本文關(guān)鍵詞：CHAT及nNOS基因在先天性膽總管囊腫壁中的分布及意義

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【摘要】：目的：先天性膽總管囊腫(Congenital choledochal cyst, CCC)，是小兒時期常見的一種先天性膽道發(fā)育異常，表現(xiàn)為肝外膽道遠(yuǎn)端狹窄及管壁發(fā)育不良或存在膽胰管合流異常，使膽汁淤積，排出障礙導(dǎo)致膽總管擴張。先天性膽總管囊腫在嬰幼兒期發(fā)病者中占2/3，其他1/3見于青年，男女比例為1:4~5[1]。截至目前，先天性膽總管囊腫的病因仍不十分明確，近年來隨著對本病形態(tài)學(xué)、膽汁酶學(xué)及動物實驗等研究的進展，認(rèn)為CCC是由多種因素造成的先天發(fā)育異常，而膽總管遠(yuǎn)端神經(jīng)、肌肉發(fā)育不良的發(fā)病因素越來越受到人們的重視。膽道的神經(jīng)分布包括膽道壁內(nèi)的內(nèi)在神經(jīng)和外來神經(jīng)系統(tǒng)兩部分，二者相互協(xié)調(diào)，共同調(diào)節(jié)膽道的功能。研究表明調(diào)節(jié)膽道的神經(jīng)遞質(zhì)主要有興奮性遞質(zhì)Ach和抑制性遞質(zhì)NO，但CCC病變囊腫中不同神經(jīng)遞質(zhì)的分布及其與不同囊腫類型的關(guān)系仍不十分清楚。故本研究通過利用RT-PCR的方法檢測對比CCC患兒肝外膽道不同部位間神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中合成抑制性神經(jīng)遞質(zhì)NO的關(guān)鍵酶-一氧化氮合酶（Neuronal Nitric Oxide Synthase, nNOS）和興奮性遞質(zhì)Ach的關(guān)鍵酶-膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（Choline acetyltransferas, CHAT）的表達(dá)情況，從基因水平和神經(jīng)動力角度分析腸神經(jīng)調(diào)控異常在CCC發(fā)病機制中的作用，從而進一步完善CCC的發(fā)病機理，為其臨床治療提供重要的理論依據(jù)。 方法：隨機選取2011年1月~2012年9月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院小兒外手術(shù)治療的先天性膽總管囊腫患兒20例作為研究對象，男6例，女14例，男：女=1：2.3；年齡8月~11歲，平均年齡4.33±2.94歲，其中以腹痛就診患兒12例，以黃染便白就診患兒4例，以發(fā)熱就診患兒2例，膽道穿孔的患兒1例，產(chǎn)前B超檢查發(fā)現(xiàn)1例，所有患兒術(shù)前經(jīng)過B超或CT檢查后明確診斷，手術(shù)切去膽總管囊腫及膽囊，行肝管空腸Roux-en-Y吻合術(shù)或肝管十二指腸吻合術(shù)，分別切取膽總管囊腫遠(yuǎn)、近端管壁和膽囊壁作為遠(yuǎn)端組、近端組和膽囊組，將三組標(biāo)本液氮速凍后置于-70℃冰箱中保存。用熒光定量RT-PCR方法檢測各組標(biāo)本中nNOSmRNA和CHAT mRNA轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)情況，所得數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0for Windows軟件進行數(shù)據(jù)分析， P＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：通過RT-PCR檢測先天性膽總管囊腫不同部位CHAT和nNOS基因的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)上述指標(biāo)在各組中有不同表達(dá)。CHAT和nNOS基因在先天性膽總管囊腫的近端組表達(dá)分別為1.38±0.21，1.65±0.16；在遠(yuǎn)端組表達(dá)分別為1.79±0.21，1.15±0.17；在膽囊組的表達(dá)分別為1.30±0.19，1.57±0.12；在囊狀擴張型CCC遠(yuǎn)端管壁中的表達(dá)為1.74±0.21，1.11±0.15；在梭狀擴張型CCC遠(yuǎn)端管壁中的表達(dá)為1.86±0.20，1.22±0.18。統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)CHAT基因在先天性膽總管囊腫的近端組、膽囊組的表達(dá)均少于囊腫遠(yuǎn)端組表達(dá)（P＜0.05），有顯著性差異；而CHAT基因在近端組和膽囊組之間沒有顯著性差異（P＞0.05）。nNOS基因在先天性膽總管囊腫近端組、膽囊組表達(dá)均多于遠(yuǎn)端組（P＜0.05），有顯著性差異；而在近端組和膽囊組之間沒有顯著性差異（P＞0.05），無統(tǒng)計學(xué)意義。CHAT基因和nNOS基因在囊狀擴張型CCC遠(yuǎn)端組和梭形擴張型CCC遠(yuǎn)端組中表達(dá)量之間比較無顯著性差異（P＞0.05）。 結(jié)論：1. CHAT基因表達(dá)在CCC遠(yuǎn)端表達(dá)多于囊腫的近端和膽囊，，說明興奮性膽堿能神經(jīng)在先天性膽總管囊腫的遠(yuǎn)端分布相對增多，導(dǎo)致遠(yuǎn)端膽管環(huán)形平滑肌痙攣性收縮，導(dǎo)致CCC發(fā)病。 2. nNOS基因表達(dá)在CCC遠(yuǎn)端表達(dá)少于近端和膽囊，說明抑制性神經(jīng)在膽總管囊腫遠(yuǎn)端分布減少，膽管遠(yuǎn)端平滑肌舒張受限，導(dǎo)致膽總管囊腫的形成。 3. CHAT、nNOS基因在近端組和膽囊組表達(dá)無明顯差異，說明腸神經(jīng)動力調(diào)控異�？赡芤阅懣偣苣夷[的遠(yuǎn)端病變?yōu)橹鳌?4.興奮性和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)的分布異常在不同病理類型CCC的發(fā)病中并不存在差異。
【關(guān)鍵詞】：先天性膽總管囊腫 腸神經(jīng) 神經(jīng)遞質(zhì) 乙酰膽堿 膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶 一氧化氮 一氧化氮合酶
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R725.7
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-16
• 結(jié)果16-17
• 附圖17-26
• 附表26-28
• 討論28-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻34-36
• 綜述 腸神經(jīng)系統(tǒng)在消化系統(tǒng)中的研究進展36-48
• 參考文獻44-48
• 致謝48-49
• 個人簡歷49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張霞;董大翠;王霞;張艷;;先天性巨結(jié)腸與巨結(jié)腸同源病的nNOS免疫組織化學(xué)研究[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2007年01期

2 林琳;姜柳琴;張紅杰;胡曄東;林征;黃峻;;慢傳輸運動小鼠結(jié)腸組織中Cajal間質(zhì)細(xì)胞的改變[J];胃腸病學(xué);2006年08期

3 ;Mechanisms mediating cholinergic antral circular smooth muscle contraction in rats[J];World Journal of Gastroenterology;2004年22期

本文編號：1114308