本文關(guān)鍵詞：長春地區(qū)特發(fā)性矮小兒童SHOX基因突變檢測與分析

  更多相關(guān)文章： 特發(fā)性矮小 SHOX基因 基因突變 IGF-1

【摘要】：研究目的： 特發(fā)性矮小(idiopathic short stature，，ISS)是指原因不明的身材矮小，是兒童期身材矮小的最常見原因。在最能決定兒童身高的各種因素中，遺傳因素起著主要作用。矮小同源盒基因（short stature homcobox-coniaining，SHOX）編碼蛋白作為轉(zhuǎn)錄激活因子在促進(jìn)生長發(fā)育過程中起重要調(diào)控作用，SHOX基因異常與ISS有極大地相關(guān)性，且存在一定區(qū)域性差別。本研究對長春地區(qū)確診為ISS患兒進(jìn)行發(fā)育相關(guān)SHOX基因突變檢測，并分析其與生長相關(guān)因子IGF-1之間的關(guān)系，為探討ISS的發(fā)病機(jī)制及對ISS患兒篩查提供一定的理論依據(jù)。 研究方法： 1．研究對象：病例組來源于2010年1月至2012年12月在長春市兒童醫(yī)院內(nèi)分泌門診已確診為ISS的患者，共計209例,其中男孩130例，女孩79例。對照組來源于2010年1月至2012年12月在長春市兒童醫(yī)院健康體檢中心進(jìn)行體格檢查的健康兒童,共計50例，其中男孩31例，女孩19例。 2．隨機(jī)抽取30例ISS患兒和30例正常兒童，采用酚氯仿抽提法提取全血DNA，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增SHOX基因外顯子2，利用測序儀對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序，并與GENEBANK中SHOX基因的標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對。 3．采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定研究對象血清中IGF-1水平，分別對正常對照組、SHOX異常和ISS患兒組無SHOX異常血清中的IGF-1水平進(jìn)行組間兩兩比較，確定IGF-1與SHOX基因突變的關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1．所選取的研究對象，性別和年齡構(gòu)成比無統(tǒng)計學(xué)差異。 2．常規(guī)提取DNA，利用PCR擴(kuò)增SHOX基因外顯子2序列，并對擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示：在目的條帶相應(yīng)分子量位置擴(kuò)增條帶清晰。進(jìn)一步測序可見：正常對照組SHOX基因測序未發(fā)現(xiàn)C缺失，無堿基轉(zhuǎn)換的改變。30例ISS患兒中發(fā)現(xiàn)SHOX基因異常為10例（33.3%），其中8例SHOX基因存在C缺失；2例SHOX基因突變。 3．ISS患兒血清IGF-1水平明顯低于正常對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義；ISS患兒無基因突變組的血清IGF-1水平明顯低于正常對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義；ISS患兒基因突變組的血清IGF-1水平明顯低于正常對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義；ISS患兒基因突變組的血清IGF-1水平不明顯低于基因無突變組，差別不具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論： 1．長春地區(qū)特發(fā)性矮小患者中，存在SHOX基因突變，該突變可能是長春地區(qū)ISS患兒病因之一。 2．特發(fā)性矮小患兒中血清IGF-1水平明顯降低，IGF-1水平與特發(fā)性矮小疾病的發(fā)病相關(guān)。 3．通過對ISS患兒SHOX基因突變的檢測及其與血清IGF-1關(guān)系分析，為探討長春地區(qū)特發(fā)性矮小兒童分子生物學(xué)發(fā)病機(jī)制，進(jìn)一步深入開展特發(fā)性矮小兒童基因篩查奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：特發(fā)性矮小 SHOX基因 基因突變 IGF-1
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R725
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 中英文縮寫對照10-11
• 第1章 緒論11-17
• 1.1 特發(fā)性矮小簡介11-14
• 1.1.1 特發(fā)性矮小定義11
• 1.1.2 特發(fā)性矮小的病因及發(fā)病機(jī)制11-12
• 1.1.3 流行病學(xué)調(diào)查12
• 1.1.4 特發(fā)性矮小的診斷12-14
• 1.1.5 特發(fā)性矮小的治療14
• 1.2 特發(fā)性矮小與 IGF-1 和 SHOX 基因的關(guān)系14-16
• 1.2.1 特發(fā)性矮小與 IGF-1 的關(guān)系14-15
• 1.2.2 特發(fā)性矮小與 SHOX 基因的關(guān)系15-16
• 1.3 研究目的及意義16-17
• 第2章 材料與方法17-22
• 2.1 主要試劑與儀器17-18
• 2.1.1 主要試劑17
• 2.1.2 主要儀器17-18
• 2.2 研究對象18-19
• 2.2.1 研究對象18
• 2.2.2 病例納入標(biāo)準(zhǔn)18-19
• 2.2.3 病例排除標(biāo)準(zhǔn)19
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)分組19
• 2.2.5 樣本采集19
• 2.3 SHOX 基因測序19-21
• 2.3.1 PCR 引物設(shè)計與合成19
• 2.3.2 樣本 DNA 提取19-20
• 2.3.3 PCR 擴(kuò)增目的基因20
• 2.3.4 SHOX 基因測序結(jié)果分析20-21
• 2.4 血清 IGF-1 的測定21
• 2.5 統(tǒng)計學(xué)分析21
• 2.6 質(zhì)量控制21-22
• 第3章 結(jié)果22-29
• 3.1 ISS 組與正常兒童對照組性別構(gòu)成比較22
• 3.2 ISS 組與正常兒童對照組年齡比較22
• 3.3 PCR 擴(kuò)增 SHOX 基因第 2 外顯子產(chǎn)物的鑒定結(jié)果22-23
• 3.4 SHOX 基因外顯子 2 PCR 擴(kuò)增 DNA 測序結(jié)果23-27
• 3.5 研究對象血清 IGF-1 變化情況27-29
• 3.5.1 ISS 患兒組與正常對照組血清 IGF-1 比較結(jié)果27
• 3.5.2 ISS 患兒無基因突變組與正常對照組血清 IGF-1 比較結(jié)果27
• 3.5.3 ISS 患兒基因突變組與正常對照組血清 IGF-1 比較結(jié)果27-28
• 3.5.4 ISS 患兒基因突變組與無基因突變組血清 IGF-1 比較結(jié)果28-29
• 第4章 討論29-35
• 4.1 ISS 患兒 SHOX 基因突變情況29-33
• 4.1.1 SHOX 基因結(jié)構(gòu)29-30
• 4.1.2 SHOX 基因突變與特發(fā)性矮小30-32
• 4.1.3 SHOX 基因測序?qū)υ\斷 ISS 的意義32-33
• 4.2 ISS 患兒與血清 IGF-1 水平的關(guān)系33-35
• 第5章 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 作者簡介及取得科研成果40-41
• 致謝41

