本文關(guān)鍵詞：基于脂代謝途徑研究哺乳期營養(yǎng)過度致大鼠NAFLD的程序化機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 營養(yǎng)程序化 肝臟 脂代謝 高脂飲食 NAFLD

【摘要】：隨著肥胖和代謝綜合征世界范圍內(nèi)的流行，與之密切相關(guān)的非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）的發(fā)病率也逐年上升，已成為全球性的公共衛(wèi)生問題。NAFLD可從單純性脂肪肝進(jìn)展為脂肪性肝炎、肝硬化，甚至是肝衰竭和肝癌，給人類的長期健康發(fā)展帶來巨大的危害。大量的研究證實(shí)，生命早期（胎兒期和嬰兒期）的營養(yǎng)，不僅影響兒童生長軌跡，也與成年期健康密切相關(guān)。早期營養(yǎng)過度是成年期肥胖和代謝綜合征發(fā)生的高危因素，而NAFLD是代謝綜合征在肝臟的特征表現(xiàn)。因此，積極探討早期營養(yǎng)程序化發(fā)生發(fā)展機(jī)制，實(shí)施成人期疾病在兒童時(shí)期的早期防治，已成為全球健康領(lǐng)域里迫切需要解決的問題。 研究證實(shí)，脂代謝包括脂肪酸的攝入、合成、氧化和輸出，涉及脂蛋白酯酶（lipoprotein lipase, LPL）、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白（liver-type fatty acid-bindingprotein, L-FABP）、乙酰輔酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase, ACC)、肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（carnitine palmitoyltransferase1, CPT1）和微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白（microsomal triglyceride transfer protein, MTP）等，是維持肝臟脂代謝的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)。當(dāng)脂肪酸的流入（攝入、合成）超過流出（氧化、輸出）時(shí)，過多的甘油三酯（triglyceride, TG）在肝臟內(nèi)沉積，促使NAFLD的發(fā)生。 業(yè)已知，胎兒期和嬰兒期是肝臟器官和代謝發(fā)育的關(guān)鍵期，對營養(yǎng)環(huán)境的變化非常敏感。胎兒期不良營養(yǎng)環(huán)境可導(dǎo)致肝臟器官和結(jié)構(gòu)發(fā)育受損，細(xì)胞數(shù)目改變和脂代謝功能紊亂。哺乳期營養(yǎng)過度是否也使肝臟器官、結(jié)構(gòu)和細(xì)胞產(chǎn)生適應(yīng)性的改變，進(jìn)而影響成年期脂代謝功能？如果是，影響肝臟脂代謝發(fā)育編程的靶標(biāo)和關(guān)鍵期是什么？開展上述問題的研究，有助于闡明肝臟脂代謝在早期營養(yǎng)程序化發(fā)展中的作用、窗口期及其可能的分子機(jī)制，最終為早期營養(yǎng)程序化的防治提供新的思路和潛在的分子靶標(biāo)。 目的 動態(tài)觀察哺乳期營養(yǎng)過度及斷乳后高脂飲食對大鼠脂代謝各個(gè)途徑相關(guān)酶的發(fā)育模式和轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控，及其與NAFLD發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，闡明脂代謝途徑在早期營養(yǎng)程序化發(fā)生發(fā)展中的作用和窗口期。 方法 1、應(yīng)用經(jīng)典大小窩組模型建立哺乳期營養(yǎng)過度的動物模型，即生后3天雄性SD大鼠分為營養(yǎng)過度組（small litter, SL,3只/窩）或正常營養(yǎng)組（normal litter, NL,10只/窩），生后3周斷奶，斷奶后分別給予正常飲食或高脂飲食（high fat diet, HF）。共4組：NL、SL、NL-HF、SL-HF組。 2、每周記錄大鼠體重及攝食量。