本文關鍵詞：兒童持續(xù)性及慢性免疫性血小板減少癥DNA甲基轉移酶mRNA表達

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【摘要】：背景免疫性血小板減少癥(Immune thrombocytopenia, ITP)是兒童最常見的出血性疾病。按照病程分為新診斷ITP、持續(xù)性ITP、慢性ITP,新診斷ITP治療效果好,但持續(xù)性及慢性ITP治療效果差。ITP的具體發(fā)病機制迄今尚未完全闡明。研究證實DNA甲基化異常參與了多種自身免疫性病、腫瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展。有學者研究發(fā)現(xiàn)成人ITP患者存在DNA低甲基化,且這種DNA低甲基化參與了ITP的發(fā)病。但鮮有關于DNA甲基化與兒童持續(xù)性及慢性ITP發(fā)病機制的關系的研究。目的本研究通過逆轉錄-聚合酶鏈式反應(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)方法研究兒童持續(xù)性及慢性ITP DNA甲基轉移酶(DNA methyltransferase, DNMTs)mRNA表達,探討DNA甲基化與兒童持續(xù)性及慢性ITP發(fā)病機制的關系。方法1、研究對象根據(jù)2013年中華醫(yī)學會兒科學分會血液學組制定的ITP診斷及分型標準,選取2014年1月-2015年1月期間于新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒內一科住院和門診治療或隨訪的持續(xù)性及慢性ITP患兒25例作為實驗組,同期選擇門診健康體檢兒童20例作為對照組。實驗組及對照組4周內均未應用葉酸、維生素B6、維生素B12。實驗組及對照組年齡、性別無統(tǒng)計學差異。標本采集：無菌采集實驗組及對照組空腹外周血2ml, EDTA抗凝。2、測定DNMTs mRNA表達分離外周血淋巴細胞,Trizol法提取RNA, RT-PCR法測定DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表達。3、統(tǒng)計學處理采用SPSS16.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)土標準差(x±S)表示,計數(shù)資料用百分比(%)表示；兩樣本均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料采用卡方檢驗；DNMTs mRNA表達與臨床資料之間的相關性分析采用Bivariate相關性分析,以P0.05為差異有顯著性。結果1、實驗組PLT(36.2±19.6)×109/L,正常對照組PLT(168.8±46.8)×109/L,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(t=-11.85,P=0.000)。2、實驗組及對照組DNMT1 mRNA表達分別為(0.17±0.05),(0.27+0.10),實驗組較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(t=-3.912,P=0.001)；實驗組及對照組DNMT3A mRNA表達分別為(0.20+0.10),(0.32±0.11),實驗組較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(t=-3.779,P=0.000)；實驗組及對照組DNMT3B mRNA表達分別為(0.16±0.11),(0.31士0.11),實驗組較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(t=-4.641,P=0.000)。3、DNMT1與DNMT3B mRNA表達存在正相關性(r=0.433,P=0.031)；DNMT3A與DNMT3B mRNA表達存在正相關性(r=0.721,P=0.000)。DNMT1與DNMT3A mRNA表達無相關性(r=0.277,P=0.180)。4、DNMTs mRNA表達與年齡呈顯著的負相關性(DNMT1:r=-0.565,P=0.003; DNMT3A:r=-0.563,P=0.003;DNMT3B:r=-0.506, P=0.01)。5、DNMT1 mRNA表達在男性、女性組分別為(0.184±0.059)、(0.164±0.050),不同性別表達水平無明顯差異(t=0.948,P=0.353)；DNMT3A mRNA表達在男性、女性組分別為(0.187±0.082)、(0.219土0.115),不同性別表達水平無明顯差異(t=-0.78,P=0.443)；DNMT3B mRNA表達在男性、女性組分別為(0.123±0.106)、(0.182±0.116),不同性別表達水平無明顯差異(t=-1.29,P=0.210)。結論1、兒童持續(xù)性及慢性ITP存在DNA低甲基化,這種DNA低甲基化可能參與發(fā)病機制；2、在兒童持續(xù)性及慢性ITP的DNA甲基化過程中DNMTs可能起一定的協(xié)同作用；3、DNMTs mRNA表達可能與年齡有關。
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R725.5

【參考文獻】

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本文編號：1274136