本文關(guān)鍵詞：不同培養(yǎng)方法對(duì)山羊瘤胃上皮細(xì)胞生長(zhǎng)及角蛋白18表達(dá)量的影響

  更多相關(guān)文章： 山羊 瘤胃 上皮細(xì)胞 原代培養(yǎng) 分離 CK

【摘要】：本試驗(yàn)旨在研究不同培養(yǎng)方法對(duì)山羊瘤胃上皮細(xì)胞生長(zhǎng)及角蛋白18(CK18)表達(dá)量的影響。采集42日齡山羊的瘤胃上皮組織,分別采用酶消化法和組織塊法對(duì)其進(jìn)行體外培養(yǎng)。通過光學(xué)顯微鏡觀察原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)階段的細(xì)胞形態(tài),檢測(cè)第5代山羊瘤胃上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,并采用細(xì)胞免疫熒光法對(duì)山羊瘤胃上皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示:1)經(jīng)0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸消化獲得的原代培養(yǎng)山羊瘤胃上皮細(xì)胞于2 d開始貼壁生長(zhǎng),5 d細(xì)胞開始明顯增多,10 d細(xì)胞數(shù)量達(dá)到最大。2)經(jīng)組織塊法獲得的原代培養(yǎng)山羊瘤胃上皮細(xì)胞于4 d開始"爬出"組織塊,8 d細(xì)胞開始明顯增多,14 d細(xì)胞數(shù)量達(dá)到最大。3)經(jīng)免疫熒光染色顯示2種方法獲得的細(xì)胞胞漿內(nèi)CK18均呈陽(yáng)性表達(dá)且細(xì)胞純度后者明顯高于前者。4)組織塊法獲得的細(xì)胞CK18表達(dá)量顯著高于酶消化法(P0.05)。綜合得出,與酶消化法相比,應(yīng)用組織塊法可成功獲得純度更高的山羊瘤胃上皮細(xì)胞。
【作者單位】： 中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所湖南省農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 山羊 瘤胃 上皮細(xì)胞 原代培養(yǎng) 分離 CK
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31201826) 中央駐湘科研機(jī)構(gòu)技術(shù)創(chuàng)新發(fā)展專項(xiàng)(2013TF3006)
【分類號(hào)】：S827
【正文快照】： 瘤胃是反芻動(dòng)物消化代謝和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收最重要的場(chǎng)所。瘤胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層、漿膜4層構(gòu)成。瘤胃上皮屬于復(fù)層上皮,由黏膜向漿膜面分為4層:角質(zhì)化細(xì)胞層、顆粒細(xì)胞層、棘狀細(xì)胞層和基底層。瘤胃上皮有著重要的生理作用,如養(yǎng)分吸收與運(yùn)輸、揮發(fā)性脂肪酸代謝、對(duì)瘤胃壁

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