本文關(guān)鍵詞：NAC在氧化應(yīng)激對胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞KGFR磷酸化及泛素化表達影響中的保護作用研究

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【摘要】：目的探討活性氧ROS對胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞(AECII)內(nèi)角質(zhì)細胞生長因子受體（KGFR）磷酸化及泛素化表達的影響，以及加用抗氧化劑N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）對KGFR保護作用。 方法原代培養(yǎng)胎鼠AECⅡ，待其生長至亞融合狀態(tài)時，隨機分為H_2O_2組，NAC+H_2O_2組和KGF組。流式細胞儀檢測H_2O_2組和NAC+H_2O_2兩組各時間點時間點ROS水平；Western-Blot檢測H_2O_2組各時間點KGFR表達水平；免疫沉淀和western-blot方法檢測三組各時間KGFR酪氨酸激酶（RTKs）磷酸化水平和受體泛素化水平。采用SPSS16.0軟件進行方差分析及t檢驗。 結(jié)果1.H_2O_2組其他時間點同0min相比，ROS水平顯著升高（p0.01）；NAC+H_2O_2組同H_2O_2組相比，ROS水平顯著降低（P0.01）；但是同0min相比，5min和40minNAC+H_2O_2組ROS水平仍較高（P0.05），80minNAC+H_2O_2組ROS水平相當（P0.05）。 2.H_2O_2組各時間點KGFR表達水平不變(F檢驗，p0.05)。 3.與0min（0.9379±0.0589）比較，H_2O_2組5min,10min,20min,40min各時間點產(chǎn)生的ROS激活KGFR酪氨酸激酶，使其磷酸化水平升高，且5min時磷酸化水平最高（1.8796±0.0973，，P=0.000），40min（1.2775±0.0848，P=0.005）后KGFR磷酸化漸消失，80min（0.6519±0.0086）時完全消失。 4.NAC+H_2O_2組各時間點KGFR酪氨酸磷酸化趨勢較前一致，但磷酸化水平較H_2O_2組顯著減低（P0.05）。 5.H_2O_2組5min,10min,20min,40min各時間點產(chǎn)生的ROS誘導(dǎo)KGFR泛素化，5min時受體泛素化水平最高（2.0225±0.0402，P=0.000），10min（1.3691±0.01386，P=0.006）~40min(1.1642±0.0032，P=0.03)泛素化水平漸降低，但同0min（0.9640±0.0620）相比仍有統(tǒng)計學意義（P0.05）。 6.KGF組激活KGFR，產(chǎn)生受體磷酸化和泛素化表達，同H_2O_2組5min時間點KGFR磷酸化相比，無統(tǒng)計學差異（P0.05）；同H_2O_2組5min時間點泛素化水平相相比，差異顯著有統(tǒng)計學意義（P0.05）。 結(jié)論氧化應(yīng)激（ROS）可以激活胎鼠AECIIKGFR酪氨酸激酶，使磷酸化KGFR水平升高，同時誘導(dǎo)KGFR泛素化，但是NAC（N-乙酰-L-半胱氨酸）可以抑制ROS產(chǎn)生，降低KGFR磷酸化表達，從而增強KGF對高氧肺損傷的保護作用。
【關(guān)鍵詞】：氧化應(yīng)激 肺泡Ⅱ型上皮細胞 角化細胞生長因子受體 酪氨酸激酶 N-乙酰-L-半胱氨酸 泛素化
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R725.6
【目錄】：

• 縮略詞6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-20
• 結(jié)果20-28
• 討論28-31
• 參考文獻31-37
• 綜述37-55
• 參考文獻44-55
• 致謝55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 尉進茜;伊慧珍;;骨髓間充質(zhì)干細胞對難治性肺疾病治療的研究進展[J];中國實用醫(yī)藥;2011年24期

本文編號：1090755