2周、3周、6周、10周、16周時(shí)分析糖脂代謝、肝臟及脂肪組織重量、肝臟內(nèi)TG含量及肝組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，并計(jì)算肝指數(shù)=肝質(zhì)量/體質(zhì)量*100%。 3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肝臟組織脂代謝相關(guān)酶：LPL、L-FABP、ACC、CPT1、MTP及轉(zhuǎn)錄因子：膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c（sterol regulatory element-bindingprotein-1c, SREBP-1c）、過氧化物酶體增生物激活受體α（peroxisome proliferatoractivated receptor α, PPARα）mRNA表達(dá)水平；同位素法檢測肝臟組織ACC的酶活性；Western-blot法檢測SREBP-1c及PPARα蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果 1、生后3周SL大鼠體重、攝食量和脂肪（后腹膜和生殖周）重量開始高于NL大鼠，并在16周出現(xiàn)血清TG水平增加，糖耐量下降；青春期前，SL-HF組大鼠體重、攝食量、脂肪重量和TG水平即持續(xù)高于各組，糖耐量明顯下降；而NL-HF大鼠直至成年體重、脂肪重量和TG才增加，糖耐量下降。無論哺乳期如何喂養(yǎng)，，斷乳后高脂飲食均使大鼠血清TC和LDL水平增加，HDL水平降低，而血清ALT、AST水平無明顯變化。 2、生后3周，SL大鼠肝指數(shù)即高于NL大鼠，并在16周出現(xiàn)肝臟內(nèi)TG水平增加。青春期前SL-HF組大鼠肝指數(shù)和肝臟內(nèi)TG水平明顯高于各組；而NL-HF大鼠直至成年肝指數(shù)和TG水平才高于NL組。10周時(shí)SL-HF大鼠肝臟增大，出現(xiàn)脂肪肝改變；16周時(shí)肝臟增大更明顯，，肝細(xì)胞脂肪變性程度更深，并出現(xiàn)氣球樣變及點(diǎn)狀壞死；而NL-HF大鼠直至16周才出現(xiàn)脂肪肝改變。 3、生后2周起，SL組大鼠肝臟ACC mRNA表達(dá)水平持續(xù)高于NL大鼠。高脂飲食進(jìn)一步增加SL-HF組大鼠ACC mRNA表達(dá)，而NL-HF大鼠抵抗高脂飲食誘導(dǎo)ACC mRNA表達(dá)的增加；ACC mRNA表達(dá)水平與酶活性相一致。哺乳期SL組大鼠肝臟LPL和L-FABP mRNA表達(dá)水平明顯高于NL組大鼠，斷乳后差異消失。無論哺乳期NL或SL喂養(yǎng)，高脂飲食明顯降低成年期LPL、CPT1和MTP mRNA表達(dá)，對L-FABP無明顯影響。 4、哺乳期SL大鼠肝臟SREBP-1c mRNA表達(dá)與ACC變化一致，呈明顯增加趨勢，PPARα mRNA表達(dá)無明顯改變。斷乳后SL-HF大鼠SREBP-1c mRNA表達(dá)明顯增加，而PPARα表達(dá)抑制；高脂飲食對NL-HF組大鼠SREBP-1和PPARαmRNA表達(dá)無明顯影響。SREBP-1c和PPARα mRNA表達(dá)趨勢與蛋白一致。 結(jié)論 哺乳期營養(yǎng)過度加速大鼠對高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD的進(jìn)展及早齡化。哺乳期是肝臟組織脂肪酸合成酶ACC發(fā)育編程的窗口期，而SREBP-1c是ACC表達(dá)調(diào)控的重要分子途徑。肝臟組織ACC活化持續(xù)增加可能是哺乳期營養(yǎng)過度導(dǎo)致成年期脂代謝異常和NAFLD發(fā)生的重要機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R725.7

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 許會芬;羅軍;李芳;余康;石恒波;李君;林先滋;朱江江;;山羊SREBP-1基因的超表達(dá)對脂肪酸代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響[J];生物工程學(xué)報(bào);2012年11期

本文編號：1170680