本文關(guān)鍵詞：小兒腎母細胞瘤中P73和SIX2基因的表達及甲基化相關(guān)性研究

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【摘要】：目的 探討小兒腎母細胞瘤組織及血液中P73和SIX2基因的轉(zhuǎn)錄表達及其啟動子甲基化狀態(tài),并觀察其與臨床病理學特征的關(guān)系,以期從表觀遺傳學角度探討腎母細胞瘤的發(fā)生機制,為其未來基因靶向治療提供理論依據(jù)。 方法 運用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)和甲基化特異性PCR(MSP)法檢測組織及血液中P73和SIX2基因轉(zhuǎn)錄表達水平及其啟動子甲基化狀態(tài),并分析小兒腎母細胞瘤中兩者與臨床病理特征的關(guān)系及基因的甲基化對其轉(zhuǎn)錄表達的影響。 結(jié)果 1.組織及外周血中提取RNA的鑒定組織及外周血中提取RNA,電泳圖顯示28S條帶亮度約為18S的兩倍,說明RNA完整性較好；測定其A260/A280值大于1.90,說明RNA純度較高。 2.組織及外周血中P73和SIX2基因mRNA相對表達量(RQ)RQ值均以一選定正常小兒外周血為對照。瘤與瘤旁組織中P73、SIX2mRNA的相對表達量(RQ)均大于正常腎組織(p0.05),而瘤和瘤旁組織之間無差異(P0.05)；同時檢測3例胎兒腎平均SIX2mRNARQ值為330.55±18.97。病例組中P73、SIXRNA的相對表達量(RQ)均高于對照組(P0.05) 3.組織及血液中中P73和SIX2基因啟動子甲基化狀態(tài)瘤與瘤旁組織中P73、SIX2基因甲基化陽性率均低于正常腎組織(P0.05),而瘤和瘤旁組織之間無差異(P0.05)；病例組中P73、SIX2基因甲基化陽性率顯著低于對照組(P均0.05)；3例胎兒腎均為非甲基化。 4.瘤組織及病例組中P73和SIX2mRNA相對表達量(RQ)、甲基化狀態(tài)與臨床資料的關(guān)系瘤組織中P73mRNA的RQ值在以腫瘤大小、臨床分期、病理分型、有無淋巴轉(zhuǎn)移分組之間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；瘤組織中SIX2mRNA的RQ值在以腫瘤大小、臨床分期、病理分型、有無淋巴轉(zhuǎn)移、有無血管浸潤分組之間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；病例組中P73、SIX2mRNA的RQ值在以腫瘤大小、臨床分期、病理分型、有無淋巴轉(zhuǎn)移、治療轉(zhuǎn)歸分組之間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；瘤組織及病例組中不同臨床資料分組之間P73、SIX2甲基化陽性率比較均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.組織及血液中P73、SIX2基因甲基化狀態(tài)與其mRNA相對表達量(RQ)的關(guān)系甲基化組中瘤組織P73、SIX2的RQ值均高于正常腎組織(P0.05),非甲基化組中三者之間的RQ值比較無統(tǒng)計學差異(P0.05)；甲基化組中瘤血P73、SIX2的RQ值均高于正常對照血(P0.05),非甲基化組中兩者之間的RQ值比較無統(tǒng)計學差異(P0.05)。 6.組織及血液中P73、SIX2mRNA相對表達量(RQ)與患兒生存的關(guān)系將38例瘤組織及45例病例組患兒的生存資料整理后,以P73、SIX2mRNA相對表達量(RQ)值的平均值為界,RQ值≥平均值患兒的中位生存時間均顯著低于平均值者(P0.05)。 7.組織及血液中p73、SIX2基因RQ值、甲基化狀態(tài)的相關(guān)關(guān)系經(jīng)Pearson和Sperman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)：瘤組織中p73和SIX2基因RQ值無相關(guān)關(guān)系(γs=0.252,P=0.128),而病例組中兩者之間有正相關(guān)關(guān)系(γ=0.785,P=0.000)；瘤組織、病例組中p73和SIX2基因甲基化狀態(tài)均有正相關(guān)關(guān)系(γ=0.558,P=0.000；γ=0.539,P=0.000)。 結(jié)論 1. P73、 SIX2基因在腎母細胞瘤組織及血液中高表達,并與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)； 2. P73、SIX2基因甲基化狀態(tài)與轉(zhuǎn)錄水平的高表達有負相關(guān)傾向； 3. P73、SIX2基因的高表達與患兒的低生存率密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：P73 SIX2 腎母細胞瘤 甲基化 表達
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-14
• 中英文~.略詞14-16
• 引言16-18
• 第一部分：小兒腎母細胞瘤中P73基因的表達及甲基化18-42
• 1 材料與方法18-31
• 1.1 研究對象及分組18-19
• 1.2 標本采集19
• 1.3 外周血淋巴細胞分離19
• 1.4 腎母細胞瘤組織及血液中P73基因的表達19-24
• 1.5 腎母細胞瘤組織及血液中P73基因啟動子的甲基化狀態(tài)24-30
• 1.6 統(tǒng)計學分析30-31
• 2 結(jié)果31-38
• 2.1 不同組織及血液中P73基因mRNA相對表達量(RQ)31-35
• 2.2 不同組織及血液中P73基因啟動子甲基化狀態(tài)35
• 2.3 P73基因甲基化狀態(tài)與mRNA相對表達量(RQ)的關(guān)系35-36
• 2.4 P73mRNA相對表達量(RQ)與患兒生存的關(guān)系36-38
• 3 討論38-42
• 第二部分：小兒腎母細胞瘤中SIX2基因的表達及甲基化42-56
• 1 材料與方法42-45
• 1.1 研究對象及分組42
• 1.2 標本采集42
• 1.3 外周血淋巴細胞分離42
• 1.4 腎母細胞瘤組織及外周血中SIX2基因的表達42-43
• 1.5 腎母細胞瘤組織及血液中SIX2基因啟動子的甲基化狀態(tài)43-44
• 1.6 統(tǒng)計學分析44-45
• 2 結(jié)果45-52
• 2.1 不同組織及血液中SIX2基因mRNA相對表達量(RQ)45-49
• 2.2 不同組織及血液中SIX2基因啟動子甲基化狀態(tài)49
• 2.3 SIX2基因甲基化狀態(tài)與mRNA相對表達量(RQ)的關(guān)系49-50
• 2.4 SIX2mRNA相對表達量(RQ)與患兒生存的關(guān)系50-52
• 3 討論52-56
• 結(jié)論56-57
• 附圖57-67
• 參考文獻67-70
• 綜述70-81
• 參考文獻77-81
• 個人簡歷81-82
• 致謝82

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王先火;趙秀娟;邱立華;王華慶;王璽;;腫瘤發(fā)生的表觀遺傳學:進展與臨床意義[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2012年05期

2 張妍;高宇;王筱金;朱莎;施蓉;金萍;楊友;田英;;p73基因DNA甲基化與兒童急性白血病的關(guān)系[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2011年07期

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本文編號：1008208