本文關(guān)鍵詞：中獸藥黃芪莖葉散臨床前研究

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【摘要】：目的本課題通過對中獸藥黃芪莖葉散進(jìn)行臨床前研究,旨在開發(fā)黃芪藥材新的藥用部位,科學(xué)合理地利用黃芪莖葉自然資源,為黃芪莖葉應(yīng)用于中獸藥領(lǐng)域奠定理論基礎(chǔ),為開發(fā)其藥用價值提供科學(xué)依據(jù)。方法(1)黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究:采用觀察法、石蠟切片法、顯微鑒別法對其性狀、組織特征及粉末特征進(jìn)行研究;采用TLC對其進(jìn)行定性研究;采用藥典法測定水分、總灰分、浸出物的含量;采用HPLC測定黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量;采用比色法測定總皂苷、APS的含量。(2)黃芪莖葉散的藥學(xué)研究:采用藥典法對黃芪莖葉散處方及制劑工藝進(jìn)行研究;采用單篩分法、烘干法、裝量差異檢查法對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究;根據(jù)獸藥穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范對其穩(wěn)定性進(jìn)行研究。(3)黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究:采用倍比稀釋法與藥敏紙片法結(jié)合應(yīng)用來探究其體外抑菌效果;采用ConA與LPS誘導(dǎo)的體外小鼠脾細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)來探究其是否具有免疫功能調(diào)節(jié)作用。(4)黃芪莖葉散的急性毒性試驗(yàn):經(jīng)過一次給藥后觀察小鼠的毒性反應(yīng)并測定其LD50并做最大耐受量測定。結(jié)果(1)黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究:本品性狀:莖呈圓柱形,分枝較多,長約為50~60 cm,直徑約為0.5~1.5 cm。質(zhì)地堅(jiān)硬,韌性強(qiáng)不易折斷,斷面纖維性強(qiáng),皮部呈黃綠色,木部呈淡黃色,呈放射狀紋理,有裂隙。葉片呈橢圓形或長卵圓形,長約為0.5~1.5 cm,寬約為0.5~1.0 cm,葉片先端鈍尖,截形或具短尖頭,全緣;其托葉呈披針形或三角形。羽狀復(fù)葉互生,呈黃綠色,皺縮;干燥葉片紙質(zhì),易碎。氣微味甘,嚼之微有豆腥味。鑒別:莖橫切面:表皮細(xì)胞多呈方形,皮層和髓分化不明顯,皮層由厚角組織、薄壁組織組成。維管束中維管柱排列明顯。葉橫切面:上、下表皮細(xì)胞呈類方形,最外層為角質(zhì)層。上下各一層?xùn)艡诮M織且通過主脈。海綿組織細(xì)胞呈類圓形,有草酸鈣簇晶,主脈維管束外韌型,周圍排列著柱鞘纖維,呈環(huán)形;薄壁細(xì)胞中有草酸鈣棱晶,木薄壁細(xì)胞中,偶見草酸鈣簇晶。本品粉末呈黃綠色,其中含有螺紋導(dǎo)管、纖維、草酸鈣簇晶、厚壁細(xì)胞和淀粉粒。薄層色譜斑點(diǎn)清晰、圓整且重復(fù)性較好。黃芪莖葉水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.24%~12.24%,總灰分為8.21%~10.55%,水溶性浸出物為12.12%~27.30%,醇溶性浸出物為6.89%~10.28%,總皂苷為23.74~26.52 mg·g-1,APS為23.31~45.70 mg·g-1,黃芪甲苷為0.047%~0.18%,毛蕊異黃酮葡萄糖苷為0.21%~0.26%。(2)黃芪莖葉散的藥學(xué)研究:通過5號藥典篩的粉末重量為96%~99%。外觀色澤均勻,無花紋、色斑。水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.04%~9.28%。裝量差異均未超出裝量差異限度,且其在加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)下均較穩(wěn)定。(3)黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究:黃芪莖葉散提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌和綠膿桿菌四種供試菌的最低抑菌濃度值(MIC值),其中水提物(一年生)為15.6、62.5、31.2、62.5 mg·mL-1;水提物(多年生)為15.6、31.2、31.2、62.5 mg·mL-1;醇提物(一年生)為7.81、31.2、31.2、62.5 mg·mL-1;醇提物(多年生)為7.81、31.2、15.6、62.5mg·mL-1。最低殺菌濃度值(MBC值)分別為62.5、31.2、125 mg·mL-1、62.5 mg·mL-1。黃芪莖葉散提取物對ConA誘導(dǎo)的體外小鼠脾細(xì)胞增值試驗(yàn)探究的結(jié)果為,中低劑量組OD值降低,而高劑量組OD值增高。對LPS誘導(dǎo)的體外小鼠脾細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果為高中劑量組OD值增高,而低劑量組除水提物(一年生)及醇提物(多年生)外,OD值均增高。(4)黃芪莖葉散的急性毒性試驗(yàn):經(jīng)一次給藥后未能測出其LD50。在給藥后7日內(nèi),觀察到小鼠活動正常,被毛光澤,眼、鼻、口腔未見異常分泌物,進(jìn)食情況良好,排泄物顏色正常且無一例死亡現(xiàn)象。