本文關(guān)鍵詞：藏紅花素對(duì)急性白血病患兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及功能的影響

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【摘要】：目的 研究化療及不同濃度藏紅花素對(duì)急性白血病患兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖及功能的影響。 方法 收集正常兒童,新發(fā)急性白血病患兒,化療6個(gè)月及化療1年后的急性白血病患兒骨髓各10例,全骨髓法培養(yǎng)出BMSCs,分別設(shè)為正常對(duì)照組(A),實(shí)驗(yàn)組分為新發(fā)組(B),化療6月組(C)及化療12月組(D),并通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞表面標(biāo)記分子CD44、CD105、CD29、CD73、CD34、CD45及HLA-DR的表達(dá)率,進(jìn)行BMSCs鑒定。用含不同濃度藏紅花素(0、0.3125mg/ml、0.625mg/m1、1.25mg/ml及2.5mg/ml)的低糖DMEM (L-DMEM)培養(yǎng)液分別培養(yǎng)各組BMSCs48h、72h及96h。倒置顯微鏡觀察各組BMSCs形態(tài)及增殖情況；MTT法檢測(cè)經(jīng)不同濃度藏紅花素、不同時(shí)間作用后的各組BMSCs增殖率;ELISA法測(cè)定作用96小時(shí)后各組細(xì)胞上清液干細(xì)胞因子(SCF)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的水平。 結(jié)果 1.BMSCs膜抗原表達(dá)：各組均有99.5%以上細(xì)胞表面表達(dá)CD44、CD105、CD29及CD73,而表達(dá)CD34、CD45及HLA-DR的細(xì)胞均低于2%。 2.BMSCs形態(tài)學(xué)變化：A組BMSCs形態(tài)規(guī)則,呈集落樣或“結(jié)網(wǎng)樣”迅速增殖,B組BMSCs形態(tài)較規(guī)則,但增殖速度明顯低于正常對(duì)照組：C及D組BMSCs形態(tài)不規(guī)則,增殖速度明顯低于A組。 3.BMSCs增殖活性：實(shí)驗(yàn)各組BMSCs在藏紅花素作用前培養(yǎng)48h、72h、96h后所測(cè)得0D值均低于A組0D值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),培養(yǎng)72h及96h后,D組0D值明顯低于C組0D值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(p0.05)；加入不同濃度藏紅花素培養(yǎng)96h后,BMSCs增殖率均明顯提高(F值分別為19.85、5.42、9.31、9.58；p0.05),當(dāng)藏紅花濃度從0.3125mg/ml-1.25mg/ml時(shí),增殖率逐漸增加,以藏紅花素濃度為1.25mg/ml時(shí)的增殖率最高,與其他各組比較均有顯著性差異(p0.05),當(dāng)藏紅花素濃度升高至2.5mg/ml時(shí),各組細(xì)胞增殖率反而下降。 4.BMSCs產(chǎn)生SCF及TNF-α水平：B組細(xì)胞產(chǎn)生SCF及TNF-α水平較A明顯升高(p0.05),C及D組明顯低于B組(p均0.05),D組明顯低于C組(p0.05),但C組TNF-α水平仍顯著高于A組(p0.05)。藏紅花素作用后,A組細(xì)胞上清液中SCF水平明顯下降(F=25.49;p0.05),以1.25mg/ml濃度組最低；C及D組經(jīng)藏紅花素作用后,上清液SCF水平明顯升高(F=4.69,17.46；p0.05),以1.25mg/ml組最高,而A及C組經(jīng)濃度為0.625mg/ml及1.25mg/ml藏紅花素作用后,上清液中TNF-α水平明顯下降(F=5.58,6.12；p0.05),亦以1.25mg/ml濃度組下降最明顯。 結(jié)論 1.急性白血病患兒治療前BMSCs勺形態(tài)及細(xì)胞表型與正常BMSCs無(wú)明顯差異,但其增殖活性明顯降低,產(chǎn)生SCF及TNF-α水平異常增高,提示急性白血病患兒骨髓發(fā)生了造血微環(huán)境的紊亂。 2.化療6月后急性白血病患兒BMSCs占壁較前緩慢,形態(tài)不規(guī)則,增殖活性及產(chǎn)生SCF及TNF-α水平均明顯降低,提示化療可損傷BMSCs的形態(tài)、增殖活性及功能。 3.化療12月后急性白血病患兒BMSCs增殖活性及產(chǎn)生SCF及TNF-α水平均較化療6月后明顯減低,提示化療強(qiáng)度越大,對(duì)BMSCs的損傷越明顯。 4.治療前急性白血病患兒BMSCs經(jīng)藏紅花素作用后,增殖活性無(wú)明顯改變,但產(chǎn)生SCF及TNF-α水平較前明顯降低,提示藏紅花素可調(diào)節(jié)急性白血病患兒造血微環(huán)境紊亂。 5.化療6月后急性白血病患兒BMSCs經(jīng)藏紅花素作用后產(chǎn)生TNF-α的水平明顯降低,提示藏紅花素可減輕造血抑制。 6.化療6月及12月后急性白血病患兒BMSCs經(jīng)藏紅花素作用后其增殖活性及產(chǎn)生SCF的水平明顯升高,提示藏紅花素可促進(jìn)化療后受損的BMSCs增殖活性及功能的恢復(fù)。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R733.71

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 錢維娜;張艷紅;;杜仲對(duì)體外培養(yǎng)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖和分化的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年14期

2 蒲曉允,陳曉莉,潘靜,李招權(quán),鄧均,黃輝,葉勇;放射損傷骨髓基質(zhì)細(xì)胞造血負(fù)調(diào)因子表達(dá)及其對(duì)血細(xì)胞生成的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2002年12期

3 陳幸華;造血微環(huán)境與白血病[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年09期

4 張曦,陳幸華,劉林,孔佩艷,彭賢貴,劉紅,劉耀,高蕾,高力,王慶余;急性白血病骨髓基質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)特點(diǎn)的觀察[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年09期

5 趙培;羅春麗;吳小候;胡宏波;呂純芳;冀慧瑩;;藏紅花素對(duì)人膀胱移行細(xì)胞癌T24細(xì)胞裸鼠移植瘤的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2008年03期

6 李月白,秦國(guó)斌,殷力,許建中,王義生;糖皮質(zhì)激素對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖及分化的影響[J];中國(guó)骨腫瘤骨病;2002年03期

7 羅成基,陳幸華,鄒仲敏,郭朝華,周燕虹;造血基質(zhì)細(xì)胞在造血重建中的作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2000年06期

8 王璐,王亞平;人參總皂甙誘導(dǎo)人造血基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)IL-3的實(shí)驗(yàn)研究[J];解剖學(xué)報(bào);2004年01期

9 李新剛,白任奎,趙志平;再生障礙性貧血患者TNF_α及PGE_2水平的研究[J];臨床血液學(xué)雜志;1997年01期

10 陳瓊,顧仁樾,周端;藏紅花對(duì)冠心病心絞痛患者血流變學(xué)的作用[J];遼寧中醫(yī)雜志;1997年08期

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本文編號(hào)：1154249