本文關(guān)鍵詞：奶牛囊腫黃體及不同時期妊娠黃體差異蛋白組學(xué)研究

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【摘要】：黃體作為一個暫時的分泌器官組織對于奶牛繁殖至關(guān)重要,對于發(fā)情周期的形成、早期妊娠、早期胚胎的入植、胚胎的維持、妊娠狀態(tài)的調(diào)節(jié)都有重要的意義。通過對黃體蛋白質(zhì)表達(dá)及潛在功能分析,可為揭示黃體在奶牛生殖生理過程中的作用機(jī)理提供了一種新的研究角度。本實(shí)驗(yàn)通過雙向電泳技術(shù)建立黃體蛋白表達(dá)圖譜,通過PDQuest 8.0軟件對圖譜進(jìn)行分析,分別比較不同黃體間的差異蛋白,并對差異蛋白斑點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。通過比較不同制備方法、不同規(guī)格IPG膠條、不同濃度SDS-PAGE膠濃度,優(yōu)化試驗(yàn)條件和相關(guān)的參數(shù),建立奶牛黃體雙向電泳蛋白圖譜。最終選定TCA-丙酮沉淀法制備樣品,18cmmpH4～7的IPG膠條及12%的SDS-PAGE凝膠濃度,得到了高質(zhì)量的蛋白點(diǎn),分離得到1071個左右的蛋白點(diǎn)的奶牛黃體蛋白2-DE圖譜。通過雙向電泳技術(shù),對正常黃體和發(fā)生囊腫黃體組織進(jìn)行分析,分析獲取8個差異蛋白點(diǎn),質(zhì)譜成功鑒定出6個：α-1-酸性蛋白,膠質(zhì)酸性蛋白,核磷蛋白,牛血清白蛋白晶體結(jié)構(gòu)A鏈,絲氨酸蛋白酶抑制蛋白,泛素羧基末端水解酶,其中a-1-酸性蛋白可能與黃體囊腫發(fā)生或相關(guān)組織造成的炎癥反應(yīng)有關(guān),膠質(zhì)纖維酸性蛋白可能與黃體囊腫造成的激素分泌的異常有關(guān),核磷蛋白本身不僅參與卵巢正常的生理生化過程還可能參與了黃體囊腫的發(fā)生,泛素羧基末端水解酶可能與卵巢的發(fā)育和卵黃的發(fā)育有關(guān)。通過雙向電泳技術(shù)對不同時期黃體進(jìn)行研究,將黃體分為未妊娠黃體組、妊娠三個月黃體組和妊娠六個月黃體組,成功鑒定出了6種蛋白質(zhì)：26s蛋白酶體非酶調(diào)節(jié)亞基蛋白,纖維蛋白原γ多肽,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶蛋白,核纖層蛋白p,硫氧還原蛋白,微管蛋白β-5鏈,26s蛋白酶體調(diào)節(jié)亞基蛋白可能與妊娠胚胎的早期活動有關(guān),纖維蛋白原γ可能與妊娠的維持作用有關(guān),DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶可能與黃體的形成有關(guān),核纖層蛋白隨著妊娠期的增長表達(dá)量在減少可能與黃體細(xì)胞的活性有關(guān),硫氧還原蛋可能與黃體的維持調(diào)控有關(guān)。本研究建立并優(yōu)化了奶牛黃體蛋白雙向電泳技術(shù)體系,為黃體蛋白差異蛋白組學(xué)研究奠定了技術(shù)基礎(chǔ),也為黃體囊腫、黃體的發(fā)育相關(guān)分子機(jī)理的研究提供一定的參考。
【關(guān)鍵詞】：黃體 蛋白組 囊腫 妊娠
【學(xué)位授予單位】：寧夏大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S823
【目錄】：

• 摘要4-5
• Summary5-7
• 文獻(xiàn)綜述7-11
• 1 黃體生理研究進(jìn)展7-9
• 2 繁殖蛋白組學(xué)研究進(jìn)展9-10
• 3 研究的背景與意義10-11
• 第一章 奶牛黃體蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜的建立11-25
• 1 材料與方法11-20
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-23
• 3 討論23-24
• 4 小結(jié)24-25
• 第二章 奶牛黃體囊腫的蛋白組學(xué)研究25-32
• 1 材料與方法25-27
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-29
• 3 討論29-31
• 4 小結(jié)31-32
• 第三章 不同時期黃體蛋白組學(xué)研究32-39
• 1 材料與方法32-33
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-36
• 3 討論36-38
• 4 小結(jié)38-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-46
• 致謝46-47
• 附錄47-48
• 個人簡介48

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1 黃群山,王建辰;牛的帶腔黃體[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;1997年02期

2 ;[J];;年期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳信;奶牛囊腫黃體及不同時期妊娠黃體差異蛋白組學(xué)研究[D];寧夏大學(xué);2016年

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本文編號：915705