本文關(guān)鍵詞：宮內(nèi)感染致新生鼠支氣管肺發(fā)育不良中NF-κBp65、TNF-a的變化及地塞米松的干預(yù)效應(yīng)

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【摘要】：目的： 目前認(rèn)為宮內(nèi)感染與新生兒支氣管肺發(fā)育不良關(guān)系密切[1]。本研究通過給孕鼠腹腔內(nèi)注射脂多糖（LPS）建立宮內(nèi)感染模型，研究宮內(nèi)感染致新生鼠支氣管肺發(fā)育不良肺組織中NF-κBp65、TNF-α的表達(dá)變化，探討地塞米松對宮內(nèi)感染致新生鼠支氣管肺發(fā)育不良的干預(yù)效應(yīng)。 方法： 1.實(shí)驗(yàn)分組：將30只妊娠第17d的孕鼠隨機(jī)分為生理鹽水對照組（NS組）、宮內(nèi)感染組（LPS組）和地塞米松干預(yù)組（DEX組），每組各10只。LPS組于妊娠第17、18d連續(xù)2天腹腔內(nèi)注射脂多糖350μg/kg；DEX組于妊娠第17、18d連續(xù)2天腹腔內(nèi)注射脂多糖350μg/kg，注射脂多糖1h后腹腔內(nèi)注射地塞米松0.5mg/kg；NS組于相同妊娠時間點(diǎn)腹腔注射等容積的生理鹽水。 2.標(biāo)本收集：造模后分別從三組隨機(jī)取出2只孕鼠處死，取出胎盤、子宮置于4％中性甲醛中固定，用于HE染色。將自然分娩的新生鼠按照生后第1d、3d、7d、14d四個時間點(diǎn)分別稱體重后斷頭處死，迅速開胸取出肺組織，并用生理鹽水洗凈，置于濾紙吸干肺組織表面水分后稱重，，然后將肺組織置于4%中性甲醛中固定后石蠟包埋，用于HE和免疫組化染色。 3.實(shí)驗(yàn)方法：應(yīng)用HE染色觀察各組孕鼠子宮、胎盤的病理變化特點(diǎn)；檢測三組新生大鼠的體重、肺重、計(jì)算肺指數(shù)（肺重／體重）；應(yīng)用HE染色觀察各組新生鼠肺組織病理變化特點(diǎn)；顯微鏡下計(jì)算生后第3d、7d、14d輻射狀肺泡計(jì)數(shù)（Radial alveolar count RA C）。采用免疫組化法檢測各組新生鼠生后第1d、3d、7d、14d肺組織中核因子-κBp65（NF-κBp65）及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達(dá)。 結(jié)果： 1、30只孕鼠進(jìn)食、活動均正常，無孕鼠發(fā)生死亡。孕鼠分娩情況：NS組共獲70（70/72）只新生鼠，LPS組共獲62（62/69）只新生鼠，DEX組共獲63（63/67）只新生鼠。宮內(nèi)感染組孕鼠胎盤及子宮血管充血、水腫、大量中性粒細(xì)胞浸潤；生理鹽水組孕鼠胎盤及子宮檢測均未見明顯炎性反應(yīng)。 2、肺組織的病理變化：宮內(nèi)感染組新生大鼠生后第3d肺組織可見肺泡數(shù)較對照組減少，肺泡膈減少，肺泡結(jié)構(gòu)簡單化；生后第14d：肺泡數(shù)較對照組仍減少，肺泡膈厚度增加。地塞米松干預(yù)組新生大鼠肺組織出現(xiàn)類似的病理變化，但程度減輕。宮內(nèi)感染組新生大鼠生后第3d、7d、14d肺組織中RAC較對照組減少（P0.05），地塞米松干預(yù)后，新生大鼠生后第3d、7d、14d肺組織中RAC較宮內(nèi)感染組增加（P0.05）。三組新生大鼠肺組織內(nèi)均未見明顯的肺實(shí)質(zhì)纖維化病變。 3、宮內(nèi)感染后，新生大鼠生后第1d、3d、7d、14d體重及肺重均較對照組減少（P0.05）。地塞米松干預(yù)組與宮內(nèi)感染相比新生大鼠生后第1d、3d、7d、14d體重及肺重均增加（P0.05）。 4、宮內(nèi)感染組新生大鼠生后第1d、3d、7d、14d肺組織中NF-κBp65、TNF-α表達(dá)較對照組明顯增加(P0.01)，兩者上升呈正相關(guān)性（r=0.975， P0.01）。 5、地塞米松干預(yù)組與宮內(nèi)感染相比：新生大鼠生后第1d、3d、7d、14d肺組織中NF-κBp65、TNF-α表達(dá)明顯下降(P0.01)，兩者下降呈正相關(guān)性（r=0.967，P0.01）。 結(jié)論： 1、腹腔內(nèi)注射LPS導(dǎo)致母鼠子宮胎盤內(nèi)血管充血、水腫，大量中性粒細(xì)胞浸潤，建立孕鼠宮內(nèi)感染模型。