本文關(guān)鍵詞：咳喘寧對(duì)哮喘大鼠肺組織趨化素樣因子1表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 咳喘寧 CKLF1 哮喘大鼠 免疫組化 RT-PCR

【摘要】：目的：通過建立SD (Sprague-Dawley)大鼠哮喘模型,采用免疫組化法和RT-PCR的方法,檢測(cè)哮喘大鼠肺組織中趨化素樣因子1(CKLF1)的表達(dá)水平,探討CKLF1在哮喘發(fā)病中的表達(dá)變化以及咳喘寧對(duì)其的影響。 方法：50只清潔級(jí)健康雄性SD大鼠,根據(jù)隨機(jī)分配原則,將其按體重編號(hào),采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組(A組)和造模組；造模組以卵白蛋白(OVA)為過敏原、氫氧化鋁為佐劑致敏SD大鼠,并連續(xù)2周予OVA霧化吸入激發(fā)制備哮喘大鼠模型。大鼠造模成功后,分為模型組(B組)、布地奈德組(C組)和咳喘寧組(D組)。模型組予生理鹽水霧化吸入,各治療組分別給予相應(yīng)藥物霧化吸入,連續(xù)用藥7天,觀察整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中各組動(dòng)物的一般情況。末次用藥24小時(shí)內(nèi)處死大鼠,采集標(biāo)本,左肺行支氣管肺泡灌洗后細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類計(jì)數(shù)；右肺組織用于觀察肺組織病理變化；同時(shí)行免疫組化觀察肺組織CKLF1蛋白表達(dá),RT-PCR法檢測(cè)肺組織中CKLF1的基因表達(dá)。 結(jié)果： 1.大鼠激發(fā)的表現(xiàn)：大鼠激發(fā)后表現(xiàn)為易激惹、煩躁、不斷搔抓顏面部皮毛等過敏癥狀,呼吸加快加深,喘息,口鼻輕度發(fā)紺,腹部抽動(dòng),激發(fā)期間活動(dòng)明顯減少、俯伏不動(dòng),反復(fù)激發(fā)后大鼠精神差,反應(yīng)不靈敏,毛色偏黃無(wú)光澤。 2.各組大鼠支氣管肺泡灌洗液的細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)：模型組BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)及EOS均升高(P0.05)；咳喘寧組與模型組比較, BALF中白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、EOS均降低(P0.05)；咳喘寧組與布地奈德組比較,BALF中各細(xì)胞數(shù)無(wú)明顯差異(P0.05)。 3.各組大鼠肺組織病理變化：正常組無(wú)明顯炎癥改變。模型組呈顯著炎性變化。布地奈德組與咳喘寧組均呈輕度炎癥變化。 4.各組大鼠肺組織CKLF1免疫組化表達(dá)：CKLF1在正常組大鼠肺組織呈弱陽(yáng)性表達(dá)；模型組大鼠肺組織內(nèi)CKLF1的表達(dá)明顯較正常組增加；布地奈德組和咳喘寧組CKLF1表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組，，弱于模型組；布地奈德組與咳喘寧組比較CKLF1表達(dá)無(wú)明顯差異。 5.各組大鼠肺組織CKLF1mRNA表達(dá)：模型組大鼠肺組織中CKLF1mRNA表達(dá)水平明顯升高,與正常組比較差異顯著(P0.05)。布地奈德組和咳喘寧組CKLF1mRNA表達(dá)水平明顯弱于模型組(P0.05),咳喘寧組CKLF1mRNA表達(dá)水平與布地奈德組相近,無(wú)顯著差異(P0.05)。 結(jié)論： 咳喘寧能減輕哮喘大鼠肺組織的炎性反應(yīng)；模型組大鼠肺組織中CKLF1的表達(dá)水平明顯升高,咳喘寧治療能降低CKLF1的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：咳喘寧 CKLF1 哮喘大鼠 免疫組化 RT-PCR
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R272;R285.5
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 英漢~.略詞對(duì)照表11-12
• 引言12-15
• 第一部分 實(shí)驗(yàn)材料與方法15-25
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料15-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)環(huán)境15
• 1.3 實(shí)驗(yàn)飼料15
• 1.4 實(shí)驗(yàn)藥物15-16
• 1.4.1 造模藥物15
• 1.4.2 受試藥物15-16
• 1.5 試劑16
• 1.6 主要儀器及設(shè)備16-17
• 1.7 溶液配制17-18
• 1.8 引物設(shè)計(jì)與合成18
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法18-25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模方法18-19
• 2.3 治療方法19
• 2.4 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法19-24
• 2.4.1 支氣管肺泡灌洗液19-20
• 2.4.2 肺組織病理學(xué)觀察20-21
• 2.4.3 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠肺組織中CKLF1的表達(dá)21
• 2.4.4 RT-PCR法檢測(cè)各組大鼠肺組織CKLF1mRNA表達(dá)21-24
• 2.5 統(tǒng)計(jì)方法24-25
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-28
• 1. 大鼠激發(fā)的表現(xiàn)25
• 2. 支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)25
• 3. HE染色觀察各組大鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)特點(diǎn)25-26
• 4. 各組大鼠肺組織CKLF1免疫組化26
• 5. 各組大鼠肺組織中CKLF1mRNA的表達(dá)變化26-28
• 第三部分 討論28-38
• 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇28-29
• 2. 動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)方法29
• 3. 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的選擇：趨化素樣因子1(CKLF1)與哮喘29-31
• 4. 陽(yáng)性對(duì)照藥物的選擇31-32
• 5. 咳喘寧的立法依據(jù)、組方分析及現(xiàn)代藥理學(xué)研究分析32-36
• 5.1 立法依據(jù)32-33
• 5.2 組方分析33-34
• 5.3 現(xiàn)代藥理學(xué)研究分析34-36
• 6. 本實(shí)驗(yàn)有關(guān)問題的探討36-38
• 結(jié)論38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 附錄45-63
• 附錄一 綜述45-60
• 參考文獻(xiàn)56-60
• 附錄二 附圖60-63
• 附錄三 研究生期間發(fā)表的論文63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 洪廣祥;全程溫法治療哮病之我見[J];中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào);2003年05期