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 韓振靚,李堂;SHOX基因在矮身材中的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;2005年04期

2 侯淑琴,鄭華清,周文郁,趙立娟,蕭占森,朱席琳,劉怡雯,邱長春;高血壓患者血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因多態(tài)性分析[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1999年04期

3 王凡;錢尚統(tǒng);顧勤;;補(bǔ)益肝腎法為主對青少年身高生長的臨床研究[J];遼寧中醫(yī)雜志;2007年08期

4 倪樹芳;;兒童矮小癥80例病因分析[J];山西醫(yī)藥雜志;2009年11期

5 張星星,易著文,吳小川,王秀英,黨西強(qiáng);特發(fā)性矮小男童個性及心理行為研究[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2005年04期

6 李堂;兒童特發(fā)性矮身材[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2005年06期

7 支滌靜;沈水仙;趙諸慧;羅飛宏;葉蓉;程若倩;陸忠;;身材矮小兒童523例病因分析[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2006年08期

8 程若倩;沈水仙;屠月珍;夏紅;王輝;支滌靜;姚經(jīng)建;孫蘭;洪慶榮;葉江楓;趙諸慧;徐秀;郭志平;徐臻;周錦華;羅飛宏;;上海市城郊兩區(qū)整群抽樣6～18歲兒童青少年身高分布特點(diǎn)及矮小癥患病率調(diào)查[J];中國循證兒科雜志;2009年01期

9 張星星;易著文;王秀英;何小解;何慶南;;特發(fā)性矮小患兒生長激素-胰島素樣生長因子軸變化的研究[J];中國實(shí)用兒科雜志;2008年04期

10 陳祺;羅燕平;;養(yǎng)陰扶脾法治療小兒矮小癥[J];中醫(yī)藥學(xué)報;2010年05期

本文編號：1008399