宮內(nèi)感染后，新生大鼠體重、肺重降低，新生大鼠肺泡膈減少，增厚，肺泡數(shù)目減少，肺泡結(jié)構(gòu)簡單化，RAC明顯減少，提示宮內(nèi)感染使肺泡發(fā)育受損，導(dǎo)致了類似支氣管肺發(fā)育不良病理變化。 2、宮內(nèi)感染后，新生大鼠肺組織中NF-κBp65及TNF-α表達(dá)明顯增加，提示細(xì)胞因子反應(yīng)在宮內(nèi)感染致新生大鼠支氣管肺發(fā)育不良中起到重要作用。 3、宮內(nèi)感染及地塞米松干預(yù)后，新生大鼠肺組織中NF-κBp65及TNF-α的變化趨勢基本一致，呈明顯的正相關(guān)性，提示NF-κBp65與TNF-α在宮內(nèi)感染致新大鼠支氣管肺發(fā)育不良中具有協(xié)同作用。 4、宮內(nèi)感染早期應(yīng)用地塞米松干預(yù)后，新生大鼠肺組織中NF-κBp65及TNF-α表達(dá)下降，肺組織病理變化減輕，輻射狀肺泡計(jì)數(shù)（RAC）增加，體重、肺重增加，地塞米松早期干預(yù)對宮內(nèi)感染引起的新生大鼠支氣管肺發(fā)育不良起到一定的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：宮內(nèi)感染 支氣管肺發(fā)育不良 地塞米松 NF-κBp65 TNF-α
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 材料與方法13-19
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動物13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備13-14
• 2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑14
• 2.3.1 動物模型實(shí)驗(yàn)試劑14
• 2.3.2 免疫組化檢測試劑14
• 2.4 主要試劑配制14-15
• 2.5 孕鼠模型制作15
• 2.6 宮內(nèi)感染模型的建立及實(shí)驗(yàn)分組15-16
• 2.7 標(biāo)本采集16
• 2.8 指標(biāo)測定和方法16-18
• 2.8.1 新生鼠的體重、肺重、肺重/體重的檢測16
• 2.8.2 孕鼠子宮胎盤及新生大鼠肺組織的病理檢查16-17
• 2.8.3 輻射狀肺泡計(jì)數(shù)(RAC)17
• 2.8.4 S-P 免疫組化染色檢測肺組織中 NF-κBp65 及 TNF-α蛋白表達(dá)17-18
• 2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法18-19
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-28
• 3.1 孕鼠分娩及新生鼠情況19
• 3.2 各組實(shí)驗(yàn)新生大鼠體重，肺重、肺指數(shù)（肺重／體重）的變化19-21
• 3.3 各組孕鼠子宮及胎盤 HE 染色結(jié)果21-22
• 3.4 宮內(nèi)感染后新生鼠肺組織病理變化22
• 3.5 各組新生大鼠輻射狀肺泡計(jì)數(shù) RAC 的變化22-23
• 3.6 各組新生大鼠肺組織中 NF-κBP65 的變化23-25
• 3.7 各組新生大鼠肺組織中 TNF-α的變化25-26
• 3.8 NF-κBp65 與 TNF-α之間進(jìn)行相關(guān)性分析26-28
• 第4章 討論28-34
• 4.1 宮內(nèi)感染致新生大鼠 BPD 動物模型的制備28-29
• 4.2 宮內(nèi)感染與支氣管肺發(fā)育不良29-30
• 4.3 宮內(nèi)感染致新生鼠 BPD 肺組織中 NF-κBp65 及 TNF-α的變化30-32
• 4.4 地塞米松對宮內(nèi)感染致 BPD 的保護(hù)作用32-34
• 第5章 結(jié)論34-35
• 第6章 本研究展望35-36
• 致謝36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 附圖40-43
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
• 綜述44-49
• 參考文獻(xiàn)48-49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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本文編號：1113395