本文關(guān)鍵詞：端粒酶活性和相關(guān)基因在再障患兒骨髓造血干細(xì)胞中表達(dá)的研究

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【摘要】：再生障礙性貧血(簡(jiǎn)稱再障,Aplastic Anemia, AA)是由多種因素(包括物理、化學(xué)、生物、藥物及其他尚不完全明確的因素)造成骨髓造血衰竭的血液系統(tǒng)疾病,既往認(rèn)為主要病理機(jī)制為骨髓造血干細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量的異常及骨髓造血微環(huán)境的破壞,臨床表現(xiàn)為全血細(xì)胞的減少。該疾病治療療程長(zhǎng),治療效果差,病死率高,嚴(yán)重危害患者身心健康。然而直至目前,再障的發(fā)病機(jī)制仍不完全明了。 既往研究認(rèn)為AA的發(fā)病機(jī)制與免疫細(xì)胞及其活化信號(hào)異常密切相關(guān)。而最近國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究提示遺傳易感性特別是某些基因水平的異常改變?cè)贏A發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著不容忽視的作用。其中端粒酶活性及相關(guān)基因表達(dá)的異常在再障發(fā)病機(jī)制中的意義,越來(lái)越引起血液學(xué)研究者們的關(guān)注和興趣。 端粒是真核細(xì)胞中染色體末端的特殊結(jié)構(gòu),能保護(hù)染色體在細(xì)胞分裂過(guò)程中,保持自身結(jié)構(gòu)和功能的完整性,避免染色體發(fā)生端端融合、重組和丟失。但端粒自身存在與年齡相關(guān)的長(zhǎng)度縮短,此時(shí)需要一種特殊的酶-—端粒酶來(lái)補(bǔ)償這種丟失而維持端粒長(zhǎng)度。端粒酶由端粒酶RNA組分(TERC)與端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TRET)構(gòu)成,它能夠以自身攜帶的RNA為模板在染色體末端添加端粒重復(fù)序列,在維持端粒長(zhǎng)度和穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用。當(dāng)端�？s短至一定范圍時(shí),端粒酶活性表達(dá)的有無(wú)具有至關(guān)重要的作用。有研究表明再生障礙性貧血患者外周血粒細(xì)胞端粒長(zhǎng)度縮短,且縮短程度與患者疾病持續(xù)時(shí)間存在相關(guān)性[1]。兒童骨髓造血干細(xì)胞增殖潛能較成人高,端粒相對(duì)縮短不明顯,那么再障患兒骨髓造血干細(xì)胞端粒酶活性水平表達(dá)如何,是否隨端粒長(zhǎng)度改變而變化,上述兩個(gè)端粒酶基因的表達(dá)在再障發(fā)病過(guò)程如何變化,目前尚未見(jiàn)相關(guān)研究報(bào)道。因此為明確以上疑問(wèn),我們進(jìn)行了以下研究。 目的 探討AA患兒骨髓造血干細(xì)胞端粒酶活性及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)基因和端粒酶RNA組分(hTERC)基因的表達(dá)變化和關(guān)系,為再障診治及其判斷預(yù)后尋找新的參考指標(biāo)。 材料與方法 收集2011年6月-2012年6月鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院及第一附屬醫(yī)院經(jīng)臨床和實(shí)驗(yàn)室初次確診的再障患兒65例為病例組,其中慢性再障(CAA)52例,急性再障(SAA)13例,同時(shí)收集鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院就診并嚴(yán)格排除血液系統(tǒng)疾病及其他重大惡性腫瘤患兒21例作為對(duì)照組。3組患兒既往均未給予輸血及免疫抑制治療,且年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用重復(fù)序列擴(kuò)增(TRAP)-PCR銀染法檢測(cè)3組患兒骨髓造血干細(xì)胞端粒酶活性,用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法分別檢測(cè)hTERT mRNA和hTERC mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,定量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,多組間比較以單因素方差分析進(jìn)行,組間比較采用LSD法,關(guān)聯(lián)分析則采用線性相關(guān)分析,P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,以a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果 1.端粒酶活性表達(dá)水平：CAA組為41.35±10.28、SAA組端粒酶活性31.86±8.54明顯高于對(duì)照組23.50±9.13(P0.01),且CAA組平均端粒酶活性較SAA組升高(P0.05)； 2. hTERT mRNA的表達(dá)水平：CAA組為9.86±1.10,SAA組為5.12±0.89,均高于對(duì)照組(1.17±0.73),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且CAA組高于SAA組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)； 3. hTERC mRNA表達(dá)水平：CAA組為1.23±0.50,SAA組為1.13±0.45,對(duì)照組為1.18±0.64,三組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.812)； 4.端粒酶活性、hTERT mRNA及hTERC mRNA表達(dá)相關(guān)性：端粒酶活性高低與hTERT mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.660,P0.01), hTERCmRNA的表達(dá)與端粒酶活性無(wú)明顯相關(guān)性(P=0.193), hTERT mRNA與hTERCmRNA表達(dá)無(wú)相關(guān)性(P=0.746)。 結(jié)論 1.再障患兒骨髓造血干細(xì)胞端粒酶活性和hTERT mRNA表達(dá)水平升高,且慢性再障兒童兩者表達(dá)均高于急性再障患兒,hTERT是端粒酶活性表達(dá)的控制因素。 2.端粒酶活性的表達(dá)變化與兒童再障發(fā)病及發(fā)展過(guò)程有關(guān),hTERT表達(dá)在端粒酶活性調(diào)節(jié)過(guò)程中起重要作用。
【關(guān)鍵詞】：再生障礙性貧血 端粒酶 骨髓造血干細(xì)胞 兒童
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.5
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 中英文~.略詞表11-12
• 1 引言12-17
• 2 材料與方法17-26
• 3 結(jié)果26-27
• 4 討論27-31
• 5 小結(jié)與展望31-33
• 6 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 附圖37-40
• 綜述40-55
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及成果55-56
• 致謝56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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本文編號(hào)：1048445