發(fā)布時(shí)間：2017-10-13 12:43

  本文關(guān)鍵詞：炎癥調(diào)控PCSK9介導(dǎo)的阿霉素腎病小鼠腎臟脂質(zhì)沉積的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 阿霉素 酪蛋白 腎病 慢性炎癥 炎癥 HNF-1ɑ PCSK9 脂質(zhì)

【摘要】：第一部分：小鼠阿霉素腎病模型和慢性炎癥模型的建立 目的：復(fù)制小鼠阿霉素腎病模型和慢性炎癥模型，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定研究基礎(chǔ)。 方法：根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)隨機(jī)數(shù)字表，將6周齡雄性BALB/c小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（CTL）、單純腎病組（ADR）、單純炎癥組（IFM）和炎癥腎病組（AWI）。給予ADR組和AWI組尾靜脈注射阿霉素10.5mg/kg，建立阿霉素腎病模型；CTL組給予等量的注射用生理鹽水；IFM組和AWI組隔日皮下注射0.5ml10%酪蛋白，建立慢性炎癥模型。各實(shí)驗(yàn)小組分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后第4、8、12周末處死小鼠、獲取標(biāo)本，每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)8個(gè)樣本�？捡R斯亮藍(lán)法檢測(cè)小鼠24h尿蛋白水平；全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清白蛋白、總膽固醇、低密度脂蛋白、肌酐水平；通過(guò)HE染色和PAS染色在光鏡下觀察腎臟形態(tài)學(xué)改變； 結(jié)果：?jiǎn)渭兡I病組和炎癥腎病組在注射阿霉素后第2周出現(xiàn)大量蛋白尿，，第8周達(dá)到高峰，持續(xù)至第12周（P0.05）；炎癥組在第6周出現(xiàn)蛋白尿，但水平明顯低于炎癥腎病組（P0.05）。單純腎病組和 炎癥腎病組第4周出現(xiàn)血白蛋白降低（P0.05）；兩組分別在第8、4 周出現(xiàn)血脂增高，第12、8周出現(xiàn)血肌酐增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。單純炎癥組腎臟第4、8、12周光鏡下均可見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸 潤(rùn)，不伴其他病理改變；單純腎病組和炎癥腎病組腎臟早期病理類(lèi)型為微小病變型，兩者分別在第12、8周出現(xiàn)局灶節(jié)段性腎小球硬化，伴腎功能不全。 結(jié)論：阿霉素腎病小鼠模型和慢性炎癥模型復(fù)制成功。阿霉素小鼠腎病模型早期病理改變?yōu)槲⑿〔∽�，隨著病程遷延，出現(xiàn)局灶節(jié)段性腎小球硬化，伴腎功能不全。炎癥能夠加重腎病的發(fā)展。 第二部分：PCSK9在炎癥介導(dǎo)的阿霉素腎病小鼠腎臟脂質(zhì)沉積的作用研究 目的：探討炎癥在PCSK9介導(dǎo)的阿霉素腎病小鼠腎臟內(nèi)脂質(zhì)沉積的可能作用機(jī)制。 方法：采用油紅O法檢測(cè)腎臟脂質(zhì)沉積程度；酶比色法檢測(cè)腎臟總膽固醇的含量；real-time PCR技術(shù)檢測(cè)腎組織IL-1β、TGF-β1、HNF-1α、SREBP-2、PCSK9、LDLr mRNA表達(dá)；免疫組化技術(shù)檢測(cè)腎組織IL-1β、TGF-β1、HNF-1α、SREBP-2、PCSK9、LDLr的蛋白表達(dá)。 結(jié)果：?jiǎn)渭冄装Y組、單純腎病組、炎癥腎病組的腎組織總膽固醇含量第4周開(kāi)始呈進(jìn)行性升高，均高于對(duì)照組（P＜0.05）；單純炎癥組、單純腎病組總膽固醇第8周開(kāi)始均低于炎癥腎病組（P＜0.05）。單純炎癥組、單純腎病組和炎癥腎病組腎組織IL-1β、TGF-β1、SREBP-2、LDLr mRNA表達(dá)量第4、8、12周均高于正常組（P＜0.05），HNF-1ɑ、PCSK9表達(dá)量低于正常組（P＜0.05）。單純炎癥組、單純腎病組腎組織IL-1β、TGF-β1、SREBP-2、LDLr的蛋白表達(dá)量第8、12周低于炎癥腎病組（P＜0.05），HNF-1α、PCSK9表達(dá)量高于炎癥腎病組（P＜0.05）。 結(jié)論：小鼠阿霉素腎病腎臟炎癥程度隨時(shí)間延長(zhǎng)逐步加重。阿霉素腎病模型中膽固醇含量隨炎癥程度的加重逐漸升高，不伴高脂血癥和腎臟病變的單純炎癥反應(yīng)能引起腎臟少量脂質(zhì)沉積。隨著炎癥的逐步加重，SREBP2表達(dá)逐步增加，HNF-1α和PCSK9表達(dá)逐漸下降，LDLr表達(dá)增加，炎癥可能通過(guò)下調(diào)HNF1α-PSCK9-LDLr途徑加重腎臟脂質(zhì)沉積。
【關(guān)鍵詞】：阿霉素 酪蛋白 腎病 慢性炎癥 炎癥 HNF-1ɑ PCSK9 脂質(zhì)
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R726.9
【目錄】：

• 英漢縮略詞名詞對(duì)照5-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 第一部分：小鼠阿霉素腎病模型和慢性炎癥模型的建立13-28
• 前言13-14
• 1. 材料和方法14-19
• 2. 結(jié)果19-24
• 3. 討論24-25
• 4. 小結(jié)25-26
• 參考文獻(xiàn)26-28
• 第二部分：PCSK9 在炎癥介導(dǎo)的阿霉素腎病小鼠腎臟脂質(zhì)沉積的作用研究28-53
• 前言28-29
• 1. 材料和方法29-37
• 2. 結(jié)果37-47
• 3. 討論47-49
• 4. 小結(jié)49-50
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 全文小結(jié)53-54
• 附圖54-65
• 文獻(xiàn)綜述65-70
• 參考文獻(xiàn)68-70
• 致謝70-71
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章目錄71-72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 張巖;高血脂所致腎臟損害及機(jī)理[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊(cè);2001年05期

2 孫艷萍,陳金和,陳賢鈞;丹參對(duì)大鼠腎臟近曲小管超微結(jié)構(gòu)保護(hù)機(jī)制的研究[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2003年03期

3 肖文虎;張紅;彭湘萍;劉錄山;姜志勝;;PCSK9結(jié)構(gòu)與功能[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2009年03期

4 江璐;龔慧琴;劉錄山;;前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9的生物學(xué)功能[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2010年12期

5 崔琴;鞠現(xiàn)霞;周紅文;;PCSK9在高膽固醇血癥中的作用研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2010年16期

6 徐紅,李學(xué)旺,李航;脂質(zhì)、炎癥與腎臟病進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(移植與血液凈化分冊(cè));2005年01期

7 楊維娜;于琳華;錢(qián)亦華;靳輝;鄭黎明;柴云;;阿霉素腎病大鼠模型動(dòng)態(tài)變化及其足細(xì)胞數(shù)量和nephrin的表達(dá)變化[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2009年05期

8 張勇;張蓓;寧華英;郭云良;邢廣群;沈衛(wèi);;單次尾靜脈注射法阿霉素大鼠腎病模型的建立[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2013年01期

本文編號(hào)：1024920