2 楊波;洪濤;劉倩竹;馮雪茹;龔艷君;卜定方;李雪梅;薛林;趙春玉;霍勇;;人趨化素樣因子1基因轉(zhuǎn)移對(duì)急性心肌梗死大鼠心功能的影響[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期

3 李宗偉;;調(diào)理脾胃治療小兒哮喘的體會(huì)[J];光明中醫(yī);2011年07期

4 楊梅花;伍永娟;;冬病夏治配合隔姜灸治療哮喘的護(hù)理體會(huì)[J];光明中醫(yī);2012年02期

5 何權(quán)瀛;對(duì)我國(guó)哮喘動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的評(píng)價(jià)與思考[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊(cè);2005年09期

6 李穎;王雪京;;從晁恩祥“風(fēng)盛攣急”理論談哮病病機(jī)學(xué)進(jìn)展[J];北京中醫(yī)藥;2011年02期

7 艾瑞東;王雅娟;;隔姜灸聯(lián)合針刺法治療支氣管哮喘緩解期30例臨床觀察[J];河北中醫(yī);2011年05期

8 藍(lán)潔;;從風(fēng)論治咳嗽變異型哮喘[J];黑龍江中醫(yī)藥;2009年06期

9 季迎;張浩;袁洪;陽(yáng)國(guó)平;張柯;謝麗華;;趨化素樣因子-1在狼瘡性腎炎患者腎組織中的表達(dá)[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年03期

10 劉華平;;史鎖芳教授應(yīng)用大劑量甘草治療支氣管哮喘探討經(jīng)驗(yàn)[J];中醫(yī)學(xué)報(bào);2010年02期

本文編號(hào)：1013483