本文關(guān)鍵詞：細胞外信號調(diào)控激酶在鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯誘導的大鼠泌尿生殖畸形發(fā)病機制中的作用

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【摘要】：背景：尿道下裂（Hypospadias）和隱睪（Cryptorchidism）是先天性泌尿外生殖器畸形中最常見的兩種疾病，其發(fā)病率高，在近年來還有繼續(xù)增高的趨勢。這兩種疾病均需要手術(shù)治療，而手術(shù)治療效果并不理想，易產(chǎn)生手術(shù)并發(fā)癥，或者術(shù)后仍不能完全恢復功能。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，大鼠孕期暴露于DEHP可致仔代雄性大鼠發(fā)生尿道下裂及隱睪。本研究在前期研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，將進一步探索尿道下裂及隱睪的發(fā)病機制，為進一步預防尿道下裂及隱睪的發(fā)生提供理論依據(jù)。 目的：在鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯[di-(2-ethylhexyl) phthalate，DEHP]誘導的大鼠先天性生殖畸形模型上，研究細胞外信號調(diào)控激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）在DEHP暴露后的胎鼠陰莖、睪丸中的表達變化，初步探討先天性泌尿生殖畸形發(fā)生機制。 方法：將SD孕鼠隨機分為DEHP組(750mg/kg體重/d)和大豆油對照組，每組20只，各組分別于母鼠孕期12～19d(gestation day，GDl2～19)持續(xù)經(jīng)口灌注給藥。各組分別取10只孕鼠讓其正常分娩，并計數(shù)每窩產(chǎn)雄性活仔鼠數(shù)量；出生后1/3/7/14/21/30日齡(postnatalday，PND)時稱取雄性仔鼠體重并測量肛門生殖器距離(anogenitaldistance，AGD)；30日齡時逐個檢查尿道下裂及隱睪的發(fā)生情況。余孕鼠在GD20行剖宮產(chǎn)取雄性胎鼠，應(yīng)用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)和免疫組化方法分別檢測胎鼠陰莖組織、睪丸組織中ERK1、ERK2的mRNA和蛋白表達水平。 結(jié)果：DEHP組10只孕鼠共產(chǎn)仔82只，其中雄性39只；對照組10只孕鼠共產(chǎn)仔119只，其中雄性62只，組間比較，每窩活產(chǎn)仔數(shù)及活產(chǎn)雄性仔鼠數(shù)，DEHP組均較對照組明顯減少（P0.01）。各日齡動態(tài)觀察雄性仔鼠，PND1DEHP組雄性仔鼠體重及AGD分別為6.32±0.60g、3.91±0.57mm，對照組分別為6.95±0.14g、4.67±0.20mm；PND3DEHP組雄性仔鼠體重及AGD分別為8.11±0.95g、5.42±0.67mm，，對照組分別為9.98±0.29g、6.02±0.27mm；PND7DEHP組雄性仔鼠體重及AGD分別為14.02±2.39g、6.76±0.73mm，對照組分別為18.78±0.23g、8.43±0.46mm；PND14DEHP組雄性仔鼠體重及AGD分別為27.03±3.01g、10.20±0.80mm，對照組分別為32.98±0.69g、12.05±0.40mm；PND21DEHP組雄性仔鼠體重及AGD分別為42.48±4.61g、15.14±1.17mm，對照組分別為52.33±1.39g、18.16±0.73mm；PND30DEHP組雄性仔鼠體重及AGD分別為66.08±8.67g、20.88±1.36mm，對照組分別為84.82±7.56g、23.73±1.09mm。各日齡雄性仔鼠組間比較，DEHP組體重及AGD均較對照組明顯減�。≒＜0.01）。PND30檢查仔鼠，DEHP組發(fā)生尿道下裂11只，發(fā)生率約為28.2%，對照組無尿道下裂發(fā)生，組間比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.01）；DEHP組發(fā)生隱睪20只，發(fā)生率為51.3%（其中單側(cè)隱睪10.3%，雙側(cè)隱睪41.0%），對照組無隱睪發(fā)生，組間比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.01）。免疫組織化學方法觀察，實驗組胎鼠陰莖組織中磷酸化ERK（p-ERK）蛋白表達水平較對照組有增加趨勢，總ERK（T-ERK）兩組無明顯差異。qPCR檢測結(jié)果顯示，ERK1和ERK2二者mRNA在正常大豆油對照組相對于內(nèi)參GAPDH的表達分別是0.82±0.13和1.32±0.33，在DEHP灌胃的實驗組其相對表達分別是1.09±0.18和1.81±0.22，與對照組比較，實驗組的ERK1和ERK2mRNA表達水平均顯著增高(P0.05)。胎鼠睪丸組織免疫組織化學方法觀察，p-ERK及T-ERK在實驗組和對照組無明顯差異。 結(jié)論：DEHP誘導先天性尿道下裂發(fā)生可能與胎鼠陰莖組織中ERK信號的過度表達有關(guān)；隱睪發(fā)生可能與胎鼠睪丸組織中ERK信號無明顯關(guān)系。由ERK介導的空間調(diào)控異常可能是導致尿道下裂發(fā)生的重要機制之一。
【關(guān)鍵詞】：尿道下裂 隱睪 細胞外信號調(diào)控激酶 鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯 絲裂原活化蛋白激酶
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R726.9
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-16
• 1 材料與方法16-24
• 2 結(jié)果24-31
• 3 討論31-34
• 全文總結(jié)34-35
• 參考文獻35-37
• 文獻綜述37-51
• 參考文獻44-51
• 致謝51-52
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文52-53

【參考文獻】

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1 李明勇;陳柏林;邱林;華q

本文編號：1122374