結(jié)論(1)黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究:本試驗(yàn)采用的方法方便快捷,有較好的可重復(fù)性,結(jié)果準(zhǔn)確,可作為制定黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。(2)黃芪莖葉散的藥學(xué)研究:對黃芪莖葉散,建立切實(shí)可行的質(zhì)量控制方法,包括粒度、外觀均勻度、含量測定、水分、裝量差異等,黃芪莖葉散經(jīng)加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)后本品性狀、含量、粒度、外觀均勻度均符合規(guī)定。(3)黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究:黃芪莖葉散對金黃色葡萄球菌,大腸桿菌,枯草桿菌及綠膿桿菌四種供試菌均有抑制作用,且均能促進(jìn)ConA、LPS誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞體外增殖,說明其具有免疫增強(qiáng)作用。(4)黃芪莖葉散的急性毒性試驗(yàn):黃芪莖葉散為安全低毒的綠色中獸藥產(chǎn)品。
【關(guān)鍵詞】：黃芪莖葉散 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 穩(wěn)定性 抑菌活性 免疫增強(qiáng)作用
【學(xué)位授予單位】：佳木斯大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S853.7
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-13
• 第1章 文獻(xiàn)綜述13-17
• 1.1 黃芪莖葉研究進(jìn)展13-15
• 1.1.1 黃芪莖葉的化學(xué)成分13-14
• 1.1.2 黃芪莖葉的藥理學(xué)研究14-15
• 1.1.3 研究開發(fā)現(xiàn)狀15
• 1.2 黃芪莖葉在中獸藥領(lǐng)域中的應(yīng)用15-16
• 1.3 展望16-17
• 第2章 黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究17-36
• 2.1 儀器與材料17-18
• 2.1.1 儀器17
• 2.1.2 試劑17-18
• 2.1.3 材料18
• 2.2 方法18-25
• 2.2.1 黃芪莖葉原料藥材性狀、組織特征18-19
• 2.2.2 黃芪莖葉原料藥材中指標(biāo)成分的鑒別19-20
• 2.2.3 黃芪莖葉原料藥材的檢查20-21
• 2.2.4 黃芪莖葉原料藥材的浸出物21
• 2.2.5 黃芪莖葉原料藥材的含量測定21-25
• 2.3 結(jié)果與討論25-34
• 2.3.1 黃芪莖葉原料藥材性狀、組織特征結(jié)果25-27
• 2.3.2 黃芪莖葉原料藥材中指標(biāo)成分的鑒別結(jié)果27
• 2.3.3 黃芪莖葉原料藥材的檢查結(jié)果27-28
• 2.3.4 黃芪莖葉原料藥材的浸出物測定結(jié)果28
• 2.3.5 黃芪莖葉原料藥材的含量測定結(jié)果28-34
• 2.3.6 討論34
• 2.4 小結(jié)34-36
• 第3章 黃芪莖葉散的藥學(xué)研究36-43
• 3.1 儀器與材料36
• 3.1.1 儀器36
• 3.1.2 試劑36
• 3.1.3 材料36
• 3.2 方法36-37
• 3.2.1 處方及制劑工藝研究36
• 3.2.2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究36-37
• 3.2.3 穩(wěn)定性考察37
• 3.3 結(jié)果與討論37-41
• 3.3.1 黃芪莖葉散的藥學(xué)研究結(jié)果37-41
• 3.3.2 討論41
• 3.4 小結(jié)41-43
• 第4章 黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究43-59
• 4.1 儀器與材料43-44
• 4.1.1 儀器43
• 4.1.2 試劑43
• 4.1.3 材料43-44
• 4.2 方法44-47
• 4.2.1 體外抑菌作用研究44-45
• 4.2.2 黃芪莖葉散對免疫功能調(diào)節(jié)作用的研究45-47
• 4.3 結(jié)果與討論47-58
• 4.3.1 黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究結(jié)果47-57
• 4.3.2 討論57-58
• 4.4 小結(jié)58-59
• 第5章 黃芪莖葉散急性毒性試驗(yàn)59-61
• 5.1 儀器與材料59
• 5.1.1 儀器59
• 5.1.2 材料59
• 5.1.3 實(shí)驗(yàn)動物59
• 5.2 方法59-60
• 5.2.1 受試藥品的制備59
• 5.2.2 LD50測定59
• 5.2.3 最大耐受量測定59-60
• 5.3 結(jié)果與討論60
• 5.3.1 LD50測定結(jié)果60
• 5.3.2 最大耐受量測定結(jié)果60
• 5.3.3 討論60
• 5.4 小結(jié)60-61
• 結(jié)論61-62
• 參考文獻(xiàn)62-67
• 致謝67-68
• 英文縮寫68-69
• 附圖69-70
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)成果70

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：903406