種方法鑒定分枝桿菌的能力;運用缺失區(qū)域(deleted region, RD)的擴增(RD1、RD9、RD10)鑒定結(jié)核分枝桿菌復合群菌株,分析結(jié)核分枝桿菌復合群菌株的構(gòu)成情況;擴增RD105區(qū)段鑒定北京基因型菌株;多位點串聯(lián)重復可變位點序列分析結(jié)核分枝桿菌復合群菌株的分子生物學特征。結(jié)果顯示,在所有191株分離株中,共獲得180株復蘇成功的分枝桿菌陽性培養(yǎng)物,其中164株為結(jié)核分枝桿菌復合群菌株、16株為非結(jié)核分枝桿菌菌株,與化學法比較,PCR法特異性(100%)和敏感性(100%)好,膠體金法較差(87.5%和49.4%)。164株結(jié)核分枝桿菌復合群菌株中,83株為卡介菌(bacillus Calmette-Guerin, BCG)、81株為結(jié)核分枝桿菌(M. tuberculosis),BCG菌株主要分離自淋巴結(jié)穿刺液中(90.4%,75/83),結(jié)核分枝桿菌主要分離自淋巴結(jié)穿刺液以外的標本;蛐丸b定發(fā)現(xiàn)164株分離株中63株為北京基因型。多位點可變數(shù)目串聯(lián)重復序列分析(Multiple-locus variable-number tandem repeat analysis, MLVA),共分離出72個基因型,56個為獨立基因型,Hunter-Gaston分辨率指數(shù)(HGI)為0.74,排除BCG、同一患者重復菌株、污染菌株因素后的HGI為0.996;與MLVA數(shù)據(jù)庫比對顯示M. Bovis BCG 83株;Beijing/W family 55株;M. Bovis 12株;Haarlem family2株;Ural family 1株;Canetti family 1株; 8株為新的基因型,與Delhi/CAS株和Beijing株相近,結(jié)合RD105結(jié)果顯示亦為Beijing/W family菌株;2株與數(shù)據(jù)庫中的New-1株相近。83株BCG菌株分離自67例患兒,來源于全國10個省市,主要來源于上海(35/67)、安徽(9/67)、江蘇(8/67)、浙江(7/67),各地域間分離的BCG菌株實驗選擇的12個位點無差異性。結(jié)果表明,兒童結(jié)核分枝桿菌感染主要由M. Bovis BCG和M. Tuberculosis引起,M.Tuberculosis的分子生物學特征明顯,以北京基因型為主;臨床分離的BCG菌株分子生物學特征無差異性。
【學位授予單位】:復旦大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R529.9

【共引文獻】

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2 韓根良;秦東春;梅園丁;;臨床實驗室生物安全管理探討[J];醫(yī)藥論壇雜志;2008年20期

3 陳風;何曉平;許海燕;;醫(yī)學實驗室設備維修人員的生物安全探討[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2011年13期

4 金中淦;胡香南;葛平;徐蓉;陳蓉;劉學杰;吳文娟;王慶忠;;檢測結(jié)核分枝桿菌的BSL-2實驗室污染狀況的實驗評價[J];檢驗醫(yī)學;2011年12期

5 譚斌;黃建安;;研究型實驗室耗材采購與管理的思考[J];實驗室研究與探索;2008年03期

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1 田麗麗;結(jié)核分枝桿菌利福平依賴表型與基因型變異研究及甘肅省臨夏回族自治州結(jié)核分枝桿菌分子流行病學研究[D];蘭州大學;2011年

2 幸琳琳;結(jié)核分枝桿菌表型與兒童結(jié)核病臨床表現(xiàn)相關性研究[D];重慶醫(yī)科大學;2009年

3 彭哲;重慶地區(qū)兒童結(jié)核分枝桿菌臨床分離株基因分型的初步研究及耐藥相關性分析[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

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本文編號:1328578

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